Informe Nro. 1 Identificación, biología y manejo de Drosophila

melanogaster

Crespo, Gleirimar; Lozada Maria; Meléndez, Karla y Padrón Diana.

Aspectos introductorios

Drosophila melanogaster, conocida comúnmente como la mosca del vinagre

o de la fruta, es un excelente producto de laboratorio y, por ello, ha jugado un

papel muy importante en el desarrollo de la Genética. A mediado del siglo XVIII

nace Thomas Hunt Morgan (1866-1945) considerado fundador de la

Genética quien durante sus estudios utilizó la Drosophila melanogaster, y la

adopta como animal de experimentación a principios del siglo XX, texto de

Biología (Campbell y Reece, 2007)

Entre las diferentes ventajas que ofrece, destacan su mantenimiento sencillo y

económico, que permite evaluar aspectos interesantes por sus características

genéticas de una forma rutinaria, la capacidad de producir, en un espacio

reducido, un número de descendientes muy elevado en una sola generación y

la gran variedad de mutantes fenotípicos que se conocen, como refiere la guía

práctica de laboratorio, Identificación, biología y manejo de Dosophila

melanogaster (Pinto, 2014) sobre los trabajos del genetista Thomas Hunt

Morgan (1866-1945) que gracias a ellos la Drosophila melanogaster se

convirtió en uno de los principales organismos Modelo en Genética, por

presentar múltiples ventajas en los experimentos entre ellas….. “Hay gran

cantidad de mutantes, tanto naturales como inducidos. Produciéndose pases

especiales que permiten cuidadosos análisis genéticos”.

El estudio de modelos biológicos simples permite comprender los principios

que se pueden aplicar a sistemas más complejos. Muchas de las

investigaciones están basadas en el estudio de los genes homólogos de

Drosophila, es decir genes con estructura y función similares a otros animales,

incluyendo los vertebrados. Esta universalidad permite comprender la

complejidad de los sistemas biológicos.

Entre de las ventajas de D. melanogaster como organismo experimental son:

Método sencillo y poco costoso de crianza.

Ciclo de vida corto (10 a 14 días dependiendo de la temperatura).

Muy prolífica (cada hembra puede generar de 300 a 500 individuos).

Gran cantidad de mutaciones espontáneas o inducidas que han

permitido hacer un mapa genético y citológico completo.

Presencia de cromosomas politénicos en las glándulas salivales de las

larvas de tercer estadío

Organismo eucariota, con sistema nervioso relativamente complejo.

Pequeño tamaño del genoma, con reducido número de cromosomas (n=4,

2n=8) con un par sexual XY en el macho y XX en la hembra y 3 pares de

autosomas (el cromosoma 4 es muy pequeño con muy pocos genes

funcionales).

Se puede considerar a Drosophila como cosmopolita, aunque es más

abundante en las estaciones cálidas en sitios donde se fermentan frutas como

los plátanos, las uvas, etc., por lo que es común encontrarla en los mercados y

alrededor de los depósitos de basura en las casas. Con el objeto de utilizar

Drosophila melanogaster en forma adecuada para los estudios en laboratorio,

es preciso conocer los diversos estados de su desarrollo y diferenciar los

sexos con toda claridad.

Por todo esto también es considerada la Drosophila melanogaster uno de los

organismos vivientes capaces de demostrar las investigaciones de Johann

Mendel y sus leyes las cuales planteaban: Ley 1era “uniformidad de los

híbridos” al cruzar razas puras, todos los individuos hijos pertenecen al carácter

dominante aunque tienen información para ambos caracteres los cuales

denominó híbridos. Y la 2da Ley “Segregación de alelos” al cruzar los híbridos

obtenidos en la F1, los dos caracteres antagónicos que poseen se separan y

reparten entre los distintos gametos, así aparecen varios fenotipos en la

descendencia.

Objetivo

El objetivo principal de esta primera práctica es el de familiarizarse con el

Drosophila melanogaster. Los conocimientos adquiridos en esta práctica son

fundamentales para el desarrollo del resto de las prácticas donde se utilizara

éste espécimen biológico. Los objetivos específicos son:

-Medios de cultivo de la Drosophila melanogaster

-Conocer el ciclo de vida y la morfología de las diferentes fases del desarrollo

de Drosophila. Características fenotípicas.

-Identificar los marcadores fenotípicos que presenta el adulto y analizar el

correspondiente genotipo para deducir el tipo de mutación .presentes en

Drosophila melanogaster

-Distinguir las diferencias morfológicas entre el macho y la hembra de

Drosophila melanogaster

-Desarrollar un cruce hasta la F2 entre cepas de las moscas mutantes y

silvestres

Materiales y métodos

ACTIVIDAD 1: Preparación del medio de cultivo para individuos de Drosophila

Melanogaster.

En un beaker de 2000 ml se llenó 750 ml de agua, se completa los 900 ml con

150 ml medido en una propeta llevándolo a la plancha(Boeco germany) y se deja

calentando, en otro beaker de 400 ml se pesó en la balanza(Adventurer tm

oehaus) 111 g de harina agregándola al agua que se estaba calentando,

mezclando inmediatamente con una espátula cuidando que no se formaran

grumos ni se pegara al fondo, luego se le añade 48 g de melaza que se había

pesado previamente en la balanza en un beaker de 100 ml procurando

desprenderla de las paredes de dicho beaker ya que se adhiere mucho al vidrio y

tratando de integrar la mayor cantidad de esta melaza a la mezcla de harina con

agua manteniendo el movimiento envolvente con la espátula, posteriormente se

debe pesar 3,75 g de levadura dispuestas en una capsula de Petri la cual debe

ser tapada para que no se contamine con el aire para luego ser diluida con agua

antes de agregarla a la mezcla presente en la plancha, una vez alcanzado un

punto cercano a la ebullición se le suma 6,25 ml de ácido propionico (fungicida)

medido en un cilindro de 10ml, el cual evitará la contaminación dentro de la

mezcla preparada, luego se procede a apagar el fuego y se espera a que la

temperatura descienda.

Previamente los frascos a contener la mezcla se acondicionaron mediante el

lavado con solución jabonosa y desagüe con abundante agua para luego añadir

una pequeña porción de cloro para elimina posibles contaminantes en el entorno

del frasco, luego se lava con agua destilada y se secaron con servilletas que

contenían un rociado de alcohol para evitar posibles hongos de la servilleta, cabe

destacar que la servilleta fue utilizada solo para limpiar la zona externa del frasco

no la parte interna ya que esta superficie fue secada volteando el frasco y con

ligeros golpes provocar que el líquido dentro de ellos descendiera y así la servilleta

pudiera absorberlo, estos permanecieron volteados hasta que se secaran

completamente, por último se rotularon cada frasco para mantener el control y

seguimiento de estos.

Al culminar la preparación del medio de cultivo se vierte en los frascos

seleccionados y acondicionados dicha mezcla, manteniendo el criterio de no

superar los 2 cm de altura dentro de ellos, dejando que bajara un poco el calor se

prepararon las servilletas que absorberían la humedad y formarían el ambiente

para las pupas del espécimen rociándolas también con alcohol, estas se

introducen cuando el medio se está ya solidificando y se tapan con los tapones,

hechos de algodón recubiertos con gaza y previamente esterilizados en la

autoclave (Allamerican).