Espectrofotómetro de arreglo de diodos

 El detector de arreglo de diodos (diode array) fue introducido a mediados de los

años1970. Es una variación de los detectores de la región ultravioleta. El desarrollo de

los detectores que cuentan con arreglo de diodos es un gran avance en la

espectrofotometría UV. Poseen un nuevo sistema óptico e introducen el concepto de

integración total del detector, microprocesador y procesamiento de datos. La base del

funcionamiento de los espectrómetros de arreglo de diodos es simple: el haz de

radiación que ha atravesado la columna cromatografía, es dispersado por medio de

una red de difracción fija, siendo recogidas simultáneamente todas las longitudes de

onda dispersadas mediante una matriz de fotodiodos.

Utilizan una óptica invertida respecto del convencional: Toda la luz de la fuente

atraviesa la muestra, y luego es dispersada, en lugar de una ranura de salida, tiene en

el plano focal un dispositivo que integra en un pequeño circuito varios cientos de

detectores tipo fotodiodo de silicio. El número de elementos varía actualmente entre 64

y 4096, siendo los más comunes 512 y 1024 elementos. Este detector se compone de

una serie de diodos fotosensibles lado a lado y aislados unos de otros en forma de

capas múltiples sándwich. Cada diodo tiene un espesor muy pequeño y la salida de

cada uno se puede escanear, almacenar y posteriormente procesadas por un

ordenador en un numero de maneras diferentes.

Las principales ventajas del arreglo de fotodiodos son:

Para obtener un espectro no se necesita mover ningún elemento.

Los espectros se obtienen casi de forma instantánea.

Es particularmente importante cuando no hay información disponible de las

absortividades molares a diferentes longitudes de onda.

Está relacionado con la pureza máxima, ayuda a decidir que pico representa

un solo compuesto, o si es un pico de compuestos.

Presenta la desventaja de ser menos sensible que la detección por

ultravioleta convencional.

Fundamento de la Turbidimetría y Nefelometría

La Turbidimetria y la Nefelometría, se basan en el hecho de que la formación de

inmunocomplejos solubles, con un tamaño de 1000+ Å va acompañada por un

aumento proporcional de la luz difractada y en consecuencia una disminución de

la luz transmitida I (Ecuación de Rayleigh).

Inmunoturbidimetria o Turbidimetria: mide la disminución de la intensidad de la luz

transmitida I a 180º debida a la difracción producida por los complejos inmunes

formados. La disminución de la intensidad de luz (aumento de Absorbancia) es

proporcional a la concentración de analito presente.

Nefelometria cuantifica la luz difractada hacia un detector en determinados

ángulos (normalmente 90º). La misma aumenta proporcionalmente al número y

tamaño de los inmunocomplejos formados.

Resulta evidente que la naturaleza de la reacción inmunoquímica es la misma y lo

que los diferencia es el principio de detección empleado.

Características instrumentales para la Turbidimetría y Nefelometría.

• Se usa para especies de alta concentración, como para el control de calidad en

agua, control químico de su tratamiento y determinación de iones sulfato en ella.

• Tiempo real

• Alta precisión

• Método de medición infrarrojo

• Medición de luz transmitida y luz difundida

• Memoria de los valores máximo y mínimo

• Calibración de 0 y 100 NTU

• Carcasa compacta resistente a golpes

• Desconexión automática (a los 5 min.)