“EVALUACIÓN DE LOS NIVELES DE AMILOIDE … · Cuadro Comparativo de la Media aritmetica del...
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA “EVALUACIÓN DE LOS NIVELES DE AMILOIDE SÉRICO A FRENTE AL FIBRINÓGENO COMO BIOMARCADORES DE INFLAMACIÓN EN EQUINOS”. Autora: Hillary Samanta Buñay Enriquez Tutora: MSc. Martha Amelia Naranjo Fuentala Quito, enero de 2018
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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
“EVALUACIÓN DE LOS NIVELES DE AMILOIDE SÉRICO A FRENTE AL FIBRINÓGENO COMO BIOMARCADORES DE INFLAMACIÓN EN
EQUINOS”.
Autora: Hillary Samanta Buñay Enriquez
Tutora: MSc. Martha Amelia Naranjo Fuentala
Quito, enero de 2018
II
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
TEMA:
“Evaluación de los niveles de amiloide sérico A frente al fibrinógeno como biomarcadores de inflamación en equinos”.
Trabajo de titulación presentado como requisito previo a la obtención del
Título de Médico Veterinario y Zootecnista
AUTORA:
Hillary Samanta Buñay Enriquez
TUTORA:
Dra. Martha Naranjo, MSc
Quito, enero de 2018
III
DERECHOS DE AUTOR
Yo, Hillary Samanta Buñay Enriquez en calidad de autora del trabajo de
investigación: “EVALUACIÓN DE LOS NIVELES DE AMILOIDE SÉRICO A
FRENTE AL FIBRINÓGENO COMO BIOMARCADORES DE INFLAMACIÓN
EN EQUINOS”, autorizo a la Universidad Central del Ecuador hacer uso de todos
los contenidos que me pertenecen o parte de los que contiene esta obra, para
fines estrictamente académicos o de investigación.
Los derechos que como autor me corresponden, con excepción de la presente
autorización, seguirán vigentes a mi favor, de conformidad con lo establecido en
los artículos 5, 6, 8; 19 y demás pertinentes de la Ley de Propiedad Intelectual y
su Reglamento.
Así mismo, autorizo a la Universidad Central del Ecuador para que realice
digitalización y publicación de este trabajo de investigación en el repositorio
virtual, de conformidad a lo dispuesto en el Art. 144 de la Ley Orgánica de
Educación Superior.
En la ciudad de Quito, a los 05 días del mes de diciembre del 2017.
Hillary Samanta Buñay Enriquez
Cd. No 1717267742
E-mail: [email protected]
IV
INFORME DE APROBACIÓN DEL TUTOR/A DEL TRABAJO DE TITULACIÓN
Yo, Martha Amelia Naranjo Fuentala en mi calidad de tutora del trabajo de
titulación, modalidad Proyecto de Investigación, elaborado por HILLARY
SAMANTA BUÑAY ENRIQUEZ; cuyo título es: EVALUACIÓN DE LOS NIVELES
DE AMILOIDE SÉRICO A FRENTE AL FIBRINOGENO COMO BIOMARCADORES DE
INFLAMACIÓN EN EQUINOS, previo a la obtención del grado de Médico
Veterinario Zootecnista; considero que el mismo reúne los requisitos y méritos
para ser sometido a la evaluación por parte del tribunal examinador que se
designe, por lo que lo APRUEBO, a fin de que el trabajo sea habilitado para
continuar con el proceso de titulación determinado por la Universidad Central del
Ecuador.
En la ciudad de Quito, a los 5 días del mes de diciembre de 2017.
Dra. Martha Amelia Naranjo Fuentala, MSc
Docente- Tutora
C.I. 1706837794
V
APROBACIÓN DE LA PRESENTACIÓN ORAL/TRIBUNAL
El tribunal constituido por: Dra. Gabriela Toro, Dr. Edison Encalada, Dra.
Nadia López, Dr. Javier Vargas.
Luego de receptar la presentación oral del trabajo de titulación previo a la
obtención del título (o grado académico) de Médico Veterinario Zootecnista
presentado por la señorita Hillary Samanta Buñay Enriquez
Con el título: “Evaluación de los niveles de Amiloide sérico A frente al
fibrinógeno como biomarcadores de inflamación en equinos”.
Emite el siguiente veredicto: (aprobado/reprobada)………………………………
Fecha:…………………………
Para constancia de lo actuado firman:
Nombre y Apellido Calificación Firma
Presidente ……………………….. ……………. ………………………
Vocal 1 ……………………….. ……………. ………………………
Vocal 2 ……………………….. ……………. ………………………
VI
DEDICATORIA
Esta tesis, al igual que todos mis logros, son
dedicados para mi hermana Jessica Paola Buñay
Enriquez.
A toda mi familia por ser mi apoyo y mi pilar
fundamental, por estar conmigo a través de esta
maravillosa etapa y ayudarme a cumplir mi sueño.
VII
RECONOCIMIENTO
Agradezco el apoyo y orientación brindado por mi tutora Dra. Martha Naranjo y
la colaboración de la Dra. Nadia López, Ingeniero Lenin Ron y Dra. Pamela
Martínez. Gracias por su tiempo e interés en mi tema, esta tesis no sería posible
sin su ayuda.
Un agradecimiento especial a los Doctores e Internos de Chino Valley Equine
Hospital por permitirme realizar mi tesis en este reconocido establecimiento y
compartir sus conocimientos conmigo.
A la Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia, su cuerpo docente, y
administrativo por acogerme durante 5 años y permitirme cumplir mi sueño con
excelencia académica.
VIII
ÍNDICE GENERAL
Pág.
LISTA DE CUADROS ..................................................................................................ix
LISTA DE FIGURAS .................................................................................................... x
RESUMEN: .................................................................................................................. 1
ABSTRACT: ................................................................................................................. 2
CAPÍTULO I ................................................................................................................. 3
INTRODUCCIÓN .......................................................................................................... 3
CAPÍTULO I I ............................................................................................................... 6
OBJETIVOS ................................................................................................................. 6
2.1 General: .......................................................................................................... 6
2.2 Específico: ...................................................................................................... 6
CAPÍTULO III ............................................................................................................... 7
MARCO TEÓRICO ....................................................................................................... 7
3.1. Fundamentación Teórica ............................................................................. 7
3.2 Revisión Bibliográfica ............................................................................... 9
CAPÍTULO IV ............................................................................................................. 15
MATERIALES Y METODOLOGIA ............................................................................. 15
CAPÍTULO V .............................................................................................................. 23
RESULTADOS Y DISCUSIÓN ................................................................................... 23
CAPÍTULO VI ............................................................................................................. 32
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES .............................................................. 32
CAPÌTULO VII ............................................................................................................ 34
BIBLIOGRAFÍA .......................................................................................................... 34
Anexo # 1. Carta de Referencia para la interpretación del resultado del SAA. ......... 40
Anexo # 2. Modelo de Hoja de admisión al Chino Valley Equine Hospital. ................. 41
Anexo # 3. Base de datos de Chino Valley Equine Hospital recopilada de los casos
clinicos presentados en el periodo de Febrero a Octubre del 2017. .......................... ..42
Anexo # 4. Media aritmetica del valor del fibrinogeno y el SAA, en base al sistema
involucrado y el tipo de enfemerdad……………………………………………………......45
Anexo # 5. Cuadro Comparativo de la Media aritmetica del valor del fibrinogeno y el
SAA, en base al sistema involucrado y el tipo de enfemerdad……………………….....46
IX
LISTA DE CUADROS
Cuadros pág.
Cuadro 1. Clasificación de las proteínas de fase aguda, concentración normal en el plasma, valores que alcanza en inflamación y el tiempo de respuesta en horas (basado en (Jacobsen & Anderson, 2007))……………………………………………………………8
Cuadro 2. Clasificación de las variables en estudio………………………….………..…15
Cuadro 3. Materiales y método utilizado en la medición de fibrinógeno.....................18
Cuadro 4. Materiales y método utilizado en la realización de la prueba del amiloide
sérico A…………………………………………………………………………………….…..20
Cuadro 5. Formato de la estructura de la base de datos……………………………..…21
Cuadro 6. Resultados Índice Kappa entre amiloide sérico A y el fibrinógeno……….26
Cuadro 7. Resultados prueba ANOVA entre amiloide sérico A y el tipo de
enfermedad………………………………………………………………………………...….27
Cuadro 8. Medias de SAA con relación a la enfermedad y resultado prueba de
Duncan……………………………………………………………………………..………….28
Cuadro 9. Tabla cruzada de la relación entre el fibrinógeno y la edad del animal…...31
Cuadro 10. Tabla cruzada de la relación entre el fibrinógeno y el sexo del animal…..31
X
LISTA DE FIGURAS
FIGURA Pág.
Figura 1. Componentes del kit para medición del Amiloide Sérico A………….……….20
Figura 2. Porcentaje de enfermedades reportadas en la base de datos………….…..24
Figura 3. Porcentaje de enfermedades de acuerdo al sistema involucrado………….25
Figura 4. Comparación entre la media aritmética del SAA y el fibrinógeno frente al tipo
de enfermedad………………………………………………………………………………..29
1
UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA Y ZOOTECNIA
Evaluación de los niveles de Amiloide sérico A frente al fibrinógeno como
biomarcadores de inflamación en equinos.
Autora: Hillary Buñay
Tutora: Martha Naranjo
Fecha: 05 de diciembre de 2017
RESUMEN:
Como resultado a la respuesta de fase aguda durante el proceso de la
inflamación, las citocinas, específicamente la Interleucina 6, producen las
proteínas de fase aguda (PFA). El fibrinógeno fue considerado por mucho tiempo
el mejor biomarcador de inflamación dentro de este grupo de PFA, sin embargo
la proteína denominada Amiloide Sérico A (SAA), ha demostrado ser un
marcador de inflamación muy sensible en mamíferos, y es considerada como la
proteína de fase aguda mayor más importante en equinos. El objetivo de este
estudio fue evaluar los niveles de amiloide sérico A frente a fibrinógeno como
biomarcadores de inflamación en equinos. Se utilizó una base de datos de 69
individuos que se presentaron a Chino Valley Equine Hospital en el periodo
comprendido entre febrero y octubre del 2017. Las patologías se clasificaron por
sistemas y el tipo de enfermedad, se llevó un registro del valor del SAA y el
fibrinógeno de cada uno. Para el análisis estadístico se utilizó el programa IBM
SPSS 24, con pruebas de chi2, índice kappa, correlación de Pearson, ANOVA y
test de Duncan. Los resultados obtenidos demostraron que la única relación
significativa, existe entre los valores del fibrinógeno con la edad y sexo del
animal, y el SAA con el tipo de enfermedad. No existe correlación entre los
biomarcadores comparados. El valor del SAA depende del tipo de enfermedad
que presenta el animal, mostrando un valor más elevado en patologías
infecciosas (media=1050 μg/ml.), seguida de obstructivas (media=843 μg/ml.) y
traumáticas (media=450 μg/ml.).
Palabras claves: Proteínas de fase aguda, Biomarcadores de inflamación.
2
ABSTRACT:
As a result of the acute phase response, cytokines, specifically Interleukin 6,
produce acute phase proteins (APP). Fibrinogen was considered for a long time
the best biomarker of inflammation within this group of APP., However, the
protein called serum amyloid A (SAA), has shown to be a very sensitive marker
of inflammation in mammals, and it’s considered as the most important major
APP in horses. The aim of this study was to evaluate the levels of serum amyloid
A and fibrinogen as biomarkers of inflammation in equines. A database of 69
individuals from Chino Valley Equine Hospital was used in this study. The
database corresponded to the period between February and October 2017.The
pathologies were classified by systems, and type of disease. The levels of SAA
and fibrinogen were recorded. For the statistical analysis, the IBM SPSS 24
program was used to apply chi2, kappa index, Pearson correlation, ANOVA and
Duncan tests. The results showed that the only significant relation exists between
the levels of fibrinogen with age and sex, and SAA with type of disease. There
was no correlation between the compared biomarkers. And the levels of SAA
depends on the type of disease, with a high level in infectious pathologies
(mean=1050 μg/ml.); followed by obstructive (mean= 843 μg/ml.); and traumatic
disease (mean=450 μg/ml.).
Key words: Acuate phase proteins, biomarkers of inflammation.
I CERTIFY that the above and foregoing is a true and correct translation of the
original document in Spanish.
MSc. Pamela Martinez
ID: 1716294002
3
CAPÍTULO I
INTRODUCCIÓN
El sistema inmunológico de los equinos, al igual que el de otros mamíferos,
se ve afectado por muchos agentes externos que pueden provocar la
activación de la cascada de inflamación una vez que ingresan en el
organismo. Como consecuencia, el sistema inmune emplea lo que se
conoce como respuesta de fase aguda (Jacobsen & Anderson, 2007). Esta
es una respuesta inflamatoria compleja y no específica, que se activa por
la presencia de cualquier tipo de daño tisular, estimulando a los monocitos
y macrófagos para la producción de mediadores de inflamación, conocidos
como citocinas pro inflamatorias, como la interleucina 1, factor de necrosis
tumoral y la interleucina 6; esta última es responsable del aumento en la
producción de proteínas de fase aguda (Reed & Bayly, 2004). Dentro de
este grupo se encuentra la haptoglobina, proteína C reactiva, amiloide A
sérico, ceruloplasmina, alfa1-glicoproteína ácida y el fibrinógeno (Martínez-
Subiela, Tecles, & Parra, 2001).
Tanto el fibrinógeno como el amiloide sérico A (SAA) son consideradas
proteínas de fase aguda positivas, producidas por los hepatocitos. Son
responsables del aumento del flujo sanguíneo, permeabilidad vascular,
migración de los leucocitos al tejido afectado y la activación de los mismos
en casos de daños tisular, infecciones, etcétera. Debido a que la respuesta
leucocitaria en equinos es muy poco sensible (Hooijberg, Hoven, & Tachy,
2014), la cuantificación de la concentración sérica o plasmática de estas
proteínas de fase aguda en los equinos, proporciona información muy
importante sobre el estado inmunológico del animal para el diagnóstico y
pronóstico de la enfermedad, así como el monitoreo de la efectividad del
tratamiento (Martínez-Subiela, Tecles, & Parra, 2001).
4
El estudio realizado por Pepys et al. (1989), demuestra que el amiloide
sérico A en los equinos es una proteína extremadamente sensible al daño
tisular, infecciones e inflamaciones en general. Mientras que el fibrinógeno
plasmático (marcador utilizado actualmente en el Ecuador) es un medidor
inespecífico de procesos inflamatorios (Y. Tamzali, 2001), de aquí surge la
necesidad de encontrar un medidor mucho más eficiente y práctico que
sirva de apoyo tanto para el médico veterinario de campo, como para el
internista y el amiloide sérico A surge como opción.
A pesar de que ambos miden inflamación, la diferencia radica en que el
amiloide sérico A es mucho más sensible y sus concentraciones séricas
varían de manera más rápida de acuerdo a los cambios sistémicos, en
comparación con el fibrinógeno (Larson, 2014) . El amiloide sérico A es
considerado una proteína de fase aguda positiva porque aumenta hasta en
1000 veces su concentración en caso de inflamación, y mayor debido a que
se encuentra en muy baja concentración en animales sanos (Jacobsen &
Anderson, 2007). Puede aumentar hasta más de 20000 ng/ml en respuesta
a la presencia de inflamación aguda, alcanzando su máxima concentración
entre 6 y 12 horas y su vida media es de 30 a 120 minutos. El fibrinógeno,
en cambio, alcanza su pico a las 48 horas después de la inflamación y
aumenta su valor en uno o dos grados más de su rango normal (Nolen-
Walston, 2015).
En los equinos existen muchas patologías en las que los signos de
inflamación son internos o no se manifiestan (subclínicos) y el grado de
daño tisular solo puede ser medido mediante la concentración de proteínas
pro inflamatorias en el torrente sanguíneo. El amiloide sérico A representa
una herramienta muy útil para el diagnóstico ya que nos ayuda a detectar
infecciones virales y bacterianas de manera precoz, diferenciar si una colitis
es infecciosa o no, si el cólico tiene origen infeccioso que no requiere
cirugía, si una artritis es séptica o no, el estado de los potros neonatos, etc.
Es muy útil en caballos de carreras como lo indica un estudio publicado en
el Equine Veterinary Journal, el cual demostró que los caballos que no
terminaron la carrera tenía un valor de SAA elevado por infecciones
5
subclínicas o heridas menores (Cywinska, 2010). Además nos da una idea
más clara del pronóstico, disminuye los costos porque permite hacer un
seguimiento al tratamiento aplicado, para saber si este es el adecuado.
Permite al profesional veterinario reducir el tiempo de utilización del
tratamiento, una vez que la inflamación ha cedido, reduciendo así el tiempo
de uso de fármacos y la utilización de varios medicamentos, para identificar
el que funciona mejor. También contribuye a evitar la resistencia bacteriana
o los efectos secundarios de ciertos fármacos.
En el presente trabajo se analizó 69 casos clínicos que se atendieron en
Chino Valley Equine Hospital durante el periodo comprendido entre Febrero
del 2017, hasta Octubre del mismo año. Los caballos presentaron
diferentes patologías que fueron divididas en categorías de acuerdo al
sistema involucrado: sistema respiratorio, digestivo, circulatorio y músculo
esquelético. Se elaboró una tabla con datos referentes a la edad, sexo,
raza, diagnóstico, valor del fibrinógeno y SAA. Todas las pruebas fueron
realizadas en el hospital por el mismo método, pero diferentes operadores.
6
CAPÍTULO II
OBJETIVOS
2.1 General:
Evaluar los niveles de amiloide sérico A frente a fibrinógeno como
biomarcadores de inflamación en equinos.
2.2 Específico:
Relacionar los valores de amiloide sérico A y el fibrinógeno frente al
grado de inflamación del sistema afectado.
Establecer la relación entre el valor de cada biomarcador evaluados
respecto a la edad, sexo y raza.
7
CAPÍTULO III
MARCO TEÓRICO
3.1. Fundamentación Teórica
Dentro de la patología inflamatoria la respuesta de fase aguda (RFA) es un
proceso dinámico en el que se dan cambios complejos, locales y sistémicos
en el organismo con el fin de dar una respuesta temprana pero no
específica al ataque de patógenos y poder recuperar la homeostasis. Esta
se inicia con la producción de citocinas, que son glicoproteínas generadas
por los tejidos en la región de la lesión y células del sistema inmune
(Petersen, Nielsen, & Helweg, 2004). Una de las citocinas más importantes
es la interleucina 6; esta glicoproteína segregada por los macrófagos,
eosinófilos, células de la glia, entre otros, es un mediador que activa los
hepatocitos para la producción de proteínas de fase aguda o pro
inflamatorias cuando existen traumas, infecciones, cirugías, quemaduras,
neoplasias, etc (Oliveira, 2011).
Las proteínas de fase aguda son aquellas que cambian su concentración
sanguínea en un 25% durante la RFA, a este grupo pertenecen la
haptoglobina, albúmina, proteína C reactiva, amiloide A sérico,
ceruloplasmina, alfa1-glicoproteína ácida y el fibrinógeno (Martínez-
Subiela, Tecles, & Parra, 2001). Se clasifican de dos maneras (véase
Cuadro 1); la primera de acuerdo a si se eleva o disminuye durante la
inflamación, en positivas o negativas y dentro de las positivas se dividen
según la magnitud del aumento en su concentración, en mayores o
menores. Mayores son aquellas que aumentan hasta en 1000 su valor,
mientras que las menores aumentan entre 1 y 10 veces más su valor, cabe
recalcar que hasta la presente fecha SAA es la única proteína mayor
identificada en caballos (Jacobsen & Anderson, 2007)
8
Cuadro 1. Clasificación de las proteínas de fase aguda, concentración normal en el plasma, valores que alcanza en inflamación y el tiempo de respuesta en horas (basado en (Jacobsen & Anderson, 2007)).
Proteína Clasificación Concentración
normal en plasma
Valor en
inflamación
Tiempo de
respuesta (horas)
Tiempo de
elevación/
disminución
Pico
Haptoglobina
(mg/l)
Positiva/ Menor 200-1000 400-2700 12-24 72-
120
Proteína C
reactiva (mg/l)
Positiva/ Menor 7.5 10-35 24 72-
120
Amiloide sérico A
(mg/l)
Positiva/ Mayor 0.5-120 50-800 6-12 48
Ceruloplasmina
(mg/l)
Positiva/ Menor 300-400 700-900 120 168-
336
alfa1-
glicoproteína
ácida (mg/l)
Positiva/ Menor
70-90 100-250 24 72
Fibrinógeno
(mg/l)
Positiva/ Menor 2000-4000 3000-11000 24 72-
144
Albúmina (g/l) Negativa 30 27.5 144 192-
240
Nota Fuente: Jacobsen, S. (2007). The acute phase protein serum amyloid A (SAA) as a marker of
inflammation in horses. Equine Veterinary Education, 19, 38-46.
9
3.2 Revisión Bibliográfica
3.2.1 Fibrinógeno
Es una glicoproteína de fase aguda menor o moderada porque aumenta
entre 2 o 3 veces su valor normal en casos de inflamación, por mucho
tiempo fue la proteína más estudiada y es el medidor de inflamación que se
utiliza en la actualidad en el Ecuador al igual que en Norteamérica para el
diagnóstico de enfermedades en equinos debido a su bajo costo, y sus
rápidos resultados (Daniel, y otros, 20015) (Martínez-Subiela, Tecles, &
Parra, 2001). Los principales usos clínicos que se le atribuyen son los
siguientes:
Diagnóstico de inflamación, porque al ser una proteína de fase
aguda aumenta su concentración, pero entre las 24 y 72 horas
después del estímulo inflamatorio y tarda dos semanas en regresar
a su valor normal una vez que ha cedido la inflamación.
Indica la presencia de inflamación antes de que cambie el conteo de
glóbulos blancos, o incluso cuando este se mantiene normal.
Monitoreo del desarrollo del proceso inflamatorio y la respuesta a la
terapia instaurada (DeJong, 2012).
Dentro de las desventajas del fibrinógeno tenemos que se mantiene en
concentraciones elevadas en condiciones normales, su rango de valor
normal es muy amplio, su actuación en la cascada de coagulación hace
difícil interpretar los cambios en los valores del mismo, existen factores que
pueden provocar el enmascaramiento de sus cambios durante la
inflamación como por ejemplo la coagulación intravascular diseminada o
patologías en las que el consumo de fibrinógeno supera su formación
(Pollock, 2005) (Martínez-Subiela, Tecles, & Parra, 2001) (Jacobsen &
Anderson, 2007).
10
3.2.2 Amiloide sérico A
El SAA es una apolipoproteina que pesa entre 9 y 14 kilodaltons y es
considerada la proteína más reactiva en vertebrados, aunque se sintetiza
principalmente en el hígado también se ha reportado su presencia en
tejidos extra hepáticos como la glándula mamaria, articulaciones y el líquido
sinovial (Uhlar, 1999). Dentro de las funciones que cumple en el organismo
se encuentran: efecto inhibitorio en la fiebre, efecto quimiotáctico en
leucocitos y polimorfonucleares, promueve la síntesis de mediadores de
inflamación, inmunomodulación, interviene en la fagocitosis, inhibe la
activación plaquetaria e induce la formación de enzimas relacionadas con
la degradación de la matriz extracelular (Petersen, Nielsen, & Helweg,
2004) (Eklund & Niemi, 2012) (Jacobsen & Anderson, 2007).
El uso del amiloide sérico A en el campo de la medicina veterinaria ha ido
aumentando con los años, porque si bien no proporciona un diagnóstico
definitivo, si es una medición muy objetiva de la extensión de las lesiones,
propagación de enfermedades, detección de enfermedades tanto clínicas
como subclínicas, evaluación de la magnitud y duración de la respuesta
aguda de acuerdo a la severidad de la patología, no disminuye hasta que
no cese la inflamación, su valor se mantiene elevado en infecciones
secundarias o en recaídas y es muy útil en el diagnóstico temprano de
enfermedades (Petersen, Nielsen, & Helweg, 2004). Por todas estas
cualidades se ha convertido el método de diagnóstico en tiempo real más
sensible de todos los marcadores de inflamación conocidos hasta la
actualidad (Sander, 2016). Se ha confirmado su eficacia para medir
inflamación en equinos en casos de: neumonía, artritis séptica, abscesos,
gurma equina, infecciones bacterianas y virales, alergia, cirugía,
traumatismos, heridas en el sistema músculo esquelético, neoplasias,
cólico, evaluación del rendimiento de caballos de carreras, estado
inmunológico de neonatos, entre otros (Leclere, Lavoie-Lamoureux, &
Lavoie, 2015) (Jacobsen & Anderson, 2007).
11
3.2.3 Fibrinógeno vs. Amiloide sérico A
En relación al fibrinógeno vs amiloide sérico, diversos estudios realizados
demuestran que el amiloide sérico A es mucho más eficiente que el
fibrinógeno para medir inflamación, a continuación se citan algunos:
Los artículos publicados en JAVA el primero de Julio de 2013, en
base al estudio realizado en 212 caballos, obtuvieron los siguientes
resultados:
o Aumento de 75 veces la media en casos de caballos
clínicamente anormales.
o Valores menores a 10 mg/ml en animales sanos.
o Valores mayores a 1000mg/L en caballos con enfermedades
infecciosas.
Concluyendo así que el SAA tiene la mayor precisión diagnóstica para la
detección de inflamación, es el indicador más confiable del retorno de un
paciente a la salud. Además que los aumentos en su valor son detectables
dentro de las 24 horas de la estimulación y, por su corta vida media, se
producen rápidamente disminuciones significativas con una respuesta
positiva al tratamiento.
Los resultados anteriormente citados representan casos comúnmente
vistos en la práctica equina, y por eso se debe considerar al amiloide como
una prueba complementaria para el análisis de sangre de rutina en esta
especie (Miami, 2014).
Así también, el doctor Michael De Cozar en el simposio de medicina
equina en el 2017, demostró que el amiloide sérico A es más precoz
que el fibrinógeno en la medición de inflamación en caballos con
complicaciones post cirugía de cólico, después de analizar 275
equinos cuyo valor del SAA aumento de manera significativa en los
días 2, 3,4 y 5 post intervención quirúrgica. (Larson, 2017)
El estudio realizo por Hulten Y Demmers en 25 potros con
enfermedades infecciosas arrojó los siguientes resultados: el SAA
es un biomarcador más específico y precoz que el fibrinógeno en la
12
medición de enfermedades infecciosas en potros, sirve para
diferencia enfermedades infecciosas de las no infecciosas, y brinda
información muy valiosa para el diagnóstico de neumonía por
Rhodococcus equi debido a que aumenta su valor más rápido que
los bimarcadores actualmente utilizados. (Hulten & Demmers,
2002).
3.2.4 Relación entre los biomarcadores y los sistemas
3.2.4.1 Sistema gastrointestinal
En el año 2005 Vandenplas Michel, publicó un estudio en el que se
demostró que los caballos que no sobrevivieron a enfermedades que
afectan el sistema gastrointestinal presentaron un valor de SAA mucho
mayor al de aquellos que si sobrevivieron. También se comprobó que los
equinos que presentaban enteritis y colitis con inflamación crónica tenían
un nivel de amiloide sérico A significativamente mayor a aquellos que
presentaban otras condiciones no inflamatorias, diferencia cólicos por
causas infecciosas versus obstructivas y que los caballos que presentan
cólico tienen un valor medio de SAA de 249.3 μg/mL en suero y 97.0 μg/mL
en fluido peritoneal (Nolen-Walston, 2015). En el 2015 Daniel y sus
colaboradores concluyeron que el amiloide sérico A es un medidor de
inflamación mucho más sensible que el fibrinógeno en casos de celiotomía
exploratoria en cólico equino, tanto en el período pre como post operatorio,
ayuda a determinar el riesgo de complicaciones si se hacen mediciones
continuas, y determinar la presencia del síndrome de respuesta inflamatoria
sistémica. Esto se correlaciona con la conclusión del estudio de Westerman
en el que se comprobó que los caballos que tenían valores de SAA elevado
tenían más probabilidad de necesitar tratamiento quirúrgico antes que
médico; sin embargo se identificó que no es útil para diferenciar lesiones
estrangulantes de aquellas que no lo son (Daniel, y otros, 20015)
(Westerman, Foster, Tornquist, & Poulsen, 2016).
13
3.2.4.2 Sistema respiratorio
En el sistema respiratorio se ha reportado que el SAA es un buen indicador
de inflamación en casos de Rhodococcus equi, influenza equina, herpes
virus equino, neumonía, neumonía bacteriana, enfermedades de vías
respiratorias inferiores y Streptococcus equi, presentando una significancia
estadística entre el valor del mismo y la severidad de los signos clínicos y
demostrando ser más sensible que los métodos tradicionales como cultivos
e hisopados nasales (Kusano, Hobo, Ode, & Ishikawa, 2008) (Petersen,
Nielsen, & Helweg, 2004) (Hobo, Niwa, & Anzai, 2007) (Jacobsen &
Anderson, 2007). En casos de obstrucción recurrente de las vías aéreas es
válido para medir inflamación aguda y aunque no es específico para
diferenciar enfermedades virales de bacterianas; ayuda a un diagnostico
precoz de las mismas y la diferenciación de patologías infecciosas de las
no infecciosas, debido a que aumenta en casos de enfermedades
respiratoria de etiología infecciosa mas no lo hace en causas no infecciosas
como alergias. Es mucho más eficaz para medir inflamación sistémica
antes que local, pero no es efectivo para detectar enfermedad inflamatoria
crónica de vías aéreas (Viner, Mazan, Benedice, & Mapes, 2017) (Leclere,
Lavoie-Lamoureux, & Lavoie, 2015) (Satué, Calvo, & Gardón, 2013) (Nolen-
Walston, 2015).
3.2.4.3 Sistema músculo esquelético
Con relación al sistema músculo esquelético el SAA sirve para poder
identificar infecciones como abscesos locales y generales, y en el caso de
abscesos umbilicales se ha reportado que disminuye su concentración. En
artritis séptica no solo aumenta su valor en el suero sino también en el
líquido sinovial mientras que en osteoartritis, osteocondritis y sinovitis su
valor se mantiene bajo; en artrodesis e inyecciones intraarticulares
repetidas se mantiene debajo de los límites, lo que permite diferenciar una
inflamación por infección versus un traumatismo local. En casos como
fracturas óseas el valor se mantiene en el rango normal (Turło, y otros,
2015) (Dahlgren, Settlage, & Byron, 2016) (Jacobsen & Anderson, 2007) .
14
3.2.4.4 Enfermedades sistémicas y del aparato circulatorio
Los estudios realizados han demostrado que la concentración del amiloide
sérico A en sangre aumenta en casos de enfermedades sistémicas como
la gurma equina, anaplasmosis, piemia, influenza, neumonía, celulitis,
laminitis producida por enfermedades metabólicas y sepsis en potros, pero
no aumenta en casos de alergia, abscesos localizados e insuficiencia
cardiaca (Hooijberg, Hoven, & Tachy, 2014) (Cassano, 2017) (Hobo, Niwa,
& Anzai, 2007). En enfermedades parasitarias se ha detectado una
disminución del valor del SAA pero no es significativo. En humanos se ha
determinado que en enfermedades autoinmunes como la artritis
reumatoide el amiloide sérico A aumenta pero en equinos no existen
publicaciones que sustenten esta información (Shen, Sun, & Liu, 2015).
15
CAPÍTULO IV
MATERIALES Y METODOLOGIA
4.1 Factores en estudio
Cuadro 2. Clasificación de las variables en estudio.
CARACTERIZACIÓN DE VARIABLES
VARIABLE INDEPENDIENTE
Grado de inflamación
Niveles Categoría Concepto
Enfermedades
1= traumática
La Real Academia Española define
trauma como una lesión producida por
agentes mecánicos, por lo general
externos (RAE, 2017). En esta
categoría se encuentran
inflamaciones producidas por
traumatismos accidentales e
intencionales como fracturas,
manipulación quirúrgica,
laceraciones, flebitis por
cateterización, etc.
2= infecciosa
Por la presencia de fiebre y/o
confirmación por cultivo, PCR,
hisopado nasal u otro método
diagnóstico que confirme la presencia
de virus, bacterias, hongos o
protozoarios. Por ejemplo neumonía
por herpes virus.
16
3= obstructiva Inflamaciones producidas por oclusión
total o parcial del lumen
gastrointestinal. Por ejemplo
impactaciones por alimento, vólvulos
intestinales, etc.
Sistema
involucrado
1= respiratorio
Presenta signos clínicos como tos,
secreción nasal u hallazgos
ultrasonográficos como colas de
cometa o radiográficos como patrones
bronquiales, alveolares, etc
2= digestivo
Presenta signos clínicos como
diarrea, disminución o aumento de los
sonidos intestinales a la auscultación
o asas de intestino dilatado en
ultrasonografía.
3= circulatorio
o sistémico
Presenta inflamación de algún vaso
sanguíneo, infecciones purulentas o
enfermedades que causen
bacteriemia o viremia.
4= músculo
esquelético
Infecciones, inflamaciones o
traumatismos que afectan músculos o
el sistema óseo.
VARIABLES DEPENDIENTES
Biomarcadores
Fibrinógeno 1= normal 150 a 375 mg/dl
2= elevado Mayor a 376 mg/dl
Amiloide
sérico A
(Véase Anexo
#1)
1= ausente De 0 a 15 μg/ml.
2= leve De 16 a 50 μg/ml.
3= moderado De 51 a 200 μg/ml.
4= alto 201 a más de 3000.
17
VARIABLES MODERADORAS
Sexo 1= Macho
2= Hembra
Raza 1= pesadas o
sangre fría
Caballos de tiro.
Peso: sobre 600 kg
Alzada: mayor a 1.60 m de alzada
2= ligeras o
sangre
caliente
Caballos de silla.
Alzada: ente 1.50 - 1.65 m
Peso: promedio 450-550 kg.
3= sangre tibia
o Warmblood
Alzada: 1.52m
Peso: 600kg
4= poni Alzada: menor a 1.45m.
Edad 1= potros <2 año
2= Adultos 2 años 1 mes - 20 años
3= Geriátricos >20 años
4.2 Tratamientos
El presente estudio es una investigación de tipo retrospectiva descriptiva
que tuvo como objetivo confrontar el SAA frente al fibrinógeno como
biomarcadores de inflamación en equinos, teniendo como variable
independiente el grado de inflamación, dependientes los valores del
fibrinógeno y amiloide sérico A y moderadoras sexo, raza y edad. Los datos
fueron recopilados en el periodo de febrero a octubre del 2017 en Chino
Valley Equine Hospital ubicado en California Estados Unidos.
Los métodos utilizados para la determinación de los biomarcadores fueron
los siguientes:
18
4.2.1 Medición de fibrinógeno:
El método utilizado fue el de precipitación por calor. Se realizó una
venopunción en la yugular, vena facial o en el catéter con una aguja calibre
20 y una jeringuilla de 5ml. La muestra de sangre obtenida se almacenó en
tubos tapa verde con heparina o tubos tapa lila con EDTA, y se procesaron
dentro de los 10 minutos luego de su obtención. Se llenaron dos tubos de
microhematocrito los cuales se centrifugaron por 3 minutos a 3400 RPM,
uno de los tubos se rompe justo en la interfase del plasma con los glóbulos
rojos, se coloca el plasma en el refractómetro y se miden las proteínas
totales. El otro tubo se sumerge en un recipiente con agua entre 56 y 58°
centígrados por 3 minutos, luego de este tiempo se vuelve a centrifugar por
tres minutos y se mide con el refractómetro el valor de las proteínas. La
diferencia entre el primer valor de proteínas obtenido con el tubo solo
centrifugado versus el segundo valor obtenido con el tubo calentado y
centrifugado, se multiplica por 1000 y es el valor del fibrinógeno. Este no
puede ser menor a 100, su unidad de medida es mg/dl y el rango normal
en equinos va de 150 a 375 en adultos y de 140 a 660 en potros de hasta
un mes de nacidos (Cerón, 2015) (Eclinpath, 2013) (Southwood, 2013).
Cuadro 3. Materiales y método utilizado en la medición de fibrinógeno.
Materiales Método
Aguja calibre 20 Veno punción
Jeringa 5 ml
Tubo tapa verde (Heparina ) Almacenamiento de la muestra
Tubo tapa lila (EDTA)
Centrifuga Obtención de suero
Tubos capilares
Refractómetro Medición de proteínas totales y
fibrinógeno
Termómetro y agua de 56 a 58 oC Calentamiento para precipitar
fibrinógeno.
19
4.2.2 Medición de Amiloide sérico A:
La prueba es un inmunoensayo de flujo lateral (StableLab equine blood
analysis kit), validado por la empresa manufacturera con una precisión del
98.6% y exactitud del 95,6% (Viner, Mazan, Benedice, & Mapes, 2017).
Funciona con una tira de nitrocelulosa con diversas zonas; una donde se
aplica la muestra con el diluyente, la segunda zona del conjugado hasta
donde se transporta la muestra y reacciona con el antígeno del SAA, esta
nueva mezcla se dirige hasta la tercera zona de reacción, donde hay más
bandas con anticuerpos que capturan a la mezcla y mediante coloración se
observa la línea control y la línea de positivo. La reacción se considera
positiva si existen las dos líneas coloreadas (Dahlgren, Settlage, & Byron,
2016). La muestra se obtuvo de una veno punción en la vena yugular, facial
o en el catéter, se obtuvieron 5ml en un tubo tapa lila, verde o rojo y se
utilizó sangre entera o suero obtenido por proceso de centrifugación. La
muestra fue procesada dentro de los 10 minutos posteriores a su obtención
y se utiliza el kit de StableLab siguiendo las instrucciones del fabricante.
Cualquier valor superior a 15 es indicador de inflamación, el lector marca
valores hasta más de 3000 máximo y la unidad de medida es en μg/ml.
Es un método cuantitativo porque el lector muestra un valor en números,
pero también es semicuantitativo porque nos da un resultado colorimétrico
que se interpreta utilizando la tabla de referencia del kit (véase Anexo #1).
20
Cuadro 4. Materiales y método utilizado en la realización de la prueba del
amiloide sérico A
Figura 1. Componentes del kit para medición del Amiloide Sérico A
Pipetas desechables Lector STABLELAB Reactivo
4.3 Características de las unidades experimentales
Los datos fueron recopilados de 69 equinos que se presentaron al hospital
Chino Valley Equine Hospital con signos clínicos de inflamación, en un
periodo de 9 meses, desde febrero hasta octubre del 2017. La base de
datos consta de machos y hembras, en un rango de edad entre 10 días de
nacido a 33 años, y 16 diferentes razas que fueron agrupadas en cuatro
categorías según su temperamento y características físicas. Los criterios
de inclusión fueron caballos que presenten signos clínicos de inflamación
Materiales Método
Aguja calibre 20 Veno punción
Jeringa 5 ml
Tubo tapa verde (Heparina ) Almacenamiento de la muestra
Tubo tapa lila (EDTA)
Tubo tapa roja
Centrifuga Obtención de suero
21
como calor, rubor, tumor o dolor, mediante el examen físico u otros métodos
diagnósticos, o que entre sus diagnósticos diferenciales se encuentre una
enfermedad que curse con inflamación, que se les haya medido el valor del
fibrinógeno y Amiloide sérico A, el mismo día. Se excluyó los equinos sin
un diagnóstico definitivo.
Las patologías fueron divididas en dos categorías; la primera dependiendo
del tipo de enfermedad en traumáticas, infecciosas y obstructivas. La
segunda categoría en base al sistema afectado: respiratorio, digestivo,
sistémico o circulatorio y músculo esquelético. Los valores medios de los
biomarcadores en cada categoría se muestras en el Anexo 4 y 5. El criterio
de inclusión de ambas categorías se basa en el diagnóstico definitivo
realizado por los médicos del hospital, que está contemplado en la hoja de
admisión de cada uno y por el cual se trató al animal (véase Anexo #2).
En el Cuadro 5 se adjunta el formato de la base de datos y en el Anexo #3
está toda la base de datos que comprende los 69 casos clínicos, la edad
en meses, sexo, raza, diagnóstico, fecha y valor del SAA y fibrinógeno.
Cuadro 5. Formato de la estructura de la base de datos.
No Nombre paciente Edad (meses) sexo raza Diagnostico fecha valor fibrinogenovalor SAA
1 Rikki 60 Hembra cuarto de milla Gurma equina 2/6/2017 600 2128
2 Stunning beauty 0,7 hembra pura sangre inglesgurma equina 7/6/2017 100 0
3 Carrapax 84 Macho Warm blood neumonia 15/6/2017 500 2313
4 Cooper 96 macho tiro/ pura sangre neumonia 2/5/2017 200 2066
5 Hidden Crook 36 Macho Pura sangre inglesneumonia y pleuroneumonia 7/4/2017 1000 2684
22
4.4 Análisis estadístico
El análisis estadístico se realizó mediante tablas de frecuencia basadas en
porcentajes de presentación encontrados durante el tiempo de estudio y
fueron procesadas por medio del método estadístico Anova y “chi-
cuadrado”, con un nivel de significancia del 0.05, utilizando el programa
estadístico “IBM SPSS Statistics 24”, con el fin de establecer la relación
entre las variables independientes y dependientes (véase Cuadro 2).
También se utilizó el índice kappa y la correlación de Pearson para
comparar los valores de fibrinógeno vs. SAA, la prueba de ANOVA y
Duncan para comprobar si existe dependencia entre las variables (véase
Cuadro 8 y 9). Se realizó un análisis descriptivo utilizando tablas y gráficos
de frecuencia con los resultados obtenidos.
23
CAPÍTULO V
RESULTADOS Y DISCUSIÓN
De los 69 equinos reportados en el estudio( Anexo # 3), 50 son machos y
19 hembras, el 5,7 % pertenece a razas pesadas dentro de las cuales se
encuentra el Belga y el Clydesdale, el 75% a razas ligeras como el árabe,
cuarto de millas y Pura sangre, el 12% Warmbloods como el Tennessee
Walker y Oldenburg y un 5% ponies. La media de la edad en meses es de
117 meses (9. 7 años) con un mínimo de 0,30 meses y máximo de 396; el
18% son potros, el 72,8% adultos y el 8 % geriátricos.
En la figura 2 se observa la clasificación de enfermedades dentro de las
cuales 12 pertenecen a la categoría traumáticas, que corresponde al
17,4%, en la cual se incluye: fracturas, tromboflebitis por cateterización,
laceraciones, artrodesis y tendinitis; 46 pertenecientes a la categoría de
infecciosas (66,7%) que comprende: gurma equina, neumonía, sinusitis,
colitis, enteritis, Halicephalobus, celulitis, secuestro óseo, artritis séptica,
abscesos e infección en la banda coronaria; 11 pertenecientes a patologías
obstructivas que corresponde al 15,9% como: enterolitos, vólvulos e
impactaciones por alimento y arena.
24
Figura 2. Porcentaje de enfermedades reportadas en la base de datos.
En cuanto al sistema involucrado de acuerdo a la fisiopatología de la
enfermedad y el diagnóstico definitivo de los médicos del hospital se
encontró que: 26 enfermedades afectan al sistema respiratorio, 17 al
digestivo, 4 circulatorio y 22 músculo esquelético, representado en la figura
3.
25
Figura 3. Porcentaje de enfermedades de acuerdo al sistema involucrado.
En un estudio publicado por Kollias-Baker y Bill Johnson en California, se
demostró que las neumonías corresponden al 3% (10 caballos al año) de
las causas de muerte de los caballos pura sangre de carreras y cuarto de
milla. Lo que coincide con el alto número de neumonías presentado en este
estudio, relacionadas con el 75% de los caballos en la base de datos que
corresponden a estas razas. Además California, después de Texas, es uno
de los estados con la mayor población de caballos y estos tienen fines
recreativos, shows y para carreras (Kilby, 2007) (Kollias-Baker & Johnson,
1999).Otro hecho a considerar es que se presentó un brote de klebsiella en
el hospital. Esta bacteria causa neumonía en equinos y una fuente de
contaminación es la ventilación mecánica, que en este caso se utiliza para
la anestesia inhalada en procesos quirúrgicos (Estell, y otros, 2016).
Los casos clínicos que involucran al sistema digestivo están relacionados
con la ubicación geográfica del hospital, por ejemplo cólicos por arena, son
comunes en equinos que se alimentan del piso en zonas arenosas como
26
California, impactación por alimento, especialmente Bermuda que es el
tipo de pasto de esta región. Y enterolitos que tienen la más alta incidencia
en este estado, sin embrago estos casos son quirúrgicos y no dependen
del grado de inflamación para tomar la decisión de cirugía, es por eso que
no se mide el SAA si se observan enterolitos en la radiografía (Meierhenry,
2008).
Debido a que la gran mayoría de equinos presentes en esta zona
geográfica son utilizados para shows y carreras las lesiones como
laceraciones en extremidades, fracturas o tendinitis son comunes. Los
traslados de un lugar a otro para competir o presentarse, implican una
logística que predispone no solo a lesiones en el sistema músculo
esquelético sino también enfermedades respiratorias (Robinson &
Sprayberry, 2009).
Amiloide sérico A frente a Fibrinógeno:
El resultado del índice Kappa entre el SAA y el fibrinógeno es de 0,05 lo
que se interpreta como un valor de acuerdo insignificante. Esto significa
que las pruebas no miden la inflamación de la misma manera, lo que se
complementa con el índice de Pearson que es 0,4, indicando que existe
una correlación baja entre estas dos variables. Lo que quiere decir que no
tienen concordancia al momento de arrojar resultados cuantitativos, sin
embargo no se puede asumir que uno es mejor que otro en base a estos
resultados. (Véase Cuadro 6)
Cuadro 6. Resultados Índice Kappa entre amiloide sérico A y el fibrinógeno.
Valor
Medida de acuerdo Kappa ,050
27
Una de las limitaciones de este estudio es que existe un “sesgo” entre los
datos, debido a que todos los animales presentes tenían una patología que
causa inflamación y no se sabe el tiempo en el que inició el proceso, aparte
tampoco existe un grupo control o valores consecutivos de la fluctuación de
los biomarcadores como para definir cuál es más sensible. Otra de las
razones por las que no se encuentran más relaciones significativas puede
ser que el número de muestras (69) o el tipo de clasificación a la que se
sometió los datos, tal vez no era la adecuada para evaluar a estos dos
biomarcadores.
Biomarcadores y tipo de enfermedad:
El Amiloide Sérico A demostró una significancia mediante la prueba de
ANOVA entre sus valor y el tipo de enfermedad, a diferencia del fibrinógeno
que no demostró relación, a continuación se reportan los resultados:
Cuadro 7. Resultados prueba ANOVA entre amiloide sérico A y el tipo de
enfermedad.
gl Sig.
Entre grupos 2 ,047
Dentro de grupos 66
La prueba de ANOVA reporta que si el nivel de significación (sig.) entre
grupos es menor o igual que 0,05, rechazamos la hipótesis de igualdad de
medias. Lo que quiere decir que existen diferencias según los grupos, en
este caso el valor del SAA varía de acuerdo al tipo de enfermedad. Los
valores más altos se registran en enfermedades de tipo infecciosas con una
media de 1050 µg/ml, seguido de las enfermedades obstructivas con una
media de 843 µg/ml y las traumáticas con un valor de 450 µg/ml. La prueba
de Duncan revela que las medias no son iguales p=0,053. (Véase Cuadro
7 y Figura 4)
28
Cuadro 8. Medias de SAA con relación a la enfermedad y resultado prueba de
Duncan.
Esto se relaciona con el paper publicado por Viner et al. (2017) en el que
se concluye que el amiloide sérico A es un biomarcador más confiable en
la detección de enfermedades infecciosas en el tracto respiratorio,
comparada con aquellas que no lo son. En los neonatos también se
demostró que un valor elevado de este biomarcador es indicador de sepsis
y se pueden descartar causas no infecciosas si el valor es mayor a 100
mg/L. Jacobsen et al. (2006), también reportan que los equinos con
enfermedades infecciosas como artritis, tenovaginitis y otras infecciones en
las articulaciones, tienen un valor de SAA mucho más elevado que aquellos
que padecen patologías articulares no infecciosas. En resumen las
patologías de origen infeccioso ya sea por virus o bacterias pueden tomar
valores de SAA sobre los 2000mg/L, debido a la fuerte reacción de las
células del sistema mononuclear fagocítico, permitiendo así diferenciar la
presencia de una inflamación por infección versus una no infecciosa, y así
aplicar un tratamiento de manera temprana (Satué, Calvo, & Gardón, 2013).
En cuanto a las enfermedades de tipo obstructivas relacionadas con el
sistema digestivo, el valor medio del SAA es menor que si la causa es
infecciosa pero mayor a la categoría traumática, esto se puede deber a la
intensidad de la reacción inflamatoria. El Doctor Heinrich Anholdv reportó
que de 100 casos presentados al hospital el valor del SAA no sigue un
ENFERMEDAD N
Subconjunto
para alfa =
0.05
1
Duncana,b Traumática 11 450
obstructiva 11 843,18
Infecciosa 46 1050,15
Sig. ,053
29
patrón determinado en casos de cólico (obstrucción), unas veces es alto y
otras veces bajo. Lo que si se comprobó es que las inflamaciones locales,
grupo al que pertenecen las traumáticas y obstructivas, tienen un valor más
bajo que las inflamaciones sistémicas (Nolen-Walston, 2015) (Stablelab,
2015).
Se establece que existe una diferencia significativa (p=0,04), entre las
enfermedades traumáticas e infecciosas, con relación al valor del amiloide
sérico A. Relación que no es significativa entre las demás categoría del tipo
de enfermedad. Este resultado concuerda con las pruebas realizadas por
el fabricante, en el que se concluye que el SAA es mucho mejor para medir
inflamación en casos de infecciosas (Stablelab, 2015).
Figura 4. Comparación entre la media aritmética del SAA y el fibrinógeno frente
al tipo de enfermedad.
341439 418450
1050
843
0
200
400
600
800
1000
1200
Traumática Infecciosa Obstructiva
Comparación entre la media de SAA y fibrinógeno
Fibrinógeno SAA
30
Biomarcadores y sistema involucrado:
Ninguno de los dos biomarcadores tiene relación significativa con el
sistema involucrado. Esto se puede deber a que las enfermedades
reportadas dentro de cada sistema son diferentes. Por ejemplo; para el
sistema respiratorio existe gurma, enfermedad infecciosa, pero también
existen neumonías por aspiración, enfermedad traumática, la fisiopatología
de estas enfermedades y la reacción del organismo son diferentes en cada
tipo de enfermedad., el biomarcador mide el grado de inflamación y la
severidad de la respuesta orgánica, sin tomar en cuenta el lugar donde se
origine dicha inflamación.
Biomarcadores vs. sexo, raza y edad:
Mediante la prueba de chi2 se estableció que existe una relación de
dependencia del valor del fibrinógeno con la edad y sexo del animal (p
0,020 y p0,002 respectivamente), (véase Cuadro 9 y 10). La literatura cita
que los potros neonatos tienen 40% menos fibrinógeno plasmático y
alcanza los valores normales entre los 4 a 7 días de nacido y este valor
varía hasta que alcanzan los seis meses, puede exceder el valor normal en
casos de maduración hepática y no necesariamente inflamación por
enfermedades subclínicas. Factor que se debe tomar en cuenta, pues en
caso de inflamación el aumento de la concentración en potros es un 40%
menor al de un adulto. Además el valor del fibrinógeno puede aumentar
en hembras durante el embarazo (Gerros, 2010) (Santos, y otros, 2014).
Cambios en los valores que se deben prestar atención al momento de
realizar un diagnóstico.
31
Cuadro 9. Tabla cruzada de la relación entre el fibrinógeno y la edad del animal.
Pruebas de chi-cuadrado Edad
Valor df
Significación
asintótica
(bilateral)
Chi-cuadrado de
Pearson
2 ,020
N de casos válidos 69
Cuadro 10 Tabla cruzada de la relación entre el fibrinógeno y el sexo del animal.
df
Significación
exacta
(unilateral)
Chi-cuadrado de
Pearson
1
Prueba exacta de
Fisher
,002
32
CAPÍTULO VI
CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
Se concluye que el amiloide sérico A y el fibrinógeno no tienen
concordancia entre sí, al medir inflamación, sin embargo no se
puede asumir que uno es mejor que otro en base a estos resultados.
Con la prueba del análisis de varianza ANOVA se concluye que solo
el valor del SAA depende del tipo de enfermedad que presenta el
animal. Dando valores mucho más altos para patologías infecciosas
que traumáticas y recalcando que la diferencia entre obstructivas
con traumáticas o infecciosa, no es tan marcada como aquella que
existe entre las infecciosas y traumáticas. Concluyendo así que el
amiloide sérico A es un muy buen marcador de inflamación en casos
de infecciones, comparado con el fibrinógeno que no tiene relación
alguna con el tipo de enfermedad o el sistema involucrado.
Existe una diferencia significativa entre el valor del SAA en casos de
infecciones comparado con traumatismos.
En base a uno de los objetivos específicos planteados, se puede
concluir que existe una relación significativa (p<0,05), entre el
fibrinógeno con la edad y sexo del animal. En contraste, el valor del
amiloide sérico A no depende de la edad, sexo ni raza del animal.
En base a las limitaciones presentadas en esta investigación se
debe tomar en cuenta para estudios posteriores, que es necesario
disponer de valores de referencia de estos biomarcadores en
equinos clínicamente sanos, si se quiere demostrar la sensibilidad
de los mismos frente a la presencia de inflamación. O realizar
medidas consecutivas para evaluar la evolución de la enfermad y la
efectividad del tratamiento aplicado.
Debido a la poca información que existe sobre el amiloide sérico A
en el Ecuador y la escasa bibliografía en español, sería muy útil tener
33
más investigaciones sobre el valor del SAA en diferentes patologías
presentes en el país. Valores de referencia y rangos que se acoplen
a la realidad de las condiciones geográficas, físicas, epidemiológicas
y meteorológicas del país, para saber si estas influyen en el valor del
biomarcador.
34
CAPÌTULO VII
BIBLIOGRAFÍA
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40
Anexo # 1. Carta de Referencia para la interpretación del resultado del SAA.
41
Anexo # 2. Modelo de Hoja de admisión al Chino Valley Equine Hospital.
42
Anexo # 3. Base de datos de Chino Valley Equine Hospital recopilada de los casos clinicos presentados en el periodo de Febrero a Octubre
del 2017.
No Nombre paciente Edad (meses) sexo raza Diagnostico tipo de enfermedad sistema afectado fecha valor fibrinogenovalor SAA
1 Rikki 60 Hembra cuarto de milla Gurma equina infecciosa respiratorio 2/6/2017 600 2128
2 Stunning beauty 0,7 hembra pura sangre inglesgurma equina infecciosa respiratorio 7/6/2017 100 0
3 Carrapax 84 Macho Warm blood neumonia infecciosa respiratorio 15/6/2017 500 2313
4 Cooper 96 macho tiro/ pura sangre neumonia infecciosa respiratorio 2/5/2017 200 2066
5 Hidden Crook 36 Macho Pura sangre inglesneumonia y pleuroneumonia infecciosa respiratorio 7/4/2017 1000 2684
6 Ranger 108 Macho Tennese Walker neumonia klebsiella infecciosa respiratorio 23/5/2017 600 >3000
7 Minana de celaya 7 hembra español neumonia infecciosa respiratorio 4/4/2017 300 61
8 Ecijana 7 hembra español neumonia infecciosa respiratorio 4/4/2017 200 255
9 Stetson 216 macho cuarto de milla neumonia klebsiella infecciosa respiratorio 31/5/2017 600 >3000
10 Desert Dynamo 60 macho pura sangre pleuroneumonia infecciosa respiratorio 7/6/2017 600 2290
11 Iwobi 96 macho pura sangre neumonia infecciosa respiratorio 22/6/2017 1000 1344
12 Roanie 240 macho pony edema pulmonar/ neumonia infecciosa respiratorio 19/6/2017 800 2
13 Diaphanous 17 4 macho pura sangre gurma equina infecciosa respiratorio 10/7/2017 1000 2449
14 Burning Brightly 48 macho pura sangre gurma equina infecciosa respiratorio 17/7/2017 100 101
15 Cappuccino 21 macho arabe inflamacion respiratoria infecciosa respiratorio 12/6/2017 300 0
16 Cowboy 24 macho pura sangre pleuroneumonia infecciosa respiratorio 2/5/2017 500 1824
17 Jilguera 24 hembra andalus neumonia infecciosa respiratorio 7/8/2017 500 2640
18 Zircal 144 macho Holsteiner sinusitis infecciosa respiratorio 15/8/2017 200 0
19 Jake 180 macho cuarto de milla neumonia infecciosa respiratorio 6/9/2017 900 2995
20 Hoss 72 macho pura sangre neumonia infecciosa respiratorio 6/9/2017 500 863
21 Reno 180 macho mustang neumonia fiebre infecciosa respiratorio 12/9/2017 600 2923
22 Diamante 168 macho andalus neumonia klebsiella infecciosa respiratorio 2/6/2017 400 84
23 Hustler 192 macho pura sangre neumonia por aspiracion, atrancamientoinfecciosa respiratorio 18/3/2017 600 1076
24 Lelani 8 hembra cuarto de milla neumonia herpes virus infecciosa respiratorio 20/2/2017 100 0
25 Pattington 48 macho pony gurma equina infecciosa respiratorio 21/2/2017 500 1146
43
26 Beauty 2 hembra warmblood gurma equina infecciosa respiratorio 8/3/2017 300 130
27 Raptor 60 macho Frison volvulo en el intestino delgdo obstructiva digestivo 13/6/2017 500 0
28 Smockey 180 macho cuarto de milla volvulo en el intestino delgdo obstructiva digestivo 13/6/2017 100 1000
29 Esperanza 60 hembra cuarto de milla colico por impactacion obstructiva digestivo 11/6/2017 700 0
30 Rio 204 macho cuarto de milla colitis infecciosa digestivo 10/6/2017 200 1179
31 Blue Diamound 12 hembra cuarto de milla colico impactacion arena obstructiva digestivo 10/5/2017 400 0
32 Cairo Healer 36 macho pura sangre volvulo en el intestino delgdo obstructiva digestivo 5/5/2017 300 2359
33 Timber 180 macho cuarto de milla colitis infecciosa digestivo 6/5/2017 200 1477
34 Another sky 17 0,3 hembra pura sangre colitis infecciosa digestivo 30/4/2017 400 345
35 Cp Afire charm 168 hembra arabe colitis infecciosa digestivo 24/4/2017 300 0
36 Aguila alta 36 macho cuarto de milla colitis infecciosa digestivo 23/3/2017 600 >3000
37 Dillinger 396 macho apaloosa impactacion por alimento obstructiva digestivo 18/8/2017 500 713
38 Mistique 180 hembra arabe impactacion obstructiva digestivo 11/9/2017 500 701
39 Cash 288 macho cuarto de milla impactacion por alimento obstructiva digestivo 1/10/2017 400 553
40 Pistol 192 macho cuarto de milla enteritis infecciosa digestivo 17/9/2017 500 1053
41 Hos 72 macho cuarto de milla impactacion por alimento obstructiva digestivo 14/9/2017 300 2048
42 Charlie 168 macho pony impactacion por alimento obstructiva digestivo 12/9/2017 200 0
43 Segen 240 hembra cuarto de milla tromboflebitis en vena yugular, absceso en la mandibula traumatica circulatorio 25/7/2017 600 832
44 Kenny 216 macho pura sangre colico por enterolitos obstructiva digestivo 31/5/2017 700 1901
45 King 168 macho cuarto de milla purpura hemorragica infecciosa circulatorio 2/5/2017 400 2426
46 Cp expressly yours 96 hembra arabe infeccion por Halicephalobus necrosis renalinfecciosa circulatorio 3/5/2017 100 0
47 Arlo 276 hembra belga tromboflebitis traumatica circulatorio 21/2/2017 100 349
48 Don 216 macho cuarto de milla laceracion en el prepucio traumatica musculoesquelético 24/8/2017 900 1076
49 Muffin 84 macho sangre tibia absceso en la mandicula infecciosa musculoesquelético 12/7/2017 300 124
50 Maxi 60 hembra arabe laminitis infecciosa musculoesquelético 27/6/2017 200 0
51 Max 216 macho pura sangre celulitis infecciosa musculoesquelético 22/6/2017 300 2287
52 Clyde 36 macho Clyndesdale secuestro oseo infecciosa musculoesquelético 18/6/2017 400 13
53 Saburo 36 macho pura sangre artrodesis traumatica musculoesquelético 12/6/2017 100 1
54 Sweet lady jane 2017 1 hembra pura sangre artritis septica infecciosa musculoesquelético 2/6/2017 600 >3000
55 Vissilio 1 macho pura sangre avulsion del labio inferior traumatica musculoesquelético 26/4/2017 500 141
44
56 Fiona 24 hembra cuarto de milla laceracion en miembro posterior traumatica musculoesquelético 2/5/2017 300 0
57 Ritz 180 macho arabe fractura seno nasal traumatica musculoesquelético 2/5/2017 300 637
58 Mandiaz 36 macho andalus laceracion en miembro anterior traumatica musculoesquelético 27/4/2017 500 76
59 Vegas 120 macho pura sangre artritis septica celulitis infecciosa musculoesquelético 9/4/2017 400 2380
60 Percy 216 macho oldenburg atritis septica infecciosa musculoesquelético 14/3/2017 300 120
61 Tonto 168 macho pinto fractura de mandibula traumatica musculoesquelético 8/8/2017 400 212
62 Miajonet 4 hembra sangre tibia celulitis infecciosa musculoesquelético 28/8/2017 300 801
63 Comanche 216 macho silla americana infeccion banda coronaria infecciosa musculoesquelético 4/9/2017 800 2645
64 Bud 60 macho cuarto de milla laceracion carpo traumatica musculoesquelético 28/9/2017 200 0
65 Little luke 144 macho sangre tibia celulitis y dermatitis infecciosa musculoesquelético 27/9/2017 400 147
66 Leo 276 macho sangre tibia absceso en el flanco derecho infecciosa musculoesquelético 21/9/2017 400 8
67 Roger 96 macho arabe tendinitis, y lesion medular traumatica musculoesquelético 2/10/2017 100 0
68 Zenardi 228 hembra pura sangre artritis septica infecciosa musculoesquelético 29/5/2017 100 2910
69 Captain 324 macho morgan laceracion en miembro posterior traumatica musculoesquelético 25/4/2017 100 2130
45
Anexo # 4. Media aritmetica del valor del fibrinogeno y el SAA, en base al sistema involucrado y el tipo de enfemerdad.
Media Aritmética Fibrinógeno SAA
Sistema involucrado
Respiratorio 500 1223,9
Digestivo 400 833
Circulatorio 300 902
Musculo esquelético 359 748
Tipo de enfermedad
Traumática 341 450
Infecciosa 439 1050
Obstructiva 418 843
46
Anexo # 5. Cuadro Comparativo de la Media aritmetica del valor del fibrinogeno y el SAA, en base al sistema involucrado y el tipo de
enfemerdad.
0 200 400 600 800 1000 1200 1400
Respiratorio
Digestivo
Circulatorio
Musculoesquelético
Traumática
Infecciosa
Obstructiva
SAA Fibrinógeno
