Estudios integrado de la incidencia de Phytopthora de los cultivos de … · 2014-12-16 · de...
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Universidad del mar
campus puerto escondido
Reporte final servicio social
Estudios integrado de la incidencia de
Phytopthora de los cultivos de papaya en la zona
costa de Oaxaca
Alumna: Jennifer Elvira Abascal Vásquez
Carrera: biología
matricula: 0908001
M. en C Francisco Gumaro Ruíz Ruíz
16 de mayo de 2013.
Índice
1. Introducción
2. Material y métodos
3. Resultados
4. Discusión
5. Conclusión
6. Recomendaciones
7. Bibliografía
Introducción
El cultivo de papaya (Carica papaya) es uno de los cultivos más importantes en México, ya que este el tercer
lugar de producción a nivel mundial. En enero la superficie sembrada era de 17 745ha, con una producción de
42 907ha las cuales en un 80% se concentraron en los estados de Veracruz, Chiapas, Oaxaca, Yucatán,
Campeche y colima (Valencia-Domínguez et al., 2011).
Es en la región costa de Oaxaca es donde se concentra la producción de papaya en el estado, ya que esta
registra temperaturas medias que oscilan entre los 29 y 35º C con suelos arenosos, limosos y con un pH entre
6.5 y 7.0 abundante disponibilidad de agua para el riego de los cultivos, estas características permiten que la
zona costa de Oaxaca ocupa el tercer lugar de producción en papaya por tanto tiene una gran influencia
económica (SAGARPA, 2012).
Durante los últimos años los cultivos de papaya se han visto afectados por diferentes problemáticas, en el año
2013 Oaxaca enfrentó graves problemas de humedad y pérdida de cultivos provocado por las fuertes lluvias
de una producción de 1,300 hectáreas de cultivo solo se produjeron 300 hectáreas (Propapaya, 2013). Una de
las mayores problemáticas son los problemas fitosanitarios causados por hongos del genero Phytophtora, entre
las cuales se destacan los daños producidos en raíz, hojas y fruto (Echemendia, S/A), esta problemática deja
grandes pérdidas económicas.
Phytophtora se presenta en cultivos con una gran humedad, presenta dos tipos de reproducción: asexual (con
la formación de clamidosporas y esporangios, que contienen las zoosporas) y sexual (mediante la formación
de esporas). Para el control de estas plagas se utilizan diferentes tipos de fungicidas, generalmente su uso no
está bien regulado por la falta de conocimiento que se tiene del hongo y sus características.
El presente trabajo tuvo como objetivos la identificación de los hongos fitopátogenos presentes en papaya de
la región costa de Oaxaca, realizar la conserva de los hongos identificados.
Material y Métodos
Aislamiento
Los hongos fitopalogénos con los cuales se trabajo ya habían sido previamente aislado,
estos fueron aislados a partir de papaya. Las resiembras fueron realizadas en medio PDA
acidificado con ácido láctico, fueron incubadas a 25ºC, día con día se realizaron las
respectivas observaciones; características del borde, color, mediciones del hongo,
crecimiento del micelio y forma del micelio.
Conservas
Al tener un hongo con crecimiento del ochenta por ciento este fue conservado en las
siguientes condiciones; en tubos Falcón con 5ml de agua estéril fueron añadidos 5 plots de
medio de cultivo con el respectivo crecimiento del hongo, posterior a esto fueron
debidamente etiquetados y conservadas en congelación. Este tipo de conservas permite
volver a reactivar el hongo después de un año por lo cual es una de las más recomendadas.
Identificación microscópica
Fueron realizadas preparaciones con portaobjetos y cubreobjetos tiñendo el hongo con
azul de metido y posteriormente se observaron bajo el microscopio de contraste de fases, al
igual fueron realizadas preparaciones utilizando cinta adherible doble cara.
Al igual la técnica de microcultivos fue realizada para una mejor identificación de los
hongos no diferenciados, todo esté en condiciones estériles con un bisturí fue cortado PDA
en cuadritos de aproximadamente 1cm2, Este fue colocado en un portaobjetos con el asa
bacteriológica fue inoculado el hongo con ayuda de unas pinzas fue colocado el
cubreobejetos. La preparación fue introducida en una caja pretri en donde estaba presente
una varilla de codo y gasa, fueron agregados 10ml de agua con el fin de mantener la cámara
húmeda. Fue incubado a 25º por cuatro días. Posteriormente fue retirado el cubre objetos y
agregado azul de metido en portaobjetos.
Características
Características
Número de cepa 16
Número de cepa 6
Resultados
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aérea
Textura: algodonosa
Color: Blanco
Observaciones: Ninguna
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aérea
Textura: algodonosa
Color: Morado con blanco
Observaciones: Alrededor
se mostraban pequeñas pequeñas
bolitas blancas
Características
Características
Número de cepa 1
Número de cepa 16
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aérea
Textura: algodonosa
Color: Blanco
Observaciones: Ninguna
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Adherido
Textura: seco
Color: amarillo
Observaciones: Crecimiento lento
Características
Características
Forma del micelio: Rizoide Borde: Filamentoso Elevación: Adherido Textura: Algodonoso
Color: Rosa con blanco Observaciones: Ninguna
Forma del micelio: Rizoide Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo Textura: seco Color: Blanco
Observaciones: Ninguna
Características
Características
Número de cepa 14
Número de cepa 8
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Adherido
Textura: Seco
Color: Rosa con blanco
Observaciones: Con algodón
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aérep
Textura: Algodonoso
Color: Café obscuro
Observaciones: Se observan
esporangios
Características
Características
Número de cepa 31
Número de cepa 30v
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: Rosa con blanco
Observaciones: En un principio se
mostro rosa con blanco
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: blanco intenso
Observaciones: sin ninguna
Características
Características
Número de cepa 34
Número de cepa 32
Forma del micelio: Circular
Borde: Entero
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: Blanco
Observaciones: Ninguna
Forma del micelio: Circular
Borde: filamentoso
Elevación: Adherido
Textura: seco
Color: Amarilla
Observaciones: Ninguna
Características
Características
Número de cepa 39
Número de cepa 36
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentos
Elevación: Seco
Textura: Algodonoso
Color: Blanco con morado
Observaciones: Ninguna
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: Blanco
Observaciones: Ninguna
Características
Características
Número de cepa 40
Número de cepa 38
Forma del micelio: Ambiboide
Borde: Crenado
Elevación: Seco
Textura: Algodonoso
Color: Café oscuro
Observaciones: Crecimiento
Acelerado
Forma del micelio: Ambiboide
Borde: Crenado
Elevación: Seco
Textura: Algodonoso
Color: Café oscuro
Observaciones: Crecimiento
Acelerado
Características
Características
Número de cepa 16N
Número de cepa 2N
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: adherida
Textura: Algodonoso
Color: morado con blanco
Observaciones: sin ninguna
Forma del micelio: rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: blanco
Observaciones: Crecimiento
Acelerado
Características
Características
Número de cepa 3
Número de cepa 1N
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: adherida
Textura: Algodonoso
Color: morado con blanco
Observaciones: En un principio
Se mostro de tonalidad rosa
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Elevado
Textura: Algodonoso
Color: blanco predomina
Observaciones: Su aspecto es duro
Al ser tocado.
Características
Características
Número de cepa 6
Número de cepa 5
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: blanco
Observaciones: Crecimiento lento
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: adherida
Textura: seco
Color: Negro
Observaciones: Crecimiento rápido
Características
Características
Número de cepa 9
Número de cepa 7
Forma del micelio: Rizoide Borde: Filamentoso Elevación: Adherido
Textura: seco Color: Hialino
Observaciones: Algodonoso en la periferia
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: Aéreo
Textura: Algodonoso
Color: blanco con café
Observaciones: ninguna
Características
Características
Número de cepa 42
Número de cepa 41
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: adherido
Textura: seco
Color: Negro
Observaciones: ninguna
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: aéreo
Textura: algodonoso
Color: blanco
Observaciones: ninguna
Características
Características
Número de cepa 44
Número de cepa 43
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: adherido
Textura: seco
Color: Amarillo
Observaciones: ninguna
Forma del micelio: Rizoide
Borde: Filamentoso
Elevación: adherido
Textura: seco
Color: café con negro
Observaciones: ninguna
Discusión
Fueron realizadas 30 conservas las cuales al ser activadas por segunda vez estas no fueron
viables en su totalidad por tanto seria necesario implementar diferentes técnicas de
conservación con el fin de obtener mejor viabilidad.
En cuanto a los fitopátogenos de papaya aisladas y observados fue encontrado Fusarium en
la conservación número 34, una de las características primordiales de este hongo es la
presencia de macroconidios, donde son producidas las esporas, la colona de fusarium se
distingue por crecer con colores blancos, rosados pálidos, rojos, pardos entre otros, nuestra
colonia presenta un color pálido para este caso no fue necesaria la realización de
microcultivo para la diferenciación del hongo (Barnett y Hunter, 1998).
Los medios de cultivo de color morado también presentan fusarium y aunque para algunos
caso no pudo ser observado bajo el microscopio este es característico por sus colores del
medio. El microcultivo en algunos casos no fue de mucha ayuda para diferenciar al hongo
pero dentro de las técnicas que sugiere la literatura esta el someter los medios de cultivo a
luz solar indirecta o bajo un equipo de tubos fluorescentes, luz de día y otro “luz negra”,
encenderlos cada doce horas. Una de las consecuencias por las cuales varia mucho la
coloración de los medios es el pH si bien se observa en muchos de los medios con presencia
de Fusarium estos se observan con tonalidades que van desde el rosa hasta el morado.
Para el caso del medio de cultivo número 14 Rhizopus fue encontrado y este se caracteriza
por la presencia de esporangio foros son ramificación, una de las mejores características fue
la presencia de esporangios esféricos negros con columela, los cuales eran observados a
simple vista o debajo del microscopio estereoscópico. Las colonias presentaron un rápido
crecimiento rápido ya que este hongo cubría la superficie de la placa en menos de 3 días, su
aspecto era denso micelio aéreo y una de las mejores técnicas para observarlo fue la
utilización de cinta adherible doble cara ya que esta permitía observar los esporangios
completos.
Conclusión
Los hongos fitopatogenos de papaya causan grandes perdidas a los agricultores de la zona,
por tanto la identificación de estos causantes de estas enfermedades resulta ser una tarea
sumamente indispensable para el conocimiento básico sobre su crecimiento y morfología
para posteriormente generar soluciones especificas para su erradicación.
Las técnicas utilizadas para su identificación son sumamente básicas y por tanto muchas
veces resultan ser un tanto
Recomendaciónes
Si bien es cierto las técnicas para identificación taxonómica básica son las mejores que se
pueden usar, pero seria más eficiente la realización de técnicas de moleculares para la
identificación taxonómica ya que la mayoría de los hongos no se diferenciaron, haciendo
más difícil el procedimiento, al igual estaría mejor la realización de diferentes formas de
someter a estrés al hongo como ya lo había mencionado con anterioridad que este sea
expuesto a luz o calor.
La disponibilidad de los materiales dentro del laboratorio es indispensable para la
realización de los experimentos y muchas veces estos no eran prestados de forma fácil, esto
trae consigo desventajas ya que hace más lento el proceso de experimentación.
Bibliografía
Barnett, H. L., and B. B. Hunter 1998. Illustrated Genera of Imperfect Fungi. 4th edition.
American Phytopathological Society Press. St. Paul, Minnesota, USA.
Echemendia M. Y.(S/A).Phytophtora: Características, diagnostico y daño que provoca en algunos
cultivos tropicales. Medidas de control.
ProPapaya.(2013).Situación actual de la papaya. http://www.propapaya.org/acerca-de-la-
papaya/situacion-de-la-papaya. Consultada el 13 de mayo del 2014
Valencia-Domínguez H. M., Otelo-Colina G., Santillán-Galicia T y Hernández-Castro
E.(2011).Acrofauna en papaya Maradol (Carica papaya L.) en el estado de Yucatán,
México. Entomotropica.Vol 26(1):17-30
Watanabe, T 2000. Pictorial atlas of soil and seed fungi : morphologies of cultured fungi and key
to species. CRC Press. United States.