Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla ... · Efecto de la suplementación con...

Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla de algodón

sobre las concentraciones de los ácidos transvaccénico y ruménico

en la grasa láctea de vacas en pastoreo

Gastón Adolfo Castaño Jiménez

Universidad Nacional de Colombia

Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia, Departamento de Producción Animal

Bogotá D.C., Colombia

2013

Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla de algodón

sobre las concentraciones de los ácidos transvaccénico y ruménico


Gastón Adolfo Castaño Jiménez

Tesis presentada como requisito parcial para optar al título de:

Magíster en Producción Animal

Línea de Profundización Nutrición de Rumiantes

Director:

Ph.D. Juan Evangelista Carulla Fornaguera

Codirectora:

Ph.D. Martha Lucía Pabón Restrepo

Línea de Investigación: Nutrición Animal

Grupo de Investigación: Nutrición Animal

Universidad Nacional de Colombia

Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia, Departamento de Producción Animal

Bogotá D.C., Colombia

2013

Dedicatoria y Lema

V

A mis padres, a mi esposa y a mi hermano.

“Nunca consideres el estudio como una

obligación, sino como una oportunidad para

penetrar en el bello y maravilloso mundo del

saber”.

Albert Einstein

VI

Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla de algodón sobre la concentración de los ácidos transvaccénico y ruménico


Agradecimientos

VII

Agradecimientos

A los Doctores Juan Carulla y Martha Pabón directores de la investigación, por sus

valiosas orientaciones, apoyo y confianza.

Al Ministerio de Agricultura y Desarrollo Rural por el apoyo económico para la

elaboración de este trabajo.

Al Laboratorio de Nutrición Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia

Unal, Sede Bogotá por el apoyo para realizar los análisis químicos.

Al Centro de Investigación Agropecuario Marengo Unal, Sede Bogotá por facilitar los

animales y el área necesaria para la fase experimental del trabajo.

Al Grupo de Investigación en Nutrición Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria y

de Zootecnia Unal, Sede Bogotá por el apoyo durante la fase experimental y trabajo en

el laboratorio.

VIII

Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla de algodón sobre la concentración de los ácidos transvaccénico y ruménico


Resumen

IX

Resumen

Se realizaron dos experimentos con el fin de determinar el efecto de suplementar con

harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA; experimento 1) y de suministrar dos

niveles de ácido linoleico (Li) proveniente de la mezcla de HA y SA (experimento 2)

sobre el contenido de los ácidos grasos transvaccénico (TVa; C18:1t11) y ruménico (Ru;

C18:2c9,t11) en la grasa láctea de vacas lecheras que pastan P. clandestinum. En el

primer experimento se evaluaron tres suplementos: uno control (C) con baja

concentración de Li y otros con HA o SA como la principal fuente de Li (1.59, 2.91 y 3.69

g de Li / 100 g de MS para los tratamientos C, HA y SA respectivamente); se utilizaron

seis vacas Holstein que fueron distribuidas a una réplica de un diseño experimental

Cuadrado Latino 3 x 3 doble (3 vacas x 3 periodos x 3 tratamientos x 2 cuadrados). En el

segundo experimento se evaluaron dos suplementos que contenían una mezcla de HA y

SA (relación 4.8 : 1) como la principal fuente de Li: uno con baja concentración de Li y

otro con alta (2.64 y 4.08 g de Li / 100 g de MS respectivamente); se utilizaron seis vacas

Holstein distribuidas según un diseño Crossover 6 x 2 x 2 x 2 (6 vacas x 2 periodos x 2

tratamientos x 2 ordenamientos). En cada experimento se emplearon periodos de 28 d

(20 d de acostumbramiento a las dietas experimentales y 8 d para la recolección de

muestras), los animales fueron ordeñados dos veces al día (05:00 y 14:00 h),

permanecieron con agua a voluntad, pastorearon en P. clandestinum y recibieron durante

cada ordeño 60 g de sal mineralizada, 3 kg de suplemento según el tratamiento y 5 g de

Cr2O3. Con la HA se produjo grasa láctea con mayor concentración de TVa (3.11 %;

p<0.01), Ru (1.41 %; p<0.05) y de ácidos grasos insaturados (34.9 %; p<0.01), se

presentó un mayor índice calculado de actividad de la Δ9desaturasa (0.37; p<0.01) y

menores índices de aterogenicidad (1.85; p<0.05) y trombogenicidad (3.09; p<0.01).

Cuando las vacas recibieron SA no se afectaron las concentraciones de TVa y Ru en la

grasa láctea, ni los índices de aterogenicidad, de trombogenicidad y de actividad de la

Δ9desaturasa, pero se obtuvieron menores índices Ru / TVa (0.39; p<0.01) y C14:1 /

C14:0 (0.08; p<0.05). En el experimento 2, al incrementar el nivel de Li no se afectaron

las concentraciones de TVa y Ru en la grasa láctea, pero aumentaron los ácidos grasos

X

Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla de algodón sobre la concentración de ácidos transvaccénico y ruménico


insaturados (35.1 %; p<0.05) y se presentó un mayor índice calculado de actividad de la

Δ9desaturasa y menores índices de aterogenicidad y trombogenicidad (0.37, 1.79 y 3.22

respectivamente; p<0.05). Suplementar vacas lecheras que pastan P. clandestinum con

HA es una buena alternativa para producir leche con beneficios para la salud humana a

diferencia de la SA; por otro lado, al incrementar la concentración de Li utilizando una

mezcla de HA y SA como principal fuente lipídica de Li no logró incrementar el contenido

de TVa y Ru en la grasa láctea.

Palabras Clave: ácido linoleico, ácido linoleico conjugado, ácidos grasos lácteos, vaca

lechera

Abstract

Two experiments were conducted to determine the effect of supplementing the diet with

rice bran (RB) or cottonseed (CS; experiment 1), and supplementing the diet with two

levels of linoleic acid (Li) from the mixture of RB and CS (experiment 2) on transvaccenic

(TVa; C18:1t11) and rumenic (Ru; C18:2c9,t11) fatty acids content in milk fat from dairy

cows grazing on P. clandestinum. Experiment 1, three supplements were evaluated: a

control (C) with low concentration of Li and others with RB or CS as the main source of Li

(1.59, 2.91 and 3.69 g of Li / 100 g DM for treatments C, RB and CS respectively); we

used six Holstein cows distributed to one replica of a double Latin Square design 3 x 3.

Experiment 2, tested two supplements containing a mixture of RB and CS (4.8 : 1 ratio)

as the main source of Li: one with low concentration of Li and other with high level (2.64

and 4.08 g of Li/100 g DM respectively); we used six Holstein cows distributed in a

Crossover design 6 x 2 x 2. Periods of 28 d were used in each experiment (20 d of

adaptation to the experimental diets and 8 d for collection samples), animals were milked

twice a day (05:00 and 14:00 h), water ad libitum, grazed on P. clandestinum and

received 60 g of mineralized salt, 3 kg of supplement according to the treatment and 5 g

of Cr2O3 during each milking. With the RB produced more milk fat concentrations of TVa

(3.11 %, p<0.01), Ru (1.41 %, p<0.05) and unsaturated fatty acids (34.9 %, p<0.01), had

higher Δ9desaturase activity index (0.37, p<0.01), and lower atherogenicity (1.85,

p<0.05) and thrombogenicity (3.09, p<0.01) indexes. When cows received CS the milk fat

concentrations of TVa and ARu were not affected, likewise for atherogenicity,

thrombogenicity and activity of Δ9desaturase indexes, but lower Ru / TVa (0.39, p<0.01)

and C14:1 / C14:0 (0.08, p<0.05) rates were obtained. In experiment 2, increase level of

Contenido XI

Li not affect milk fat concentrations of TVa and Ru, but increased the unsaturated fatty

acids (35.1 %; p<0.05) and had higher Δ9desaturase activity index and lower of

atherogenicity and thrombogenicity indixes (0.37, 1.79 and 3.22 respectively, p <0.05).

Supplementing dairy cows grazing on P. clandestinum with RB is a good alternative to

produce milk with human health benefits in contrast to CS, on the other hand, by

increasing the concentration of Li using a mixture of RB and CS as the main source of Li

failed to increase the content TVa and Ru in milk fat.

Key Words: linoleic acid, conjugated linoleic acid, milk fatty acid, dairy cow.

XII



Contenido

XIII

Contenido

Pág.

Resumen ......................................................................................................................... IX

Lista de tablas ............................................................................................................ XVII

Lista de anexos ........................................................................................................... XIX

Lista de abreviaturas ................................................................................................... XXI

Introducción................................................................................................................... 23

1. Capítulo 1: Efectos de la suplementación con semilla de algodón y harina de arroz sobre las concentraciones de los ácidos transvaccénico (C18:1t11) y ruménico (C18:2c9,t11) en la grasa láctea de vacas en pastoreo Revisión ..................................................................................................................... 25

Resumen ................................................................................................................. 25 Abstract .................................................................................................................. 26 Abreviaturas. .......................................................................................................... 26 1.1 Introducción .................................................................................................... 26 1.2 Los ácidos trans-vaccénico y ruménico y su relación con la salud

humana ............................................................................................................ 27 1.3 Metabolismo de los lípidos en el rumen y su relación con los ácidos

trans-vaccénico y ruménico en la leche de vaca .......................................... 28

1.3.1 Lipólisis ............................................................................................... 29 1.3.2 Biohidrogenación ................................................................................ 29

1.4 La enzima Δ9-desaturasa y la síntesis endógena de ácido ruménico ......... 33

1.4.1 Actividad de la enzima Δ9-desaturasa ................................................. 33 1.4.2 Intermediarios de la biohidrogenación en el rumen que inhiben la

actividad de la enzima Δ9-desaturasa y la síntesis de grasa láctea ..... 33 1.4.3 Inhibición de la enzima Δ9-desaturasa a través de ácidos

ciclopropenos ...................................................................................... 35

1.5 Factores que afectan la concentración de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la grasa láctea ........................................................................ 35

1.5.1 Factores relacionados con la dieta ...................................................... 36 1.5.2 Factores relacionados con el animal ................................................... 40 1.5.3 Factores relacionados con los procesos post-ordeño .......................... 40

XIV



1.6 La harina de arroz y su potencial para incrementar la concentración de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vaca ...................40

1.7 La semilla de algodón y su potencial para incrementar la concentración de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vaca .............................................................................................................41

1.8 Conclusiones ...................................................................................................42 1.9 Referencias ......................................................................................................43

2. Capítulo 2: Efecto de la suplementación con harina de arroz o semilla de algodón sobre el contenido de los ácidos transvaccénico (C18:1t11) y ruménico (C18:2c9,t11) en la leche de vacas en pastoreo .......................................53

Resumen .................................................................................................................53 Abstract ...................................................................................................................54 Abreviaturas. ...........................................................................................................55 2.1 Introducción .....................................................................................................55 2.2 Materiales y Métodos ......................................................................................56

2.2.1 Localización .........................................................................................56 2.2.2 Periodo experimental y tratamientos ....................................................57 2.2.3 Animales y manejo...............................................................................58 2.2.4 Mediciones, toma de muestras y análisis de laboratorio ......................59 2.2.5 Cálculos ...............................................................................................62 2.2.6 Análisis estadístico ..............................................................................64

2.3 Resultados .......................................................................................................65

2.3.1 Consumo de alimento ..........................................................................65 2.3.2 Consumo de precursores de los ácidos trans-vaccénico y

ruménico ..............................................................................................66 2.3.3 Producción y calidad de la leche ..........................................................68 2.3.4 Perfil de ácidos grasos de la grasa láctea ............................................69 2.3.5 Peso vivo, condición corporal y fluido ruminal ......................................71

2.4 Discusión .........................................................................................................71

2.4.1 Consumo de alimento ..........................................................................71 2.4.2 Producción y calidad de la leche ..........................................................72 2.4.3 Perfil de ácidos grasos de la grasa láctea ............................................73 2.4.4 Actividad de la Δ9desaturasa ..............................................................76

2.5 Conclusiones ...................................................................................................77 2.6 Agradecimientos .............................................................................................78 2.7 Referencias ......................................................................................................78

3. Capítulo 3: Efecto de la utilización de dos niveles de inclusión de la mezcla harina de arroz y semilla de algodón sobre la concentración de los ácidos transvaccénico (C18:1t11) y ruménico (C18:2c9,t11) en la leche de vacas en pastoreo .....................................................................................................................87

Resumen .................................................................................................................87 Abstract ...................................................................................................................88 Abreviaturas. ...........................................................................................................89 3.1 Introducción .....................................................................................................89

Contenido XV

3.2 Materiales y métodos ..................................................................................... 90

3.2.1 Localización ........................................................................................ 90 3.2.2 Periodo experimental y tratamientos ................................................... 91 3.2.3 Animales y manejo .............................................................................. 92 3.2.4 Mediciones, toma de muestras y análisis de laboratorio ...................... 93 3.2.5 Cálculos .............................................................................................. 95 3.2.6 Análisis estadístico .............................................................................. 97

3.3 Resultados ...................................................................................................... 97

3.3.1 Consumo de alimento ......................................................................... 97 3.3.2 Consumo de precursores de los ácidos trans-vaccénico y

ruménico ............................................................................................. 99 3.3.3 Producción y calidad de la leche ....................................................... 100 3.3.4 Perfil de ácidos grasos de la grasa láctea ......................................... 101 3.3.5 Peso vivo y fluido ruminal .................................................................. 104

3.4 Discusión ...................................................................................................... 104

3.4.1 Consumo de alimento ....................................................................... 105 3.4.1 Producción y calidad de la leche ....................................................... 106 3.4.2 Perfil de ácidos grasos de la grasa láctea ......................................... 107

3.5 Conclusiones ................................................................................................ 109 3.6 Agradecimientos ........................................................................................... 109 3.7 Referencias ................................................................................................... 110

4. Conclusiones y recomendaciones ........................................................................ 117

4.1 Conclusiones ................................................................................................ 117 4.2 Recomendaciones ........................................................................................ 118

5. Anexos..................................................................................................................... 119

XVI



Lista de tablas

XVII

Lista de tablas

Pág.

Tabla 2-1: Composición de ingredientes y nutrientes de los suplementos alimenticios utilizados en el experimento 58

Tabla 2-2: Perfil de ácidos grasos (AG) de los suplementos alimenticios y del

forraje utilizado en el experimento 58

Tabla 2-3: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el consumo de alimento de vacas lactantes que pastaban P. clandestinum 66

Tabla 2-4: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de

algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el consumo de los ácidos linoleico y linolénico, precursores de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vacas que pastaban P. clandestinum 67

Tabla 2-5: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de

algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre la producción y calidad de la leche de vacas que pastaban P. clandestinum 68

Tabla 2-6: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el perfil de ácidos grasos (AG) de la grasa láctea de vacas que pastaban P. clandestinum 70

Tabla 2-7: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el peso, la condición corporal y el fluido ruminal de de vacas lactantes que pastan P. clandestinum 71

Tabla 3-1: Composición de ingredientes y nutrientes de los suplementos

alimenticios utilizados en el experimento 92

Tabla 3-2: Perfil de ácidos grasos (AG) de los suplementos alimenticios y del forraje utilizado en el experimento 92

Tabla 3-3: Efecto del uso de suplementos con dos niveles de ácido linoleico (bajo

y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de

XVIII



harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el consumo de alimento de vacas lactantes que pastaban P. clandestinum 99


y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el consumo del ácido linoleico, ácido linolénico y precursores de los ácidos transvaccénico y ruménico en la leche de vacas que pastaban P. clandestinum 100


y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre la producción y calidad de la leche de vacas que pastaban P. clandestinum 101


y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el perfil de ácidos grasos (AG) de la grasa láctea de vacas que pastaban P. clandestinum 103


y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el peso vivo y el fluido ruminal de vacas lactantes que pastan P. clandestinum 104

Lista de anexos

XIX

Lista de anexos

Pág.

Anexo 1. Características de los animales al iniciar el experimento y distribución de los animales a los tratamientos en el primer experimento 119

Anexo 2. Características de los animales al iniciar el experimento y distribución de

los animales a los tratamientos en el segundo experimento 120

XX



Lista de abreviaturas

XXI

Lista de abreviaturas

Abreviatura Término

A Suplemento con alto nivel de ácido linoleico (Experimento 2) Es Ácido esteárico AG Ácido graso ALC Ácido linoleico conjugado. Li Ácidolinoleico. Ln Ácido linolénico. Ol Ácido oleico. Ru Ácido ruménico. TVa Ácidotransvaccénico. B Suplemento con bajo nivel de ácido linoleico (Experimento 2) BH Biohidrogenación C Tratamiento control (Experimento 1) CNFn Carbohidratos no fibrosos corregidos por N. DHA Ácido docosahexaenoico. ENL Energía neta de lactancia. EPA Ácido eicosapentaenoico. FDAi Fibra detergente ácido indigerible. FDAn Fibra detergente ácida corregida pornitrógenoN. HA Harina de arroz. MS Materia seca. SA Semilla de algodón.

XXII



Introducción

23

Introducción

La grasa láctea posee una elevada concentración de ácidos grasos (AG) saturados y

contiene AG trans, lo cual ha conducido a cuestionar el consumo de productos lácteos

debido al efecto negativo de este tipo de AG sobre salud humana. Sin embargo, en la

leche se encuentran los AG transvaccénico (TVa; C18:1t-11) y ruménico (Ru; C18:2c-9, t-11)

que están relacionados con efectos benéficos para la salud del hombre, especialmente

por sus propiedades anticarcinogénicas. El TVa y el Ru son producidos como

intermediarios de la biohidrogenación de los AG insaturados en el rumen y el Ru puede

ser sintetizado endógenamente gracias a la actividad de Δ9-desaturasa sobre el TVa. Los

alimentos derivados de los rumiantes son la principal fuente de TVa y Ru.

La dieta es el mayor determinante de la concentración láctea de TVa y Ru. Los animales

bajo el sistema pastoril y que reciben suplementos ricos en AG insaturados pueden

producir leche con elevada concentración de estos AG. El efecto del forraje está

relacionado con el ácido linolénico, mientras que el de la suplementación con el ácido

linoleico (Li).

La producción de leche en el trópico alto colombiano se fundamenta en sistemas

pastoriles, en donde el kikuyo (Pennisetum clandestinum) es la gramínea predominante y

posee una concentración elevada de ácido linolénico. El pastoreo en P. clandestinum,

sumado al aporte de lípidos del suplemento (cerca del 67%), son características de la

ganadería de leche especializada en la sabana de Bogotá que indican un alto potencial

para producir leches ricas en TVa y Ru.

La harina de arroz y la semilla de algodón se utilizan frecuentemente en la elaboración de

suplementos alimenticios para vacas lecheras en Colombia y son fuente de AG

insaturados con elevada concentración de Li, lo cual sugiere que estos dos recursos

podrían ser empleados para producir leche con altos niveles de TVa y Ru.

24

Efecto de la suplementación con harina de arroz o semilla de algodón sobre el contenido de los ácidos transvaccénico y ruménico

en la leche de vacas en pastoreo

Se hipotetiza que la acumulación dentro de los contenidos ruminales Li induce la

activación de la vía metabólica que produce Ru y TVa como intermediarios de la

biohidrogenación a esteárico. Lo cual favorece la concentración de Ru en la leche, ya

sea por la incorporación directa de Ru proveniente del rumen o por la síntesis endógena

en la glándula mamaria a través de la acción de la enzima Δ9-desaturasa sobre el TVa.

Consecuentemente, se espera que al aumentar el aporte Li al suplementar con harina de

arroz o semilla de algodón se produzca un aumento Ru y TVa en la grasa láctea de

vacas que pastan P. clandestinum.

Se realizaron dos experimentos con el fin de determinar el efecto de suplementar con

harina de arroz o semilla de algodón (experimento 1) y de suministrar dos niveles de Li

proveniente de la mezcla de estos dos recursos (experimento 2) sobre el contenido de

TVa y Ru en la grasa láctea de vacas lecheras que pastan P. clandestinum.

Capítulo 1

25

1. Capítulo 1: Efectos de la suplementación con semilla de algodón y harina de arroz sobre las concentraciones de los ácidos transvaccénico (C18:1t11) y ruménico (C18:2c9,t11) en la grasa láctea de vacas en pastoreo Revisión

Gastón A. Castaño J.1,2, Martha L. Pabón R.1,3 y Juan E. Carulla F.1,4

1 Grupo de Investigación en Nutrición Animal. Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá.

2 Candidato Magíster en Producción Animal. Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá. E-mail: [email protected]

3 Profesora Titular. Departamento de Química. Facultad de Ciencias. Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá. E-mail: [email protected]

4 Profesor Titular. Departamento de Producción Animal. Facultad de Medicina Veterinaria

y de Zootecnia. Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá. E-mail:

[email protected]

Resumen

El creciente interés sobre el ácido ruménico (Ru) se atribuye a sus potenciales beneficios

sobre la salud, por lo que se buscan estrategias para incrementar los niveles de este

ácido graso en la carne y leche proveniente de los rumiantes. El Ru es producido como

intermediario en la biohidrogenación del ácido linoleico y también se sintetiza en la

glándula mamaria por la actividad de la enzima Δ9-desaturasa sobre el ácido trans-

vaccénico (TVa). En esta revisión se describen los ácidos TVa y Ru, así como su

importancia en la salud humana, el metabolismo de los lípidos en el rumen y su relación

con los ácidos TVa y Ru en la leche de vaca, y la síntesis de Ru en la glándula mamaria.

También se tratan los factores que aumentan la concentración de estos ácidos grasos y

las características de la harina de arroz y la semilla de algodón que potencialmente

podrían aumentar la concentración de TVa y Ru en la grasa láctea.

26



Palabras clave: ácido linoleico, ácido linoleico conjugado, ácidos grasos lácteos, vaca

lechera.

Abstract

The growing interest in the rumenic fatty acid (Ru) is attributed to its potential health

benefits, so there is an interest in looking for strategies to increase the levels of this fatty

acid in meat and milk from ruminants. The Ru is produced as an intermediate in

biohydrogenation of linoleic acid and is also synthesized in the mammary gland by the

activity of Δ9-desaturase enzyme on trans-vaccenic fatty acid (TVa). This review

describes TVa and Ru fatty acids and their importance in human health, the rumen lipid

metabolism and its relationship with TVa and Ru acids in cow’s milk, and the synthesis of

Ru in mammary gland. It also discusses factors that increase the concentration of these

fatty acids and characteristics of rice bran and cottonseed that could potentially increase

the concentration of TVa and Ru in milk fat.

Key words: linoleic acid, conjugated linoleic acid, milk fatty acid, dairy cow.

Abreviaturas.

BH: Biohidrogenación. Es: ácido esteárico. AG: ácido graso. ALC: ácido linoleico

conjugado. Li: ácido linoleico. Ln: ácido linolénico. Ol: ácido oleico. Ru: ácido ruménico.

TVa: ácido trans-vaccénico. DHA: ácido docosahexaenoico. EPA: ácido

eicosapentaenoico.

1.1 Introducción

El ácido graso (AG) ruménico (Ru; C18:2c-9,t-11) forma parte del grupo de isómeros

conocidos como ácido linoleico conjugado (ALC; Ip et al., 1999) y los alimentos derivados

de los rumiantes son la principal fuente para el hombre (Khanal y Olson, 2004). El Ru es

producido como intermediario en la biohidrogenación (BH) del ácido linoleico (Li;

AbuGhazaleh, 2008) y también se sintetiza endógenamente gracias a la actividad de la

enzima Δ9-desaturasa sobre el ácido trans-vaccéncio (TVa; C18:1t-11), esta vía representa

entre el 75 al 90 % del total de Ru lácteo (Bauman et al., 2008). El creciente interés sobre

el Ru se debe a sus beneficios potenciales sobre la salud humana (Khanal y Olson,

2004) y por eso se buscan estrategias para incrementar los niveles de este AG en la

Capítulo 1

27

carne y leche de los rumiantes.

Existen diferentes factores que afectan la concentración de TVa y Ru en la grasa láctea,

su conocimiento es definitivo para establecer estrategias conducentes a incrementar

estos AG. En la presente revisión se describen los TVa y Ru, así como su importancia en

la salud humana, el metabolismo de los lípidos en el rumen y su relación con los ácidos

TVa y Ru en la leche de vaca y la síntesis de Ru en la glándula mamaria. También se

tratan los factores que afectan la concentración de estos AG y las características de la

harina de arroz y la semilla de algodón que potencialmente podrían aumentar la

concentración de TVa y Ru en la grasa láctea.

1.2 Los ácidos trans-vaccénico y ruménico y su relación con la salud humana

El Ru forma parte del grupo de isómeros conocidos como ALC, este último término se

refiere a la colección de isómeros posicionales y geométricos del AG octadecadienoico

(C18:2) con enlaces conjugados (Ip et al., 1999), que pueden adoptar la forma cis o trans

(Bauman et al., 2004) en diferentes posiciones de la cadena (Khanal y Olson, 2004). El

Ru es la estructura de ALC más común que existe en la naturaleza (Sanhueza et al.,

2002) y los alimentos derivados de los rumiantes son la principal fuente para el hombre

(Khanal y Olson, 2004).

En la leche existen más de 24 isómeros de ALC (Bauman et al., 2008), dentro de los

cuales el Ru y el C18:2t-7,c-9 constituyen la mayor proporción del ALC (Bauman et al.,

2004). El Ru representa del 80 al 90 % del ALC, el C18:2t-7,c-9 del 3 al 16 % y el C18:2t-

10,c-12 cantidades menores al 5 % (Khanal y Olson, 2004), mientras otras formas

representan menos del 1 % (Bauman et al., 2004).

El Ru es producido como intermediario en la BH del Li por las bacterias del rumen

(AbuGhazaleh, 2008) y es sintetizado en la glándula mamaria por la enzima Δ9-

desaturasa que actúa sobre el TVa (Bauman et al., 2008). El TVa representa alrededor

del 53 % del total de los isómeros trans C18:1 de la leche (Paradis et al., 2008) y el 90 %

de los dos isómeros C18:1t-10 y C18:1t-11 (Collomb et al., 2002). El TVa es producido como

intermediario de la BH del Li y Ln en el rumen, además se convierte en Ru en la

glándula mamaria. La relación de TVa : Ru en la grasa de la leche generalmente es 3 : 1

28



(Bauman et al., 2008) y la proporción Ru / (TVa + Ru) tiende a permanecer estable

(Paradis et al., 2008).

El creciente interés por el Ru se atribuye a sus potenciales beneficios sobre la salud

humana, especialmente por tener propiedades anticarcinogénicas (Ip et al., 1999; Park et

al., 2001), antiaterogénicas, antidiabetogénicas (Houseknecht et al., 1998; Munday et al.,

1999), antiobesidad (Khanal y Olson, 2004), regulación del sistema inmune (Moya-

Camarena et al., 1999) y mejoramiento de la mineralización del hueso (Jensen, 2002).

Pariza et al. (1979) reportaron por primera vez el efecto anticancerígeno del Ru y la

Academia Nacional de Ciencias de Estados Unidos (NRC, 1996) concluye que "el ALC

es el único AG que ha mostrado sin dejar ninguna duda un efecto anticancerígeno en

animales experimentales". El consumo de mantequilla enriquecida con isómeros ALC

(incluyendo el ARu) es efectivo para reducir la incidencia de tumores cancerígenos en

ratas (Ip et al., 1999) y se ha encontrado un efecto del Ru en la inhibición de la formación

de papilomas de piel, cáncer de estómago, cáncer de colon y tumores mamarios en

modelos animales (Ip et al., 1996; 1999; Park et al., 2001).

El Ru disminuye el riesgo de ateroesclerosis y diabetes (Jensen, 2002). Estudios

realizados en animales han demostrado que el Ru disminuye los niveles de colesterol-

LDL y aumenta la relación colesterol-HDL / colesterol total (Munday et al., 1999). El Ru

reduce los niveles de leptina (Belury, 2002) y disminuye la producción de citoquinas (Yu

et al., 2002) lo cual podría explicar los efectos benéficos de este compuesto frente a la

diabetes y resistencia a la insulina.

El Ru estimula el sistema inmune (Jensen, 2002), aumentando la producción de

anticuerpos y modulando vías intracelulares (Moya-Camarena et al., 1999). Además,

tiene efectos benéficos sobre la formación del hueso (Jensen, 2002).

1.3 Metabolismo de los lípidos en el rumen y su relación con los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vaca

La utilización de las grasas por parte de los rumiantes se caracteriza por eventos que

ocurren en el rumen antes de que éstos sean absorbidos en el intestino (Doreau y

Chilliard, 1997). La BH de los AG insaturados en el rumen produce marcadas diferencias

Capítulo 1

29

entre los perfiles de AG de la leche y el alimento (Enjalbert et al., 1998). Durante su

permanencia en el rumen, las grasas son transformadas tanto en cantidad como en

composición (Doreau y Chilliard, 1997). Los microorganismos ruminales transforman los

lípidos que llegan al rumen a través de dos procesos principales la lipólisis y la BH

(Jenkins et al., 2008). La presencia de isómeros de AG trans y de ALC es consecuencia

de la BH de los AG poliinsaturados por parte de las bacterias del rumen.

1.3.1 Lipólisis

Los ésteres de AG de la dieta (galactolípidos, fosfolípidos y triglicéridos) inicialmente son

hidrolizados en el rumen (Jensen, 2002), sólo los AG no esterificados de cadenas largas

pueden ser biohidrogenados en el rumen. Por lo tanto, los AG que se encuentran en tri-,

di- o monoglicéridos y monogaloctosil glicerol deben ser liberados a través de la lipólisis

antes de su BH en el rumen (Moate et al., 2008). Las enzimas producidas por bacterias

Anaerovibrio lipolytica y por protozoarios provocan la lipólisis, dichas enzimas que liberan

AG son lipasas, galactosidasas y fosfolipasas (Doreau y Chilliard, 1997), el Butyrivibrio

fibrisolvens tiene actividad estearasa. Los microorganismos del rumen son los principales

productores de lipasas; sin embargo, las lipasas de los forrajes también son importantes

(Jenkins et al., 2008). La lipólisis de los triglicéridos se produce por pasos, el triglicérido

es hidrolizado para producir un diglicérido y un AG no esterificado, posteriormente el

diglicérido es hidrolizado para producir un monoglicérido y un AG no esterificado y por

último el monoglicérido es hidrolizado hasta producir glicerol y un AG no esterificado

(Moate et al., 2008).

Las tasas de la lipólisis y de la BH dependen de la grasa liberada en el rumen y del pH

ruminal (Jenkins et al., 2008), los antibióticos y la disminución del pH reducen la lipólisis

(Doreau y Chilliard, 1997) y la BH (Dewhurst et al., 2006).

1.3.2 Biohidrogenación

Los AG insaturados pueden ser hidrogenados una vez que son liberados (Moate et al.,

2008), produciendo un descenso en los AG insaturados, un incremento en los AG

saturados (Emanuele et al., 1991) y de los isómeros trans y cis, principalmente de C18:1

(Jensen, 2002). La completa BH de los ácidos Li y Ln produce el ácido esteárico (Es) y

en dicho proceso se produce una isomerización inicial que da como resultado varios

30



isómeros cis y trans (Doreau y Chilliard, 1997). La reacción de isomerización ocurre lejos

de cualquier grupo funcional y no requiere de cofactor (Jenkins et al., 2008).

Las bacterias del rumen son simbióticas ya que intercambian intermediarios de la BH

entre las poblaciones (Mosley et al., 2002) y no se reconocen especies simples de

bacterias por tener la capacidad de llevar a cabo todos los pasos de la BH (Mosley et al.,

2002). Las bacterias ruminales están agrupadas de acuerdo al sustrato que utilizan

durante la BH (Mosley et al., 2002), el grupo A que hidrogena los AG poliinsaturados al

AG trans-11 (Vlaeminck et al., 2008) o bacterias que producen BH sólo hasta C18:1

(Jenkins et al., 2008) y el grupo B que hidrogena el TVa a Es y el C18:2t-11,c-15 a C18:1t-11

ó C18:1c-15 (Vlaeminck et al., 2008), estas últimas son identificadas como Fusocillus spp

(Jenkins et al., 2008) y son bacilos Gram (-) (Mosley et al., 2002). En el proceso de BH

del Ln intervienen los dos grupos, mientras que para la del Li intervienen principalmente

las bacterias del grupo A y algunas del B pero de forma transitoria. Las bacterias más

representativas del grupo A en la isomerización del Li y Ln son la B. fibrisolvens y

Eubacterium, aunque otras bacterias hacen esta isomerización de una manera transitoria

como es el caso del Ruminococcus albus (Rojas et al., 2005). Adicional a esta vía

aparecen otras (Vlaeminck et al., 2008).

La BH de las bacterias Gram (-) producen Es a partir de Li y ácido oleico (Ol), pero no a

partir de Ln. La B. fibrisolvens y el Clostridium proteoclasticum producen TVa, pero sólo

el C. proteoclasticum también produce Es. Todas las bacterias que producen

sustanciales cantidades de Ru y TVa, son productoras de butirato, aunque no todas las

productoras de butirato producen Ru y TVa (p.e Eubacterium y Clostridium spp.). Pocas

bacterias forman Ru y TVa también forman Es (Durmic et al., 2008).

El primer paso de la BH del Ln es la isomerización del enlace cis-12 a la posición del C11

ó C13 (Jenkins et al., 2008) produciendo C18:3c-9,t-11,c-15 (Rojas et al., 2005) ó C18:3c-9,t-13,c-

15, luego uno de los dobles enlaces es hidrogenado para producir un C18:2 (Jenkins et

al., 2008), el C18:2t-11,c-15 (Rojas et al., 2005) o el C18:2t-13,c-15, posteriormente se produce

la hidrogenación de otro enlace produciendo un C18:1 (Jenkins et al., 2008), el trans-15,

el cis-11 o el trans-11 (Rojas et al., 2005) que es hidrogenado para producir el Es como

producto final (Jenkins et al., 2008). La BH del Ln produce TVa pero no Ru.

Capítulo 1

31

La principal vía de BH del Li consiste en una isomerización inicial para producir Ru, el

cual es biohidrogenado a TVa, que luego es biohidrogenado para producir Es (Moate et

al., 2008). El TVa es un intermediario común de la BH incompleta del Li y el Ln (Bauman

et al., 2004) y es el más importante de los isómeros C18:1 (Doreau y Chilliard, 1997). En

sistemas in vitro representa entre el 88 al 95 % del total de trans C18:1 (AbuGhazaleh y

Jenkins, 2004a). Cuando existe mucho Li disponible la BH se detiene, impidiendo que los

diferentes isómeros se saturen (Doreau y Chilliard, 1997) y permitiendo que una porción

de TVa y Ru no se sature en el rumen y pase al abomaso (Baumgard et al., 2001), de tal

manera que la elevada concentración de TVa inhibe su propia BH (Moate et al., 2008).

El B. fibrisolvens produce la BH del Li y Ln (Kepler y Tove, 1967) y no puede modificar el

Ol de ninguna manera (Mosley et al., 2002). En el caso del Li la BH se produce en dos

pasos, primero se produce la BH del Li a Ru y luego ocurre la hidrogenación de este

ALC para formar TVa (Hughes et al., 1982). El Es no se forma por acción del B.

fibrisolovens. La reductasa y la isomerasa no forman parte de un complejo enzimático en

el B. fibrisolvens pero forman parte de la membrana (Jenkins et al., 2008). El pH del

rumen tiene un papel importante en el mantenimiento de un ambiente ruminal para B.

fibrisolvens. Un pH superior a 6.0 tiene un efecto positivo en la producción de Ru

(Tsiplakou et al., 2008).

Los ácidos Li y Ln no son los únicos precursores de ALC, el Ol puede ser precursor de

diversos AG trans (AbuGhazaleh et al., 2003) entre el carbono 6 y 16 (Mosley et al.,

2002) incluyendo el TVa (AbuGhazaleh et al., 2003). Cuando el pH es bajo se produce un

doble enlace en un C<10 (Jenkins et al., 2008) y las Pseudomnas isomerizan el Ol a

trans-10 (Mosley et al., 2002) y bacterias de los géneros Propionibacterium,

Streptococcus y lactobacilus convierten el Li en C18:2t-10,c-12 (Jenkins et al., 2008).

El incremento en docosahexaenoico (DHA) y eicosapentaenoico (EPA) aumenta la BH in

vitro de Li, pero reduce la del Ol. El DHA y EPA reducen la actividad de la enzima

reductasa de los microorganismos responsables de la hidrogenación terminal de Ol a Es

y promueve la conversión hacia trans C18:1, especialmente hacia TVa; en este sentido

tiene una mayor capacidad el DHA frente al EPA (AbuGhazaleh y Jenkins, 2004a). La

adición in vitro de DHA incrementa la concentración de TVa y la hidrogenación in vitro del

trans-11 sólo ocurre en ausencia de DHA. El DHA es un potente inhibidor de bacterias,

32



enzimas o ambos involucrados en la BH de isómeros C18:2 no conjugados

intermediarios de la BH como el C18:2t-11,t-15, el C18:2c-9,t-13 y C18:2t-11,c-15 (Vlaeminck et

al., 2008).

Las bacterias, hongos y protozoarios pueden sintetizar o incorporar AG, dentro de

aquellos que son sintetizados los C15 y los C17 son los más característicos (Doreau y

Chilliard, 1997). Los AG de las bacterias raramente son poliinsaturados (Voet y Voet,

1990) y los AG trans monoinsaturados pueden resultar de la desaturación de los AG

saturados. Una vez sintetizados o incorporados los AG son esterificados como

fosfolípidos y esterol ésteres, para constituir lípidos estructurales (Doreau y Chilliard,

1997). Los Ru y TVa en las bacterias pueden constituir entre el 0.51 al 1.37 % y el 3.7 al

12.7 % respectivamente (Váradyová et al., 2008).

Más de la mitad de la masa microbial puede ser protozoal y aproximadamente ¾ partes

de los AG presentes en el rumen pueden estar presentes en los protozoarios. Estos

poseen proporcionalmente mayor cantidad de AG insaturados que las bacterias. Los

protozoarios no sintetizan Ru ni TVa a partir del Es, a través de la ingesta de bacterias

incorporan Ru y TVa formado (Jenkins et al., 2008). La fracción de protozoarios en el

rumen tiene un mayor contenido (2 a 3 veces) de Ru y TVa que las bacterias. Los ácidos

Ru y TVa en los protozoarios pueden constituir entre el 1.5 al 5.9 % y el 7.4 al 17.4 %

respectivamente (Váradyová et al., 2008).

Los hongos anaeróbicos contienen elevados niveles de C18:1, se ha demostrado que el

Piromyces communis convierte el Es en Ol. La incubación de P. communis y

Neocallimastix frontalis produce Ru (Jenkins et al., 2008).

El suministro de AG saturados, palmítico y Es, tiene poco efecto en la fermentación

ruminal de los AG insaturados, y son absorbidos a través del intestino; por lo tanto,

aportan energía que no impacta negativamente en el metabolismo de los

microorganismos del rumen (Warntjes et al., 2008).

Capítulo 1

33

1.4 La enzima Δ9-desaturasa y la síntesis endógena de ácido ruménico

1.4.1 Actividad de la enzima Δ9-desaturasa

La acil-CoA desaturasa (Δ9-desaturasa) cataliza la reacción oxidativa que introduce un

doble enlace en el C9 de la cadena del AG (Voet y Voet, 1990; Jacobs et al., 2011). La

glándula mamaria es el principal sitio de acción de la Δ9-desaturasa en vacas lactantes

(Corl et al., 2001) y la producción de AG insaturados de la leche, particularmente algunos

moninsaturados y casi todo el ALC es regulado por la actividad de esta enzima (Soyeurt

et al., 2008). En la glándula mamaria el Es es convertido a Ol y el TVa a Ru a través de

la Δ9-desaturasa (Corl et al., 2001).

La variación del Ru está relacionada con diferencias en la producción ruminal de TVa y a

diferencias en la acción de la Δ9-desaturasa (Corl et al., 2001). Entre el 75 al 90 % del Ru

en la leche se deriva de la Δ9-desaturación del TVa (Bauman et al., 2008). El incremento

en la cantidad de TVa que llega a la glándula mamaria tiene un efecto positivo sobre la

cantidad Ru en la leche (Bauman et al., 2008), de tal manera al incrementar la

producción de TVa en el rumen mejora la cantidad de Ru lácteo (AbuGhazaleh y Jenkins,

2004b).

La glándula mamaria sólo puede secretar grasa láctea con una adecuada fluidez (Gama

et al., 2008), para ello existe la acción de la Δ9-desaturasa a nivel mamario (Griinari et al.,

2000) que juega un papel importante al generar plasticidad de los triglicéridos para que

puedan ser secretados (Corl et al., 2001). La depresión de grasa láctea puede ser un

mecanismo de adaptación para prevenir la secreción de leche con elevado punto de

fusión (Gama et al., 2008).

1.4.2 Intermediarios de la biohidrogenación en el rumen que inhiben la actividad de la enzima Δ9-desaturasa y la síntesis de grasa láctea

Dietas con y elevado contenido de DHA incrementan C18:2t-10,c-12 (Jenkins et al., 2008).

La primera isomeración del Li en enlace doble cis-12 produce trans-11 (Baumgard et al.,

2001); sin embargo, cambios en el ambiente ruminal producen una isomerización del

34



enlace doble cis-9 del Li produciendo trans-10 que luego se convierte en C18:2t-10,c-12, a

diferencia de la típica isomerización del enlace doble cis-12 que produce Ru (Baumgard

et al., 2001), situación que normalmente se presenta en dietas con concentrado (Jenkins

et al., 2008). El DHA disminuye la BH de los C18:1 e incrementa la concentración de

C18:1t-10 y C18:2t-10,c-12 (Or-Rashid et al., 2008).

El C18:2t-10,c-12 inhibe la actividad de la Δ9-desaturasa (Eder et al., 2002; Lock et al., 2007)

disminuyendo la proporción de Ru (Griinari et al., 2000) y la producción de grasa láctea

(Lock et al., 2006). La infusión abomasal de C18:2t-10,c-12 disminuye los AG de cadena

corta, aumenta los AG de cadena larga e incrementa las relaciones entre los AG mirístico

: miristoleico, palmítico : palmitoleico, Es : Ol y TVa : Ru (Baumgard et al., 2000; Bauman

et al., 2000); las relaciones entre los sustratos y los productos de esta enzima en la grasa

láctea pueden ser un indicador de su actividad (Jacobs et al., 2011) o de una mayor

síntesis en la glándula mamaria (Feng et al., 2007). Existe una relación inversa entre el

porcentaje de grasa en leche y el contenido lácteo de C18:2 t-10,c-12 (Baumgard et al.,

2001; Bauman et al., 2008).

Ciertas dietas causan una marcada depresión de grasa láctea reduciendo la producción

de grasa por encima del 50 %, debido a una menor síntesis AG y utilización de AG

preformados (Bauman et al., 2008). Estas dietas están relacionadas con incrementos en

el contenido de C18:1t-10 y C18:2t-10,c-12 en la leche (Griinari et al., 2000). El C18:2t-10,c-12

baja la producción grasa láctea (Lock et al., 2006) pues reduce la cantidad del RNAm de

los genes asociados con la síntesis de grasa láctea (Peterson et al., 2003); sin alterar la

producción de leche y de proteína (Baumgard et al., 2000), aunque se ha encontrado un

incremento en la producción láctea y reducción en la concentración de proteína a causa

del suministro de este AG (Hutchinson et al., 2012). Inicialmente se estableció que la

depresión de grasa láctea estaba asociada específicamente a un incremento en el

C18:1t-10 en la leche (AbuGhazaleh et al., 2003), pero se ha demostrado que el C18:1t-10

no reduce la grasa láctea, mientras el C18:2 t-10,c-12 sí; por tal motivo, la relación el C18:1t-

10 con la depresión de grasa láctea se debe a que el C18:2 t-10,c-12 forma parte de la vía de

BH que produce el C18:1t-10 (Baumgard et al., 2001). Es probable que una producción de

C18:2t-10,c-12 por las bacterias del rumen pueda ser la responsable de muchos, quizás la

mayoría, de las situaciones alimenticias que producen depresión de grasa láctea

(Baumgard et al., 2000).

Capítulo 1

35

No se requiere de un incremento en C18:2t-10,c-12 para producir depresión de grasa láctea

y se sugiere que existen otros componentes que también producen este efecto (Piperova

et al., 2004). En ciertas situaciones las dietas que inducen depresión de grasa láctea, el

contenido C18:2t-10,c-12 y la magnitud de la reducción en la producción de grasa láctea no

concuerdan con la curva generada cuando se realiza infusión abomasal con diferentes

cantidades de C18:2t-10,c-12, lo cual sugiere que en estas situaciones este sólo AG no

explica completamente la magnitud de la reducción en la grasa láctea (Bauman et al.,

2008) y se sugiere que otros isómeros ALC pueden estar involucrados (Piperova et al.,

2000).

El suministro C18:2t-10,c-12 se ha empleado durante la lactancia temprana para mejorar el

desempeño reproductivo posparto, ya que al limitar la síntesis de grasa láctea se

disminuye la cantidad de energía liberada en la leche y se atenúa el balance negativo

posparto (de Veth et al., 2009; Hutchinson et al., 2011). En algunos casos no se mejora

el desempeño reproductivo o en el status energético del animal debido a que la energía

ahorrada en la síntesis de grasa se destina hacia una mayor producción láctea

(Hutchinson et al., 2012).

1.4.3 Inhibición de la enzima Δ9-desaturasa a través de ácidos ciclopropenos

Los AG ciclopropenos estercúlico (C19:1) y malválico (C18:1) inhiben la Δ9-desaturasa,

evitando que TVa sea transformado a Ru (Corl et al., 2001). El suministro de

ciclopropeno en forma “by pass” inactiva la Δ9-desaturasa (Cook et al., 1976; Ashes et

al., 1997), aunque si este compuesto no está protegido se satura en el rumen (Ashes et

al., 1997) produciendo el ácido ciclopropano que no inhibe la Δ9-desaturasa (Cook et al.,

1976).

1.5 Factores que afectan la concentración de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la grasa láctea

Los factores que afectan el contenido de Ru en la leche se pueden dividir en tres grupos,

los relacionados con la dieta, con el animal y con el manejo post-ordeño (Khanal y Olson,

2004).

36



1.5.1 Factores relacionados con la dieta

La dieta es el mayor determinante de la concentración láctea de Ru (Khanal y Olson,

2004; Rico et al., 2007). El pH en el rumen, el tipo de lípidos ingeridos y el tipo de

bacterias presentes en el rumen afectan la BH o limitan la conversión de TVa a Es

(Chilliard et al., 2000; Tsiplakou et al., 2008). La suplementación con fuentes lipídicas de

AG insaturados, las características de los forrajes, la relación concentrado : forraje, el

sistema de alimentación (pastoreo – dietas totalmente mezcladas) y el suministro de

antibióticos son factores relacionados con la dieta que afectan la concentración de TVa y

Ru en la leche.

1.5.1.1 Suplementación con fuentes lipídicas de ácidos grasos insaturados

El suministro de lípidos con elevado contenido de AG insaturados tiene un efecto positivo

sobre el contenido de Ru y TVa en la leche. Según Dhiman et al. (2000) tanto las

semillas como los aceites aumentan el contenido de Ru y TVa, siempre y cuando el

aceite esté disponible a los microorganismos del rumen para la BH.

Existen diferencias en el tipo de fuente y la manera como han sido procesadas dichas

fuentes. Bu et al. (2007) demuestran que el suministro de fuentes con niveles elevados

de Li son más eficientes en producir Ru y TVa que aquellas ricas en Ln. Khanal y Olson

(2004) indican que suplementar con semillas de oleaginosas calentadas o extruidas

incrementa el el contenido de Ru debido a que dichos procesos facilitan el acceso de los

lípidos por parte de los microorganismos; lo cual es soportado por los resultados de

Paradis et al. (2008).

A continuación se citan algunas fuentes lipídicas que tienen efecto sobre la producción

de Ru o TVa en la leche.

Soya. El aceite de soya posee una gran proporción de Li (51%) y es efectivo para

incrementar el contenido de Ru (Huang et al., 2008) y TVa (Bu et al., 2007) en la leche

de bovinos, cabras (Bouattour et al., 2008) y ovejas (Gómez-Cortés et al., 2008).

Linaza. El aceite de linaza tiene una alta concentración de Ln (50 %; Ueda et al.,

2003; Bu et al., 2007) e incrementa el contenido de Ru y TVa en bovinos (Loor et al.,

2005) y cabras (Vasta et al., 2008) pero en menor intensidad que la soya (Bu et al.,

Capítulo 1

37

2007).

Girasol. El aceite de girasol contiene elevada proporción de Li (60 %) e incrementa

las concentraciones de Ru y TVa en la leche (AbuGhazaleh et al., 2002; Gagliostro et

al., 2006; AbuGhazaleh y Holmes, 2007).

Maíz. El principal AG del aceite de maíz es el Li (53 %) e incrementa las

concentraciones de Ru y TVa en la leche (Bharathan et al., 2008).

Aceite de pescado. La adición de aceites marinos inhiben la reducción de trans

C18:1 a Es (Vlaeminck et al., 2008). El aceite de pescado contiene aproximadamente

10 % de DHA (AbuGhazaleh et al., 2004) y este AG y/o sus derivados promueven la

acumulación de TVa cuando se incuban AG insaturados provistos por otras fuentes

(AbuGhazaleh y Jenkins, 2004a), aumentando la concentración de Ru en la leche

(AbuGhazaleh et al., 2003).

Algas. Las algas inhiben la reducción de trans C18:1 a Es (Vlaeminck et al., 2008) y

tienen un efecto cuadrático sobre el TVa y Ru, lo cual está relacionado con su elevado

contenido de DHA (5.2 %; AlZahal et al., 2008).

Mezclas de fuentes lipídicas. Al mezclar fuentes de Li y Ln con aceite de pescado

que contiene DHA y EPA se incrementa el contenido de Ru y TVa en comparación al

suministro de estas fuentes de manera separada (AbuGhazaleh et al., 2002;

AbuGhazaleh et al., 2003; Gagliostro et al., 2006). Este efecto es mayor si el aceite de

pescado se suministra en combinación con fuentes ricas en Li que cuando se

suministra con fuentes ricas en Ol y Ln (AbuGhazaleh et al., 2003). La

suplementación con semillas de linaza y el aceite de girasol incrementa Ru y TVa en

la leche (Hervás et al., 2008).

Grasas sobrepasantes. Suministrar Ru como sales de calcio produce mayor

concentración de Ru en la grasa láctea que cuando se suministra Ru como AG libre

(Huang et al., 2008). Algunas fuentes de grasas sobrepasantes pueden ser

biohidrogenadas en el rumen y aumentar la cantidad de precursores, de tal manera

que aumenta los ácidos TVa y Ru en leche (Schroeder et al., 2003; Lundy et al., 2004;

Juchem et al., 2008).

1.5.1.2 Características de los forrajes

La variación en el contenido de Ru es directamente proporcional al contenido de Ln

presente en los forrajes (Mel´uchová et al., 2008); la época del año, la conservación, la

38



madurez y el manejo del forraje son factores que afectan la concentración de este AG. La

presencia de metabolitos secundarios también afecta la concentración de Ru en leche.

Época del año. Existen diferencias en la concentración de Ru y TVa a través del año

(Collomb et al., 2008) y estas diferencias van acompañadas de un mayor consumo de

Ln (Vibart et al., 2008; Mel´uchová et al., 2008). Los factores ambientales afectan el

contenido de AG de la serie omega 3 (Dewhurst et al., 2006) y parece que las

pasturas con la vía del carbono C3 incrementan el Ru con relación las de la vía C4

debido a su mayor concentración de Ln (Khanal y Olson, 2004).

Conservación de forrajes. La leche proveniente de animales en pastoreo contiene

mayores niveles de Ru que aquella proveniente de animales que consumen ensilaje

(Elgersma et al., 2006). El proceso de ensilaje produce pérdida de lípidos, de Li y de

Ln (Dewhurst y King, 1998; Dewhurst et al., 2006; Rego et al., 2008) lo cual afecta el

contenido de Ru y TVa en la leche. El ensilaje posee mayor cantidad de AG

insaturados no esterificados que pueden ser fácilmente hidrogenados a Es (Dewhurst

et al., 2006). El efecto de los ensilajes sobre la BH varía según la composición

botánica de los forrajes utilizados para elaborar el ensilaje (Lourenço et al., 2007).

Madurez del forraje. La madurez está asociada con la disminución en la proporción

de Ln y aumento concomitante de Ol y Li (Khanal y Olson, 2004; Vanhatalo et al.,

2007), lo cual tiene un efecto negativo sobre la concentración Ru lácteo.

Manejo. La fertilización con N incrementa el Ln, mientras que al incrementar los

periodos de rebrote se disminuye (Elgersma et al., 2006; Dewhurst et al., 2006).

Metabolitos secundarios. Una gran variedad de extractos de plantas tienen efecto

inhibitorio selectivo sobre C. proteoclasticum que forma Es a partir de Li sin afectar el

B. fibrisolvens (Durmic et al., 2008), lo cual incrementa el flujo de TVa. El contenido de

taninos afecta la composición de AG en la carne y la leche (Vasta et al., 2008) ya que

reducen la BH de la planta (Dewhurst et al., 2006). Así mismo, la polifenol oxidasa

presente en algunos forrajes como el trébol rojo (Trifolium pratense L.) disminuye la

lipólisis (Lourenço et al., 2007).

1.5.1.3 Relación concentrado : forraje

Se presentan mayores concentraciones de Ru y TVa cuando las vacas están pastando,

en relación con aquellas que se encuentran estabuladas (Kelly et al., 1998; Dhiman et al.,

1999a; Schroeder et al., 2003; Rego et al., 2004; Couvreur et al., 2007; Craninx et al.,

Capítulo 1

39

2008; Juchem et al., 2008; Khanal et al., 2008; AlZahal et al., 2008) y lo mismo ocurre en

ovejas; esto se encuentra relacionado con el perfil de AG de la dieta (Tsiplakou et al.,

2008) y con la mayor concentración de Ln en el forraje (Rego et al., 2008; Biondi et al.,

2008). Al incrementar la proporción de forraje consumido en pastoreo se incrementa

linealmente la concentración de Ru en la leche (Vibart et al., 2008).

Existen diferentes factores que pueden afectar el ambiente ruminal y la población

microbiana que podría diferenciar a los animales en pastoreo como son: la tasa de

pasaje y la dilución de nutrientes debido al elevado consumo de agua asociado con el

pastoreo (Schroeder et al., 2004). El tamaño del alimento, la frecuencia de consumo, el

tamaño del bocado y el tiempo dedicado a la rumia pueden diferenciar a las vacas en

pastoreo (Kelly et al., 1998). En el sistema de pastoreo se producen mayores niveles de

AG poliinsaturados y mayores contenidos de Ru en la grasa láctea comparado con el

suministro de forraje conservado (Noni y Battelli, 2008).

La pastura disminuye el tamaño del glóbulo graso, y por lo tanto incrementa los AG

monoinsaturados y poliinsaturados (Couvreur et al., 2007). El tamaño del glóbulo de

grasa disminuye al incrementar la proporción de forraje fresco en la dieta (Couvreur et al.,

2006).

1.5.1.4 Suministro de antibióticos

Los ionóforos inhiben la BH ruminal (AlZahal et al., 2008) e incrementan el total de

isómeros C18:1, específicamente C18:1t-10 y aumentan el Ru (Odongo et al., 2007; Aldai

et al., 2008) especialmente cuando interactúa con el aceite de soya (AlZahal et al., 2008)

y de pescado (Dhiman et al., 1999a; Wang et al., 2005), ya que este efecto es mayor en

dietas con elevada concentración de AG insaturados (Duffield et al., 2008).

La monensina es un antibiótico ionóforo que inhibe la lipólisis (AlZahal et al., 2008), el

crecimiento de las bacterias Gram (+) (Wang et al., 2005) que realizan la BH del Li a Ol,

mientras la reducción del Ol a Es es realizada por bacterias Gram (-), de tal manera que

la acumulación de C18:1 no puede ser atribuida al efecto de la monensina sobre las

Gram (+) (AlZahal et al., 2008).

La monensina que en asociación con suplementación lipídica puede incrementar el

40



contenido de Ru (AlZahal et al., 2008) reduce la presencia de AG de cadena corta y de la

grasa láctea (Duffield et al., 2008).

1.5.2 Factores relacionados con el animal

Existe un cambio progresivo en la concentración de los AG de la leche (Craninx et al.,

2008) y un pequeño incremento en los índices de actividad de la Δ9-desaturasa

relacionados con el estado de la lactancia (Soyeurt et al., 2008). También existe una

relación positiva entre el número de partos y el contenido de Ru (Khanal y Olson, 2004).

Se presentan variaciones entre razas, las vacas Holstein producen mayor cantidad de Ru

que las vacas Jersey o Normando, aunque se ha encontrado que si la dieta es la misma

las variaciones son mínimas (Khanal y Olson, 2004). Los animales que producen

glóbulos grasos pequeños producen mayor cantidad de Ru y TVa que aquellas con

glóbulos grasos grandes (Couvreur et al., 2007). Si las vacas producen menos cantidad

de grasa poseen glóbulos grasos más pequeños y producen mayor proporción de Ru

(Weisbjerg et al., 2008). Se ha encontrado una gran variación en los TVa y Ru (Rico et

al., 2007) de 0.3 a 4.1 y de 0.7 a 7.0 respectivamente, lo cual ha sido atribuido a

diferencias individuales de la enzima Δ9-desaturasa (Rego et al., 2008).

1.5.3 Factores relacionados con los procesos post-ordeño

El efecto de los procesos post-ordeño sobre el contenido de Ru es controversial. Se

puede argumentar que el contenido de los productos depende del contenido original de la

leche. Sin embargo, es probable que los cultivos microbianos utilizados para elaborar

productos lácteos pueden producir enzimas que isomerizan el Li en Ru (Rico et al.,

2007).

1.6 La harina de arroz y su potencial para incrementar la concentración de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vaca

La harina de arroz es el nombre que se le da en Colombia al cilindro de arroz o salvado

de arroz. Es un subproducto industrial de la molienda del arroz (Gadberry et al., 2005; de

Campos et al., 2007), corresponde a la capa color café presente en el arroz

(AbuGhazaleh et al., 2009) e incluye embrión, parte del endospermo almidonado,

Capítulo 1

41

endospermo y un poco de cáscara (Warren y Farrell, 1990). Su composición química

varía ampliamente probablemente por adulteración con la casca del arroz (Warren y

Farrell, 1990) pero la concentración de nutrientes (almidón del 39.2 %, Wilks et al., 1991;

FDN del 54.9 %, Dung et al., 2002; proteína entre el 11 al 15 % y extracto etéreo entre el

15 al 20 %, de Campos et al., 2007) y su bajo costo (de Campos et al., 2007) permiten su

fácil inclusión en el alimento para animales.

La principal característica del salvado de arroz es el aceite, pues es uno de los más

nutritivos debido a su composición favorable de AG insaturados (Lin et al., 2009) y si se

extrae pronto después de la molienda puede ser utilizado como un alimento útil para el

hombre (Warren y Farrell, 1990). La concentración de extracto etéreo puede variar (29 %,

Dung et al., 2002; entre el 15 al 20 %, de Campos et al., 2007) pero se caracteriza por

una elevada concentración de Ol (43 %, Warren y Farrell, 1990; 39 %, Bravi et al., 2006;

del 34 al 37 %, de Campos et al., 2007) y de Li (39 %, Warren y Farrell, 1990; 29 %,

Bravi et al., 2006; del 36 al 42 %, de Campos et al., 2007), además presenta elementos

naturales con actividad antioxidante (Lin et al., 2009).

Esta materia prima es frecuentemente utilizada en la formulación de alimentos

balanceados para vacas lecheras en Colombia y debido a la elevada concentración de Li

puede tener potencial para incrementar las concentraciones lácteas de los ácidos Ru y

TVa de vacas en pastoreo.

1.7 La semilla de algodón y su potencial para incrementar la concentración de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vaca

La semilla de algodón es un alimento derivado de la industria de la fibra de algodón, que

frecuentemente se utiliza en las raciones de rumiantes. La semilla de algodón, posee

gosipol (C30H30O8), un compuesto polifenólico amarillo que se encuentra de manera libre

y ligada. El gosipol libre es tóxico para animales monogástricos, pero los rumiantes lo

ligan a una proteína del rumen, evitando su absorción. La forma libre también se puede

convertir a ligada debido al calor, humedad y presión durante la extrusión (Zhang et al.,

2007).

La semilla de algodón tiene el 19 % de grasa que contiene el 23 % de palmítico, el 17 %

42



de Ol y el 57 % de Li (Dhiman et al., 1999a; Dhiman et al., 1999b; Khanal y Olson, 2004).

Esto convierte a este recurso alimenticio en un buen candidato para incrementar las

concentraciones de Ru en la leche debido a sus elevados niveles de Li. Sin embargo,

Rico et al. (2007) encontraron una correlación negativa entre la presencia de semilla de

algodón en la dieta y la concentración de Ru en la leche (-0.7). Estos resultados no

significan una relación causa efecto y deben ser revisados con precaución pues los

mismos autores afirman que aunque existe una asociación negativa entre el consumo de

semilla de algodón y la concentración de Ru, el contenido de AG saturados e insaturados

no parece ser suficiente para explicar dicho efecto.

El aceite de algodón posee de ácidos ciclopropenos (Corl et al., 2001) como malválico y

estercúlico (alrededor del 1 % del aceite; Coppock et al., 1987) que inhiben la actividad

de la enzima Δ9-desaturasa (Cook et al., 1976). La BH de estos ácidos en el rumen

produce ciclopropano que no es capaz de inhibir la Δ9-desaturasa (Cook et al., 1976); por

tal motivo, los rumiantes no experimentan efectos negativos con el suministro de semilla

de algodón sobre la Δ9-desaturasa (Archibeque et al., 2005; Liu et al., 2008; Vasta et al.,

2008) debido a que los ciclopropenos representan una menor proporción del total de la

dieta y la BH ruminal los inactiva (Corl et al., 2001).

La suplementación con semilla de algodón no genera efectos negativos sobre las

concentraciones de Ru y TVa en leche y en tejido adiposo (Archibeque et al., 2005), no

produce variación en el perfil de AG en la leche (Vasta et al., 2008), pero animales que

consumieron 2.7 kg de semilla de algodón por día presentaron un aumento en la

concentración de Ru en la leche (Liu et al., 2007).

Por lo tanto, no existen evidencias suficientes para asegurar que el consumo de semilla

de algodón pueda producir disminución en la síntesis del Ru en la glándula mamaria. La

concentración de AG insaturados sugiere que esta fuente lipídica puede utilizarse para

incrementar la concentración de Ru y TVa en la leche, teniendo en cuenta que esta

materia prima se usa en la fabricación de alimentos balanceados para vacas lecheras del

trópico alto colombiano

1.8 Conclusiones

La alimentación es el principal factor para incrementar la concentración de los ácidos

Capítulo 1

43

trans-vaccénico y ruménico en la leche. Aumentar el consumo de forraje fresco,

incrementar el consumo de ácido linoleico utilizando diferentes suplementos lipídicos y el

consumo de ácido linolénico proveniente del forraje permite incrementar la concentración

láctea de los ácidos trans-vaccénico y ruménico. El control de las condiciones ruminales

con ionóforos y con ácido docosahexaenoico potencializa el suministro de ácidos grasos

insaturados. La harina de arroz y la semilla de algodón son dos fuentes lipídicas que

aparentemente pueden incrementar la concentración láctea de los ácidos trans-vaccénico

y ruménico.

1.9 Referencias

ABUGHAZALEH, A. A. 2008. Effect of fish oil and sunflower oil supplementation on milk conjugated linoleic acid content for grazing dairy cows. Anim. Feed Sci. and Technol. 141(3-4):220-232.

ABUGHAZALEH, A. A. y HOLMES, L. D. 2007. Supplementation with fish oil and sunflower oil to increase conjugated linoleic acid levels in milk fat of partially grazing dairy cows. J. Dairy Sci. 90(6):2897-2904.

ABUGHAZALEH, A. A. y JENKINS, T. C. 2004a. Disappearance of docosahexaenoic and eicosapentaenoic acids from cultures of mixed ruminal microorganisms. J. Dairy Sci. 87(3):645-651.

ABUGHAZALEH, A. A. y JENKINS, T. C. 2004b. Short communication: Docosahexaenoic acid promotes vaccenic acid accumulation in mixed ruminal cultures when incubated with linoleic acid. J. Dairy Sci. 87(4):1047-1050.

ABUGHAZALEH, A. A.; POTU, R. B. y IBRAHIM, S. 2009. Short communication: The effect of substituting fish oil in dairy cow diets with docosahexaenoic acid-micro algae on milk composition and fatty acids profile. J. Dairy Sci. 92(12):6156-6159.

ABUGHAZALEH, A. A.; SCHINGOETHE, D. J.; HIPPEN, A. R. y KALSCHEUR, K. F. 2003. Milk conjugated linoleic acid response to fish oil supplementation of diets differing in fatty acid profiles. J. Dairy Sci. 86(3):944-953.

ABUGHAZALEH, A. A.; SCHINGOETHE, D. J.; HIPPEN, A. R. y KALSCHEUR, K. F. 2004. Conjugated linoleic acid increases in milk when cows fed fish meal and extruded soybeans for an extended period of time. J. Dairy Sci. 87(6):1758-1766.

ABUGHAZALEH, A. A.; SCHINGOETHE, D. J.; HIPPEN, A. R.; KALSCHEUR, K. F. y WHITLOCK, L. A. 2002. Fatty acid profiles of milk and rumen digesta from cows fed fish oil, extruded soybeans or their blend. J. Dairy Sci. 85(9):2266-2276.

ALDAI, N.; DUGAN, M. E. R.; KRAMER, J. K. G.; MIR, P. S. y MCALLISTER, T. A. 2008. Non-ionophore antibiotics do not affect the trans-18:1 and CLA composition in beef adipose tissue. J. Anim Sci. 86(12):3522-3532.

ALZAHAL, O.; ODONGO, N. E.; MUTSVANGWA, T.; OR-RASHID, M. M.; DUFFIELD, T. F.; BAGG, R.; DICK, P.; VESSIE, G. y MCBRIDE, B. W. 2008. Effects of monensin and dietary soybean oil on milk fat percentage and milk fatty acid profile in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 91(3):1166-1174.

44



ARCHIBEQUE, S. L.; LUNT, D. K.; GILBERT, C. D.; TUME, R. K. y SMITH, S. B. 2005. Fatty acid indices of stearoyl-CoA desaturase do not reflect actual stearoyl-CoA desaturase enzyme activities in adipose tissues of beef steers finished with corn-, flaxseed-, or sorghum-based diets. J. Anim Sci. 83(5):1153-1166.

ASHES, J. R.; GULATI, S. K. y SCOTT, T. W. 1997. Potential to alter the content and composition of milk fat through nutrition. J. Dairy Sci. 80(9):2204-2212.

BAUMAN, D. E.; BAUMGARD, L. H.; CORL, B. A. y GRIINARI, J. M. 2000. Biosynthesis of conjugated linoleic acid in ruminants. J. Anim Sci. 77(E-Suppl):1-ae.

BAUMAN, D. E.; PERFIELD, J. W., II; HARVATINE, K. J. y BAUMGARD, L. H. 2008. Regulation of fat synthesis by conjugated linoleic acid: lactation and the ruminant model. J. Nutr. 138(2):403-409.

BAUMAN, D. E.; PERFIELD, J. W., II y LOCK, A. L. 2004. Effect of trans fatty acids on milk fat and their impact on human health. Pages 42-54 in Cornell University, New York.

BAUMGARD, L. H.; CORL, B. A.; DWYER, D. A.; SAEBO, A. y BAUMAN, D. E. 2000. Identification of the conjugated linoleic acid isomer that inhibits milk fat synthesis. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 278(1):R179-R184.

BAUMGARD, L. H.; SANGSTER, J. K. y BAUMAN, D. E. 2001. Milk fat synthesis in dairy cows is progressively reduced by increasing supplemental amounts of trans-10, cis-12 conjugated linoleic acid (CLA). J. Nutr. 131(6):1764-1769.

BELURY, M. A. 2002. Dietary conjugated linoleic acd and health: Physiological effects and mechanisms of action. Ann. Rev. Nutr. 22(1):505-531.

BHARATHAN, M.; SCHINGOETHE, D. J.; HIPPEN, A. R.; KALSCHEUR, K. F.; GIBSON, M. L. y KARGES, K. 2008. Conjugated linoleic acid increases in milk from cows fed condensed corn distillers solubles and fish oil. J. Dairy Sci. 91(7):2796-2807.

BIONDI, L.; VALVO, M. A.; DI GLORIA, M.; TENGHI, E. S.; GALOFARO, V. y PRIOLO, A. 2008. Changes in ewe milk fatty acids following turning out to pasture. Small Ruminant Res. 75(1):17-23.

BOUATTOUR, M. A.; CASALS, R.; ALBANELL, E.; SUCH, X. y CAJA, G. 2008. Feeding soybean oil to dairy goats increases conjugated linoleic acid in milk. J. Dairy Sci.

91(6):2399-2407.

BRAVI, E.; PERRETTI, G. y MONTANARI, L. 2006. Fatty acids by high-performance liquid chromatography and evaporative light-scattering detector. J. Chromatogr. A.

1134(1-2):210-214.

BU, D. P.; WANG, J. Q.; DHIMAN, T. R. y LIU, S. J. 2007. Effectiveness of oils rich in linoleic and linolenic acids to enhance conjugated linoleic acid in milk from dairy cows. J. Dairy Sci. 90(2):998-1007.

CHILLIARD, Y.; FERLAY, A.; MANSBRIDGE, R. M. y DOREAU, M. 2000. Ruminant milk fat plasticity: nutritional control of saturated, polyunsaturated, trans and conjugated fatty acids. Ann. Zootech. 49(3):181-205.

COLLOMB, M.; BISIG, W.; BÜTIKOFER, U.; SIEBER, R.; BREGY, M. y ETTER, L. 2008. Fatty acid composition of mountain milk from Switzerland: Comparison of organic and integrated farming systems. Int. Dairy J. 18(10-11):976-982.

COLLOMB, M.; BÜTIKOFER, U.; SIEBER, R.; JEANGROS, B. y BOSSET, J. O. 2002.

Capítulo 1

45

Composition of fatty acids in cow's milk fat produced in the lowlands, mountains and highlands of Switzerland using high-resolution gas chromatography. Int. Dairy J. 12(8):649-659.

COOK, L.; SCOTT, T.; MILLS, S.; FOGERTY, A. y JOHNSON, A. 1976. Effects of protected cyclopropene fatty acids on the composition of ruminant milk fat. Lipids.

11(9):705-711.

COPPOCK, C. E.; LANHAM, J. K. y HORNER, J. L. 1987. A review of the nutritive value and utilization of whole cottonseed, cottonseed meal and associated by-products by dairy cattle. Anim. Feed Sci. and Technol. 18(2):89-129.

CORL, B. A.; BAUMGARD, L. H.; DWYER, D. A.; GRIINARI, J. M.; PHILLIPS, B. S. y

BAUMAN, D. E. 2001. The role of -desaturase in the production of cis-9, trans-11 CLA. J. Nutr. Biochem. 12(11):622-630.

COUVREUR, S.; HURTAUD, C.; LOPEZ, C.; DELABY, L. y PEYRAUD, J. L. 2006. The linear relationship between the proportion of fresh grass in the cow diet, milk fatty acid composition, and butter properties. J. Dairy Sci. 89(6):1956-1969.

COUVREUR, S.; HURTAUD, C.; MARNET, P. G.; FAVERDIN, P. y PEYRAUD, J. L. 2007. Composition of milk fat from cows selected for milk fat globule size and offered either fresh pasture or a corn silage-based diet. J. Dairy Sci. 90(1):392-

403.

CRANINX, M.; STEEN, A.; VAN LAAR, H.; VAN NESPEN, T.; MARTIN-TERESO, J.; DE BAETS, B. y FIEVEZ, V. 2008. Effect of lactation stage on the odd- and branched-chain milk fatty acids of dairy cattle under grazing and indoor conditions. J. Dairy Sci. 91(7):2662-2677.

DE CAMPOS, R. M. L.; HIERRO, E.; ORDÓÑEZ, J. A.; BERTOL, T. M.; TERRA, N. N. y DE LA HOZ, L. 2007. Fatty acid and volatile compounds from salami manufactured with yerba mate (Ilex paraguariensis) extract and pork back fat and meat from pigs fed on diets with partial replacement of maize with rice bran. Food Chem. 103(4):1159-1167.

DE VETH, M. J.; BAUMAN, D. E.; KOCH, W.; MANN, G. E.; PFEIFFER, A. M. y BUTLER, W. R. 2009. Efficacy of conjugated linoleic acid for improving reproduction: A multi-study analysis in early-lactation dairy cows. J. Dairy Sci. 92(6):2662-2669.

DEWHURST, R. J. y KING, P. J. 1998. Effects of extended wilting, shading and chemical additives on fatty acids in laboratory grass silages. Grass Forage Sci. 53:219-225.

DEWHURST, R. J.; SHINGFIELD, K. J.; LEE, M. R. F. y SCOLLAN, N. D. 2006. Increasing the concentrations of beneficial polyunsaturated fatty acids in milk produced by dairy cows in high-forage systems. Anim. Feed Sci. and Technol.

131(3-4):168-206.

DHIMAN, T. R.; ANAND, G. R.; SATTER, L. D. y PARIZA, M. W. 1999a. Conjugated linoleic acid content of milk from cows fed different diets. J. Dairy Sci. 82(10):2146-2156.

DHIMAN, T. R.; HELMINK, E. D.; MCMAHON, D. J.; FIFE, R. L. y PARIZA, M. W. 1999b. Conjugated linoleic acid content of milk and cheese from cows fed extruded oilseeds. J. Dairy Sci. 82(2):412-419.

DHIMAN, T. R.; SATTER, L. D.; PARIZA, M. W.; GALLI, M. P.; ALBRIGHT, K. y TOLOSA, M. X. 2000. Conjugated linoleic acid (CLA) content of milk from cows

46



offered diets rich in linoleic and linolenic acid. J. Dairy Sci. 83(5):1016-1027.

DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 1997. Digestion and metabolism of dietary fat in farm animals. Br. J. Nutr. 78(01):S15-S35.

DUFFIELD, T. F.; RABIEE, A. R. y LEAN, I. J. 2008. A Meta-Analysis of the impact of monensin in lactating dairy cattle. Part 2. Production effects. J. Dairy Sci.

91(4):1347-1360.

DUNG, N. N. X.; MANH, L. H. y UDÉN, P. 2002. Tropical fibre sources for pigs-digestibility, digesta retention and estimation of fibre digestibility in vitro. Anim. Feed Sci. and Technol. 102(1-4):109-124.

DURMIC, Z.; MCSWEENEY, C. S.; KEMP, G. W.; HUTTON, P.; WALLACE, R. J. y VERCOE, P. E. 2008. Australian plants with potential to inhibit bacteria and processes involved in ruminal biohydrogenation of fatty acids. Anim. Feed Sci. and Technol. 145(1-4):271-284.

EDER, K.; SLOMMA, N. y BECKER, K. 2002. trans-10,cis-12 Conjugated linoleic acid

suppresses the desaturation of linoleic and -linolenic acids in HepG2 cells. J. Nutr. 132(6):1115-1121.

ELGERSMA, A.; TAMMINGA, S. y ELLEN, G. 2006. Modifying milk composition through forage. Anim. Feed Sci. and Technol. 131(3-4):207-225.

EMANUELE, S. M.; STAPLES, C. R. y WILCOX, C. J. 1991. Extent and site of mineral release from six forage species incubated in mobile dacron bags. J. Anim Sci.

69(2):801-810.

ENJALBERT, F.; NICOT, M. C.; BAYOURTHE, C. y MONCOULON, R. 1998. Duodenal infusions of palmitic, stearic or oleic acids differently affect mammary gland metabolism of fatty acids in lactating dairy cows. J. Nutr. 128(9):1525-1532.

FENG, S.; SALTER, A. M.; PARR, T. y GARNSWORTHY, P. C. 2007. Extraction and quantitative analysis of stearoyl-Coenzyme A desaturase mRNA from dairy cow milk somatic sells. J. Dairy Sci. 90(9):4128-4136.

GADBERRY, M. S.; BECK, P. A.; KELLOGG, D. W. y GUNTER, S. A. 2005. Digestion characteristics and growth of steers fed a corn-grain based supplement compared to a de-oiled rice bran plus cottonseed supplement with or without extrusion processing. Anim. Feed Sci. and Technol. 118(3-4):267-277.

GAGLIOSTRO, G. A.; RODRÍGUEZ, A.; PELLEGRINI, P.; GATTI, P.; MUSSET, G.; CASTAÑEDA, R. A.; COLOMBO, D. y CHILLIARD, Y. 2006. Efectos del suministro de aceite de pescado sólo o en combinación con aceite de girasol sobre las concentraciones de ácido linoleico conjugado (CLA) y omega 3 (n-3) en leche de cabra. Rev. Argent. Prod. Anim. 26:71-87.

GAMA, M. A. S.; GARNSWORTHY, P. C.; GRIINARI, J. M.; LEME, P. R.; RODRIGUES, P. H. M.; SOUZA, L. W. O. y LANNA, D. P. D. 2008. Diet-induced milk fat depression: Association with changes in milk fatty acid composition and fluidity of milk fat. Livest. Sci. 115(2-3):319-331.

GÓMEZ-CORTÉS, P.; FRUTOS, P.; MANTECON, A. R.; JUÁREZ, M.; DE LA FUENTE, M. A. y HERVÁS, G. 2008. Milk production, conjugated linoleic acid content, and in vitro ruminal fermentation in response to high levels of soybean oil in dairy ewe diet. J. Dairy Sci. 91(4):1560-1569.

Capítulo 1

47

GRIINARI, J. M.; CORL, B. A.; LACY, S. H.; CHOUINARD, P. Y.; NURMELA, K. V. V. y BAUMAN, D. E. 2000. Conjugated linoleic acid is synthesized endogenously in

lactating dairy cows by 9-Desaturase. J. Nutr. 130(9):2285-2291.

HERVÁS, G.; LUNA, P.; ÁNGEL, R.; ARES, N.; DE LA FUENTE, M. A.; REZ, M. y FRUTOS, P. 2008. Effect of diet supplementation with sunflower oil on milk production, fatty acid profile and ruminal fermentation in lactating dairy ewes. J. Dairy Res. 75(4):399-405.

HOUSEKNECHT, K. L.; HEUVEL, J. P. V.; MOYA-CAMARENA, S. Y.; PORTOCARRERO, C. P.; PECK, L. W.; NICKEL, K. P. y BELURY, M. A. 1998. Dietary conjugated linoleic acid normalizes impaired glucose tolerance in the zucker diabetic fatty fa/fa rat. Biochem. Biophysi. Res. Comm. 244(3):678-682.

HUANG, Y.; SCHOONMAKER, J. P.; BRADFORD, B. J. y BEITZ, D. C. 2008. Response of milk fatty acid composition to dietary supplementation of soy oil, conjugated linoleic acid, or both. J. Dairy Sci. 91(1):260-270.

HUGHES, P. E.; HUNTER, W. J. y TOVE, S. B. 1982. Biohydrogenation of unsaturated fatty acids. Purification and properties of cis-9,trans-11-octadecadienoate reductase. J. Biol. Chem. 257(7):3643-3649.

HUTCHINSON, I. A.; HENNESSY, A. A.; DEWHURST, R. J.; EVANS, A. C. O.; LONERGAN, P. y BUTLER, S. T. 2012. The effect of strategic supplementation with trans-10,cis-12 conjugated linoleic acid on the milk production, estrous cycle characteristics, and reproductive performance of lactating dairy cattle. J. Dairy Sci.

95(5):2442-2451.

HUTCHINSON, I.; DE VETH, M. J.; STANTON, C.; DEWHURST, R. J.; LONERGAN, P.; EVANS, A. C. O. y BUTLER, S. T. 2011. Effects of lipid-encapsulated conjugated linoleic acid supplementation on milk production, bioenergetic status and indicators of reproductive performance in lactating dairy cows. J. Dairy Res.

78(03):308-317.

IP, C.; BANNI, S.; ANGIONI, E.; CARTA, G.; MCGINLEY, J.; THOMPSON, H. J.; BARBANO, D. y BAUMAN, D. 1999. Conjugated linoleic acid-enriched butter fat alters mammary gland morphogenesis and reduces cancer risk in rats. J. Nutr.

129(12):2135-2142.

IP, C.; BRIGGS, S. P.; HAEGELE, A. D.; THOMPSON, H. J.; STORKSON, J. y SCIMECA, J. A. 1996. The efficacy of conjugated linoleic acid in mammary cancer prevention is independent of the level or type of fat in the diet. Carcinogenesis.

17(5):1045-1050.

JACOBS, A. A. A.; VAN BAAL, J.; SMITS, M. A.; TAWEEL, H. Z. H.; HENDRIKS, W. H.; VAN VUUREN, A. M. y DIJKSTRA, J. 2011. Effects of feeding rapeseed oil, soybean oil, or linseed oil on stearoyl-CoA desaturase expression in the mammary gland of dairy cows. J. Dairy Sci. 94(2):874-887.

JENKINS, T. C.; WALLACE, R. J.; MOATE, P. J. y MOSLEY, E. E. 2008. Board-Invited review: Recent advances in biohydrogenation of unsaturated fatty acids within the rumen microbial ecosystem. J. Anim Sci. 86(2):397-412.

JENSEN, R. G. 2002. The composition of bovine milk lipids: january 1995 to december 2000. J. Dairy Sci. 85(2):295-350.

JUCHEM, S. O.; SANTOS, J. E. P.; CERRI, R. L. A.; CHEBEL, R. C.; GALVO, K. N.;

48



BRUNO, R.; DEPETERS, E. J.; SCOTT, T.; THATCHER, W. W. y LUCHINI, D. 2008. Effect of calcium salts of fish and palm oils on lactational performance of Holstein cows. Anim. Feed Sci. and Technol. 140(1-2):18-38.

KELLY, M. L.; KOLVER, E. S.; BAUMAN, D. E.; VAN AMBURGH, M. E. y MULLER, L. D. 1998. Effect of intake of pasture on concentrations of conjugated linoleic acid in milk of lactating cows. J. Dairy Sci. 81(6):1630-1636.

KEPLER, C. R. y TOVE, S. B. 1967. Biohydrogenation of Unsaturated Fatty Acids. III.

Purification and propierties of linoleate 12-cis,

11-trans-isomerasa from butyrivibrio fibrisolvens. J. Biol. Chem. 242(24):5686-5692.

KHANAL, R. C.; DHIMAN, T. R. y BOMAN, R. L. 2008. Changes in fatty acid composition of milk from lactating dairy cows during transition to and from pasture. Livest. Sci.

114(2-3):164-175.

KHANAL, R. C. y OLSON, K. C. 2004. Factors affecting conjugated linoleic acid (CLA) content in milk, meat and egg- A review. Pak. J. Nutr. 3(2):82-98.

LIN, L.; YING, D.; CHAITEP, S. y VITTAYAPADUNG, S. 2009. Biodiesel production from crude rice bran oil and properties as fuel. App. Energy. 86(5):681-688.

LIU, J.; STIPANOVIC, R. D.; BELL, A. A.; PUCKHABER, L. S. y MAGILL, C. W. 2008. Stereoselective coupling of hemigossypol to form (+)-gossypol in moco cotton is mediated by a dirigent protein. Phytochemistry. 69(18):3038-3042.

LIU, S. J.; WANG, J. Q.; BU, D. P.; WEI, H. Y.; ZHOU, L. Y. y LUO, Q. J. 2007. The effect of dietary vegetable oilseeds supplement on fatty acid profiles in milk fat from lactating dairy cows. Agri. Sci. China. 6(8):1002-1008.

LOCK, A. L.; TELES, B. M.; PERFIELD, J. W., II; BAUMAN, D. E. y SINCLAIR, L. A. 2006. A conjugated linoleic acid supplement containing trans-10, cis-12 reduces milk fat synthesis in lactating sheep. J. Dairy Sci. 89(5):1525-1532.

LOCK, A. L.; TYBURCZY, C.; DWYER, D. A.; HARVATINE, K. J.; DESTAILLATS, F.; MOULOUNGUI, Z.; CANDY, L. y BAUMAN, D. E. 2007. trans-10 octadecenoic acid does not reduce milk fat synthesis in dairy cows. J. Nutr. 137(1):71-76.

LOOR, J. J.; FERLAY, A.; OLLIER, A.; DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 2005. Relationship among trans and conjugated fatty acids and bovine milk fat yield due to dietary concentrate and linseed oil. J. Dairy Sci. 88(2):726-740.

LOURENÇO, M.; DE SMET, S.; RAES, K. y FIEVEZ, V. 2007. Effect of botanical composition of silages on rumen fatty acid metabolism and fatty acid composition in longissimus muscle and subcutaneous fat of lambs. Animal. 1(06):911-921.

LUNDY, F. P.; BLOCK, E.; BRIDGES, W. C., Jr.; BERTRAND, J. A. y JENKINS, T. C. 2004. Ruminal biohydrogenation in holstein cows fed soybean fatty acids as amides or calcium salts. J. Dairy Sci. 87(4):1038-1046.

MEL´UCHOVÁ, B.; BLASKO, J.; KUBINEC, R.; GÓROVÁ, R.; DUBRAVSKÁ, J.; MARGETÍN, M. y SOJÁK, L. 2008. Seasonal variations in fatty acid composition of pasture forage plants and CLA content in ewe milk fat. Small Ruminant Res. 78(1-

3):56-65.

MOATE, P. J.; BOSTON, R. C.; JENKINS, T. C. y LEAN, I. J. 2008. Kinetics of ruminal lipolysis of triacylglycerol and biohydrogenation of long-chain fatty acids: New insights from old data. J. Dairy Sci. 91(2):731-742.

Capítulo 1

49

MOSLEY, E. E.; POWELL, G. L.; RILEY, M. B. y JENKINS, T. C. 2002. Microbial biohydrogenation of oleic acid to trans isomers in vitro. J. Lipid Res. 43(2):290-

296.

MOYA-CAMARENA, S. Y.; HEUVEL, J. P. V.; BLANCHARD, S. G.; LEESNITZER, L. A. y BELURY, M. A. 1999. Conjugated linoleic acid is a potent naturally occurring

ligand and activator of PPAR. J. Lipid Res. 40(8):1426-1433.

MUNDAY, J. S.; THOMPSON, K. G. y JAMES, K. A. C. 1999. Dietary conjugated linoleic acids promote fatty streak formation in the C57BL/6 mouse atherosclerosis model. Br. J. Nutr. 81(03):251-255.

NONI, I. D. y BATTELLI, G. 2008. Terpenes and fatty acid profiles of milk fat and "Bitto" cheese as affected by transhumance of cows on different mountain pastures. Food Chem. 109(2):299-309.

NRC. 1996. Carcinogens and anticarcinogens in the human diet. National Academy Press, Washington DC.

ODONGO, N. E.; OR-RASHID, M. M.; BAGG, R.; VESSIE, G.; DICK, P.; KEBREAB, E.; FRANCE, J. y MCBRIDE, B. W. 2007. Long-effects of feeding monensin on milk fatty acid composition in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 90(11):5126-5133.

OR-RASHID, M. M.; KRAMER, J. K. G.; WOOD, M. A. y MCBRIDE, B. W. 2008. Supplemental algal meal alters the ruminal trans-18:1 fatty acid and conjugated linoleic acid composition in cattle. J. Anim Sci. 86(1):187-196.

PARADIS, C.; BERTHIAUME, R.; LAFRENIERE, C.; GERVAIS, R. y CHOUINARD, P. Y. 2008. Conjugated linoleic acid content in adipose tissue of calves suckling beef cows on pasture and supplemented with raw or extruded soybeans. J. Anim Sci.

86(7):1624-1636.

PARIZA, M. W.; ASHOOR, S. H.; CHU, F. S. y LUND, D. B. 1979. Effects of temperature and time on mutagen formation in pan-fried hamburger. Cancer Letters. 7(2-3):63-

69.

PARK, H. S.; RYU, J. H.; HA, Y. L. y PARK, J. H. Y. 2001. Dietary conjugated linoleic acid (CLA) induces apoptosis of colonic mucosa in 1,2-dimethylhydrazine-treated rats: a possible mechanism of the anticarcinogenic effect by CLA. Br. J. Nutr.

86(05):549-555.

PETERSON, D. G.; MATITASHVILI, E. A. y BAUMAN, D. E. 2003. Diet-Induced milk fat depression in dairy cows results in increased trans-10, cis-12 CLA in milk fat and

coordinate suppression of mRNA abundance for mammary enzymes involved in milk fat synthesis. J. Nutr. 133(10):3098-3102.

PIPEROVA, L. S.; MOALLEM, U.; TETER, B. B.; SAMPUGNA, J.; YURAWECZ, M. P.; MOREHOUSE, K. M.; LUCHINI, D. y ERDMAN, R. A. 2004. Changes in milk fat in response to dietary supplementation with calcium salts of trans-18:1 or conjugated linoleic fatty acids in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 87(11):3836-3844.

PIPEROVA, L. S.; TETER, B. B.; BRUCKENTAL, I.; SAMPUGNA, J.; MILLS, S. E.; YURAWECZ, M. P.; FRITSCHE, J.; KU, K. y ERDMAN, R. A. 2000. Mammary lipogenic enzyme activity, trans fatty acids and conjugated linoleic acids are altered in lactating dairy cows fed a milk fat-depressing diet. J. Nutr. 130(10):2568-

2574.

REGO, O. A.; REGALO, S. M. M.; ROSA, H. J. D.; ALVES, S. P.; BORBA, A. E. S.;

50



BESSA, R. J. B.; CABRITA, A. R. J. y FONSECA, A. J. M. 2008. Effects of grass silage and soybean meal supplementation on milk production and milk fatty acid profiles of grazing dairy cows. J. Dairy Sci. 91(7):2736-2743.

REGO, O. A.; PORTUGAL, P. V.; SOUSA, M. B.; ROSA, H. J.; VOUZELA, C. M.; BORVA, A. y BESSA, R. J. 2004. Effects of diet on the fatty acid patttern of milk from dairy cows. Anim. Res. 53(3):213-220.

RICO, J. E.; MORENO, B.; PABÓN, M. L. y CARULLA, J. E. 2007. Composición de la grasa láctea en la sabana de Bogotá con énfasis en ácido ruménico -CLA cis-9, trans-11. Rev. Col. Cien. Pec. 20(1):30-39.

ROJAS, C. I.; PABÓN, M. L. y CARULLA, J. E. 2005. Ácido linolénico conjugado (ALC): Factores dietarios que afectan su contenido en la leche. pp. 91-110 En:M. L. PABÓN y J. OSSA LONDOÑO(ed.). (ed.).Bioquímica, nutrición y alimentación de la vaca. Medellín.

SANHUEZA, C.; NIETO, K. y VALENZUELA, B. 2002. Ácido linoleico conjugado: un ácido graso con isometría trans potencialmente beneficioso. Rev. Chil. Nutr.

29:98-105.

SCHROEDER, G. F.; DELAHOY, J. E.; VIDAURRETA, I.; BARGO, F.; GAGLIOSTRO, G. A. y MULLER, L. D. 2003. Milk fatty acid composition of cows fed a total mixed ration or pasture plus concentrates replacing corn with fat. J. Dairy Sci.

86(10):3237-3248.

SCHROEDER, G. F.; GAGLIOSTRO, G. A.; BARGO, F.; DELAHOY, J. E. y MULLER, L. D. 2004. Effects of fat supplementation on milk production and composition by dairy cows on pasture: a review. Livest. Prod. Sci. 86(1-3):1-18.

SOYEURT, H.; DEHARENG, F.; MAYERES, P.; BERTOZZI, C. y GENGLER, N. 2008.

Variation of 9-desaturase activity in dairy cattle. J. Dairy Sci. 91(8):3211-3224.

TSIPLAKOU, E.; KOMINAKIS, A. y ZERVAS, G. 2008. The interaction between breed and diet on CLA and fatty acids content of milk fat of four sheep breeds kept indoors or at grass. Small Ruminant Res. 74(1-3):179-187.

UEDA, K.; FERLAY, A.; CHABROT, J.; LOOR, J. J.; CHILLIARD, Y. y DOREAU, M. 2003. Effect of linseed oil supplementation on ruminal digestion in dairy cows fed diets with different forage:concentrate ratios. J. Dairy Sci. 86(12):3999-4007.

VANHATALO, A.; KUOPPALA, K.; TOIVONEN, V.; SHIOHARA, T. y SHINGFIELD, K. J. 2007. Effects of forage species and stage of maturity on bovine fatty acid composition. Eur. J. Sci. Technol. 109:856-867.

VÁRADYOVÁ, Z.; KIŠIDAYOVÁ, S.; SIROKA, P. y JALC, D. 2008. Comparison of fatty acid composition of bacterial and protozoal fractions in rumen fluid of sheep fed diet supplemented with sunflower, rapeseed and linseed oils. Anim. Feed Sci. and Technol. 144(1-2):44-54.

VASTA, V.; NUDDA, A.; CANNAS, A.; LANZA, M. y PRIOLO, A. 2008. Alternative feed resources and their effects on the quality of meat and milk from small ruminants. Anim. Feed Sci. and Technol. 147(1-3):223-246.

VIBART, R. E.; FELLNER, V.; BURNS, J. C.; HUNTINGTON, G. B. y GREEN, J. T. 2008. Performance of lactating dairy cows fed varying levels of total mixed ration and pasture. J. Dairy Res. 75(4):471-480.

Capítulo 1

51

VLAEMINCK, B.; MENGISTU, G.; FIEVEZ, V.; DE JONGE, L. y DIJKSTRA, J. 2008. Effect of in vitro docosahexaenoic acid supplementation to marine algae-adapted

and unadapted rumen inoculum on the biohydrogenation of unsaturated fatty acids in freeze-dried grass. J. Dairy Sci. 91(3):1122-1132.

VOET, D. y VOET, J. G. 1990. Biochemsitry., New York.

WANG, J. H.; ZHU, B. W.; SONG, M. K. y CHOI, Y. J. 2005. Effect of monensin, fish oil or their combination on in vitro fermentation and conjugated linoleic acid (CLA) production by ruminal bacteria. Anim. Feed Sci. and Technol. 120(3-4):341-349.

WARNTJES, J. L.; ROBINSON, P. H.; GALO, E.; DEPETERS, E. J. y HOWES, D. 2008. Effects of feeding supplemental palmitic acid (C16:0) on performance and milk fatty acid profile of lactating dairy cows under summer heat. Anim. Feed Sci. and Technol. 140(3-4):241-257.

WARREN, B. E. y FARRELL, D. J. 1990. The nutritive value of full-fat and defatted Australian rice bran. I. Chemical composition. Anim. Feed Sci. and Technol. 27(3):219-228.

WEISBJERG, M. R.; WIKING, L.; KRISTENSEN, N. B. y LUND, P. 2008. Effects of supplemental dietary fatty acids on milk yield and fatty acid composition in high and medium yielding cows. J. Dairy Res. 75(02):142-152.

WILKS, D. L.; COPPOCK, C. E.; BROOKS, K. N. y GATES, C. E. 1991. Effects of differences in starch content of diets with whole cottonseed or rice bran on milk casein. J. Dairy Sci. 74(4):1314-1320.

YU, Y.; CORRELL, P. H. y VANDEN HEUVEL, J. P. 2002. Conjugated linoleic acid decreases production of pro-inflammatory products in macrophages: evidence for

a PPARdependent mechanism. Biochim. Biophys. Acta (BBA) - Molecular and Cell Biology of Lipids. 1581(3):89-99.

ZHANG, W. J.; XU, Z. R.; PAN, X. L.; YAN, X. H. y WANG, Y. b. 2007. Advances in gossypol toxicity and processing effects of whole cottonseed in dairy cows feeding. Livest. Sci. 111(1-2):1-9.

.

52



Capítulo 2

53

2. Capítulo 2: Efecto de la suplementación con harina de arroz o semilla de algodón sobre el contenido de los ácidos transvaccénico (C18:1t11) y ruménico (C18:2c9,t11) en la leche de vacas en pastoreo





4 Profesor Titular. Departamento de Producción Animal. Facultad de Medicina Veterinaria

y de Zootecnia. Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá. E-mail:

[email protected]

Resumen

Con el fin de determinar el efecto de suplementar con harina de arroz (HA) o semilla de

algodón (SA) sobre el contenido de los ácidos grasos transvaccénico (TVa, C18:1t11) y

ruménico (Ru, C18:2c9,t11) en la grasa láctea de vacas lecheras que pastan en P.

clandestinum se evaluaron tres suplementos: un control (C) con baja concentración de

ácido linoleico (Li) y otros con HA o SA como la principal fuente de Li (1.59, 2.91 y 3.69 g

de Li/100 g de MS para los tratamientos C, HA y SA respectivamente); se utilizaron seis

vacas Holstein (4.2 ± 1.7 años de edad, 533 ± 51 Kg de peso vivo, 125 ± 29 d de

lactancia y una producción láctea de 21.7 ± 5.8 Kg/d; valor medio ± DE) que fueron

distribuidas a una réplica de un diseño Cuadrado Latino 3 x 3 doble (3 vacas x 3 periodos

x 3 tratamientos x 2 cuadrados). Cada periodo tuvo una duración de 28 d (20 d de

acostumbramiento a las dietas experimentales y 8 d para la recolección de muestras), los

54



animales fueron ordeñados dos veces al día (05:00 y 14:00 h), permanecieron con agua

a voluntad, pastorearon en P. clandestinum y recibieron durante cada ordeño 60 g de sal

mineralizada, 3 Kg de suplemento según el tratamiento y 5 g de Cr2O3. Con la HA se

produjo grasa láctea con mayor concentración de TVa (3.11 %; p<0.01), Ru (1.41 %;

p<0.05) y de ácidos grasos insaturados (34.9 %; p<0.01), se presentó un mayor índice

calculado de actividad de la Δ9desaturasa (0.37; p<0.01) y menores índices de

aterogenicidad (1.85; p<0.05) y trombogenicidad (3.09; p<0.01). Cuando las vacas

recibieron SA no se afectaron las concentraciones de TVa y Ru en la grasa láctea, ni los

índices de aterogenicidad, de trombogenicidad y de actividad de la Δ9desaturasa, pero

se obtuvieron menores índices Ru / TVa (0.39; p<0.01) y C14:1 / C14:0 (0.08; p<0.05).

Suplementar vacas lecheras que pastan P. clandestinum con HA es una buena

alternativa para producir leche con beneficios para la salud humana a diferencia de la

SA.

Palabras Clave: ácido linoleico, ácido linoleico conjugado, ácidos grasos lácteos, vaca lechera.

Abstract

To determine the effect of dietary supplementation with rice bran (RB) or cottonseed (CS)

on transvaccenic (TVa, C18:1t11) and rumenic (Ru, C18:2c9,t11) fatty acids content in

milk fat from dairy cows grazing on P. clandestinum three supplements were evaluated: a

control (C) with low concentration of Li and others with RB or CS as the main source of Li

(1.59, 2.91 and 3.69 g of Li / 100 g DM for treatments C, RB and CS respectively); we

used six Holstein (4.2 ± 1.7 years of age, 533 ± 51 Kg of body weight, 125 ± 29 d in milk

and milk production of 21.7 ± 5.8 Kg / d, average ± SD) cows distributed to one replica of

a double Latin Square design 3 x 3 (3 cows x 3 periods x 3 treatments x 2 squares).

Periods of 28 d were used (20 d of adaptation to the experimental diets and 8 d for

collection samples); animals were milked twice a day (05:00 and 14:00 h), water ad

libitum, grazed on P. clandestinum and received during each milking 60 g of mineralized

salt, 3 Kg of concentrate according to the treatment and 5 g of Cr2O3. With the RB

produced more TVa (3.11 %; p<0.01), Ru (1.41 %; p<0.05) and unsaturated fatty acids

(34.9 %; p<0.01) milk fat concentration, higher Δ9desaturase activity index (0.37; p<0.01)

and lower atherogenicity (1.85; p<0.05) and thrombogenicity (3.09; p<0.01) indexes.

When cows received CS the TVa and the Ru milk fat concentration were not affected,

Capítulo 2

55

also for atherogenicity, thrombogenicity and Δ9desaturase activity indexes, but milk fat

had lower rates Ru / TVa (0.39; p<0.01) and C14:1 / C14:0 (0.08; p<0.05). Supplementing

dairy cows grazing P. clandestinum with HA is a good alternative to produce milk with

human health benefits in contrast to SA.


Abreviaturas.

AG: ácido graso. Li: ácido linoleico. Ln: ácido linolénico. Ru: ácido ruménico. TVa:

ácido trans-vaccénico. C: tratamiento control. CNFn: carbohidratos no fibrosos corregidos

por N. ENL: energía neta de lactancia. FDAi: fibra detergente ácido indigerible. FDAn:

fibra detergente ácida corregida por N. FDNn: fibra detergente neutro corregida por N.

HA: tratamiento harina de arroz. MS: materia seca. SA: tratamiento semilla de algodón.

2.1 Introducción

Los ácidos grasos (AG) transvaccénico (TVa, C18:1t11) y ruménico (Ru, C18:2c9,t11) se

encuentran en la grasa láctea y se consideran como compuestos funcionales por tener

propiedades anticarcinogénicas (Ip et al., 1999; Park et al., 2001), antiaterogénicas,

antidiabetogénicas (Houseknecht et al., 1998; Munday et al., 1999), antiobesidad (Khanal

y Olson, 2004), regulación del sistema inmune (Moya-Camarena et al., 1999; Jensen,

2002) y mejoramiento de la mineralización del hueso (Jensen, 2002).

La dieta es el mayor determinante de la concentración láctea de Ru (Khanal y Olson,

2004). La suplementación con fuentes lipídicas de AG insaturados (Dhiman et al., 2000;

Khanal y Olson, 2004), las características de los forrajes (Mel´uchová et al., 2008; Vasta

et al., 2008), la relación concentrado : forraje (Ueda et al., 2003; Loor et al., 2005b), el

sistema de alimentación ya sea pastoreo o dietas totalmente mezcladas (TMR por sus

siglas en inglés; Kelly et al., 1998; Schroeder et al., 2003; Khanal et al., 2008) y el

suministro de antibióticos (Odongo et al., 2007; AlZahal et al., 2008) son factores

relacionados con la dieta que afectan la concentración de TVa y Ru en leche.

Adicionalmente, el pH ruminal, el tipo de lípidos ingeridos y el tipo de bacterias presentes

en el rumen afectan la biohidrogenación o limitan la conversión de TVa a ácido esteárico

(Chilliard et al., 2000; Tsiplakou et al., 2008).

56



La concentración de TVa y Ru se incrementa en la leche cuando se suministran

suplementos ricos en AG insaturados (Dhiman et al., 2000). Se han evaluado diferentes

fuentes lipídicas, entre las cuales se resaltan la soya (Huang et al., 2008; Bouattour et al.,

2008), la linaza (Loor et al., 2005a; Flowers et al., 2008), el girasol (AbuGhazaleh et al.,

2007; Hervás et al., 2008), el maíz (Dewhurst et al., 2006; Bharathan et al., 2008) y el

aceite de pescado (AbuGhazaleh et al., 2003; AbuGhazaleh et al., 2004). El efecto es

diferente según el tipo de fuente lipídica, aquellas con elevado contenido de ácido

linoleico (Li) son más eficientes en producir incremento en la concentración de TVa y Ru

que las ricas en Ln (Bu et al., 2007).

La harina de arroz y la semilla de algodón se utilizan frecuentemente en la elaboración de

suplementos alimenticios para vacas lecheras en Colombia y son fuente de AG

insaturados (Dhiman et al., 1999; Lin et al., 2009). La elevada concentración de Li en la

grasa de estos dos recursos, 36 - 42 % para la harina de arroz (de Campos et al., 2007) y

57.3 % para la semilla de algodón (Dhiman et al., 1999; Khanal y Olson, 2004), son

cualidades que podrían ser aprovechadas para producir leche con altos niveles de TVa y

Ru. En la revisión de literatura no se encontraron estudios donde se hayan evaluado

estos dos recursos como suplemento alimenticio de vacas lecheras en pastoreo con el fin

de mejorar el perfil lipídico de la leche.

La producción de leche en el trópico alto colombiano se fundamenta en sistemas

pastoriles, en donde el kikuyo (Pennisetum clandestinum) es la gramínea predominante

(Correa et al., 2008) con una concentración de Ln en la grasa entre el 53.0 al 59.5 %

(Aguilar et al., 2009). El pastoreo en P. clandestinum, sumado al aporte de lípidos del

suplemento (cerca del 67 %), son características de la ganadería de leche especializada

en la Sabana de Bogotá que sugieren que este sistema tiene alto potencial para producir

leches ricas en TVa y Ru. El objetivo de este experimento fue determinar el efecto de

suplementar harina de arroz o semilla de algodón como principales fuentes de Li sobre el

contenido de TVa y Ru en la leche de vacas que pastan P. clandestinum.

2.2 Materiales y Métodos

2.2.1 Localización

El experimento se realizó en el Centro de Investigación Agropecuario Marengo de la

Capítulo 2

57

Universidad Nacional de Colombia; localizado a 4° 40’ 89’’ de latitud norte y 74° 13’ 13’’

de longitud oeste y a una altitud de 2540 msnm. La temperatura promedio es de 13 °C

(con variaciones de 0 a 20 ºC), la humedad relativa oscila entre el 80 al 85 % y la

precipitación promedio anual es 900 mm / año con dos épocas marcadas de invierno

(abril - mayo y septiembre - noviembre). El experimento fue desarrollado entre mayo y

julio de 2009.

2.2.2 Periodo experimental y tratamientos

El experimento tuvo una duración de 84 d, divididos en tres periodos de 28 d (20 d de

acostumbramiento a las dietas experimentales y 8 d para la recolección de muestras).

Los tratamientos consistieron en tres suplementos suministrados a vacas pastando P.

clandestinum: un control (C) con baja concentración de Li y otros con harina de arroz

(HA) o semilla de algodón (SA) como la principal fuente de Li (1.59, 2.91 y 3.69 g de Li /

100 g de MS para los tratamientos C, HA y SA respectivamente). Se suministraron 6 Kg

de suplemento al día, repartidos durante los dos ordeños (05:00 y 14:00 h). Las dietas

eran isoenergéticas pero contenían diferente concentración de proteína cruda. Los

ingredientes, la composición química y el perfil de AG de los suplementos se pueden

apreciar en las Tablas 2-1 y 2-2.

58



Tabla 2-1: Composición de ingredientes y nutrientes de los suplementos alimenticios utilizados

en el experimento

Ítem Suplemento

Control Harina de Arroz Semilla de Algodón

Ingrediente, % Harina de arroz - 47.2 - Semilla de algodón - - 28.0 Aceite de palma 8.0 1.0 4.8 Torta de soya 28.7 23.7 21.3 Harina de yuca 30.0 9.6 30.6 Salvado de trigo 0.2 0.2 0.3 Palmiste (solvente) 5.1 12.9 - Cascarilla de cacao 22.6 - 9.5 Melaza de caña 5.0 5.0 5.0 Premezcla de vitaminas y minerales 0.5 0.5 0.5

Composición química Materia seca (MS), % 89.4 88.1 89.7 Proteína cruda, % MS 15.9 18.4 21.9 Fibra detergente neutro

1, % MS 22.6 24.8 20.8

Fibra detergente ácido1, % MS 20.3 14.9 18.9

Lignina, % MS 9.9 9.1 9.7 Carbohidratos no fibrosos

1, % MS 40.8 38.0 38.1

Extracto etéreo, % MS 11.6 10.3 11.4 Cenizas, % MS 9.1 8.6 7.9 ENL1X

2, Mcal / Kg MS 2.0 1.9 2.1

Ácido linoleico, % MS 1.59 2.91 3.69 1Corregidos por N (NRC, 2001).

2Energía neta de lactancia a 1X el consumo de mantenimiento

(NRC, 2001).

Tabla 2-2: Perfil de ácidos grasos (AG) de los suplementos alimenticios y del forraje utilizado en

el experimento

AG, g/100 g AG Suplemento

Forraje Control Harina de Arroz Semilla de Algodón

C10:0 0.20 - 0.03 - C12:0 1.85 0.85 0.60 2.78 C14:0 1.66 0.71 0.75 0.94 C14:1 0.04 - - - C15:0 0.09 - - - C16:0 32.29 22.59 24.54 24.39 C16:1 0.39 0.16 0.30 1.97 C17:1 0.04 - - - C18:0 7.57 2.83 5.04 6.88 C18:1t9 0.12 - - - C18:1c9 38.24 38.25 31.82 2.91 C18:1c11 0.50 0.55 0.51 - C18:2c9,c12 14.42 30.27 34.28 10.55 C18:3c 9,c12,c15 0.81 1.33 1.00 36.88 Otros 1.78 2.44 1.50 4.25

2.2.3 Animales y manejo

Todos los procesos y procedimientos del experimento fueron aprobados por el Comité de

Bioética de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad

Capítulo 2

59

Nacional de Colombia sede Bogotá (Acta 001 de 2009). Se utilizaron 6 vacas Holstein

(4.2 ± 1.7 años de edad, 533 ± 51 Kg de peso vivo, 125 ± 29 d de lactancia y una

producción láctea de 21.7 ± 5.8 Kg/d; valor medio ± DE) que fueron asignadas según la

edad, el peso, los días de lactancia y la producción de leche a una réplica de un diseño

Cuadrado Latino doble (3 vacas x 3 periodos x 3 tratamientos x 2 cuadrados). Las vacas

fueron ordeñadas dos veces al día (05:00 y 14:00 h) utilizando un sistema de ordeño

mecánico. Los animales permanecieron con agua a voluntad y recibieron durante cada

ordeño 60 g de sal mineralizada, 3 Kg de suplemento según el tratamiento y 5 g de Cr2O3

para calcular el consumo de forraje.

Antes de iniciar el experimento (50 d) se cortó la pradera y pasados 5 d se realizó

fertilización nitrogenada (46 Kg de N / Ha). Durante el experimento los animales pastaron

en un lote 2.5 Ha de P. clandestinum bajo un sistema de pastoreo en franjas utilizando

cerca eléctrica donde se corrió la cuerda dos veces al día (a.m. y p.m.). Para establecer

la masa forrajera, se determinó la proporción de la pastura con producciones de forraje

baja, media o alta de acuerdo con su altura; luego se cortaron 3 cuadrantes de 0.5 m2

representativos de cada altura y los pesos obtenidos fueron utilizados para determinar el

promedio de cada nivel de producción bajo, medio o alto; dichos promedios se

multiplicaron por la proporción de cada nivel en la pastura con el fin de estimar la

biomasa total disponible. Se utilizó un equipo de geo-posicionamiento GPSMAP® 76CSx

(Garmin Ltda., Kansas, EUA) para la medición de las áreas de pastoreo que se ajustaron

con el fin de garantizar una oferta diaria de 4 Kg de materia seca (MS) por cada 100 Kg

de peso vivo.

2.2.4 Mediciones, toma de muestras y análisis de laboratorio

Mediciones. Se pesaron los animales (día 28 de cada periodo) antes de recibir el

alimento (05:00 h) y se realizó evaluación de la condición corporal según Edmonson et al.

(1989).

Recolección de muestras.

Leche. Se pesó la producción láctea en cada ordeño (a.m. y p.m.) entre los días 21 y

28 de cada periodo. Se colectaron muestras de leche en cada ordeño de los días 21 y

28, que inmediatamente después del ordeño de la tarde se mezclaron de manera

60



proporcional a la producción del día hasta completar 200 mL de leche, que se

dividieron en dos alícuotas de 100 mL. A una alícuota se le adicionó 1 mL de solución

de dicromato de potasio al 6 % y se conservó a - 20°C. La otra alícuota fue remitida

inmediatamente al laboratorio para la evaluación de la grasa.

Forraje. Los días 20 y 27 de cada periodo y previo al pastoreo se recolectaron

muestras de forraje (aprox. 500 g) utilizando el sistema “hand plucking” (Cook, 1964;

Muir, 2002). Las muestras se empacaron al vacío en bolsas plásticas y se

conservaron a - 20°C, posteriormente fueron secadas en un liofilizador (Martin Christ®

Alpha 14LD Plus), molidas con un molino Romer® con criba de 1 mm.

Adicionalmente, se tomaron muestras los días 13, 16, 19, 22, 25 y 28, se secaron a 60

°C por 48 h, se molieron utilizando un molino Romer® con criba de 1 mm y se

mezclaron homogéneamente para formar una muestra compuesta que fue utilizada

para determinar el contenido de fibra detergente ácido indigerible (FDAi).

Suplementos. El día 24 de cada periodo se colectó una muestra de cada suplemento

(aprox. 500 g), se molió utilizando un molino Romer® con criba de 1 mm. Se recolectó

el desperdicio de suplemento entre el día 21 y 28, se empacó en bolsas plásticas y se

conservó a 8 °C hasta ser pesado y enviado al laboratorio para determinar la

humedad.

Fluido ruminal. Se colectó fluido ruminal (aprox. 350 mL) a las 16:30 h del día 25 de

cada periodo utilizando una sonda ororuminal (Haumptner®); los primeros 250 mL

fueron eliminados y los 100 mL restantes fueron filtrados a través de dos capas de

gasa. Una alícuota de 70 mL fue utilizada para medir inmediatamente el pH con un

potenciómetro (Beckman®) y a una segunda alícuota de 30 mL se le adicionaron 3 mL

de ácido clorhídrico 6 N (Huang et al., 2009), se congeló a – 20 °C y posteriormente

fue utilizada para determinar amonio según adaptación al método Kjeldahl (Thiex

et al., 2002).

Heces. Se recolectaron dos muestras diarias (05:00 y 13:00 h) de heces entre los días

22 y 27. Las muestras se empacaron en bolsas plásticas y se conservaron a – 20 °C,

posteriormente fueron secadas a 60 °C por 48 h, molidas utilizando un molino Romer®

con criba de 1 mm y mezcladas homogéneamente para formar una muestra

compuesta de heces por animal.

Extracción de grasa y metilación

Capítulo 2

61

Leche. La extracción se realizó a través de modificaciones a las técnicas de

separación mecánica descritas por Hurley et al. (1987) y Díaz-González et al. (2002).

Se centrifugaron 100 mL de leche (15 min a 3000 rpm) y se retiró la fracción acuosa;

el sobrenadante cremoso se mezcló con 15 mL de solución detergente (50 g de

hexametafosfato de sodio y 24 mL de Tritón X100 disueltos en 1 L de agua), se agitó,

se colocó en baño de María (10 min a 90 °C), nuevamente se agitó y se puso en baño

de María (10 min a 90 °C); la grasa de la capa superficial se retiró cuidadosamente

con una micropipeta y se almacenó a – 20 °C. La metilación se hizo adaptando lo

propuesto por McCreary et al. (1978). Se recolectaron 100 µL de grasa y se

solubilizaron en 1000 µL de clorformo : mentanol (1 : 1 v/v). Una alícuota de 20 µL de

la solución de lípidos fue introducida en un vial con insertos cónicos, derivatizada con

20 µL del reactivo de metil esterificiación MethPrep II® (0.2 M

mtrifluorometilfeniltrimetilamonio hidróxido en metanol, Alltech Associates Inc.,

Deerfield, IL, USA) y 160 µL de cloroformo metanol 1 : 1 (v/v).

Suplemento. La extracción se realizó según Folch et al. (1957) y para la metilación de

los AG se utilizó el mismo proceso descrito para la grasa láctea.

Forraje. La extracción y metilación de los AG se realizó adaptando las técnicas

descritas por Garces y Mancha (1993) y por Yamasaki et al. (1999). Al forraje (50 mg)

se le adicionaron 2150 µL de metanol absoluto, 990 µL de tolueno, 66 µL de ácido

sulfúrico al 99.9 %, 1000 µL de N,Ndimetilformamida y 2 mL de nhexano; la mezcla

se colocó en un baño de María (2 h a 80°C), se dejó en reposo (5 - 10 min), se agitó y

se recuperó el sobrenadante. El nhexano del sobrenadante se evaporó mediante

corriente de N. Al residuo se le adicionaron 300 μL de diclorometano.

Cuantificación de AG (leche, forraje y suplementos). Los ésteres de AG metilados

(FAMES por sus iniciales en inglés) de la grasa de la leche, del forraje y de los

suplementos fueron cuantificados por cromatografía de gases, utilizando un cromatógrafo

de gases marca Shimadzu® modelo GC2014 con auto inyector AOC20i y auto

muestreador AOC20C. Los FAMES fueron separados en columna capilar (Rt 2560; 100

m x 0.25 mm di x 0.2 µm espesor de la capa; Restek®). Las temperaturas del inyector y

del FID fueron 260 °C y 270 °C respectivamente. El programa de temperatura fue: 140 °C

por 5 min, se incrementó 4 °C / min hasta 190 °C y se mantuvo por 32.5 min. El Split ratio

fue de 1 : 100 y el He fue el gas de arrastre con una presión de 40.4 psi. Los tiempos de

retención fueron comparados con estándares conocidos (Food Industry FAMEX Mix cat

62



35077).

Análisis químicos

Leche. Se determinó el contenido de sólidos totales y de cenizas por gravimetría

(métodos AOAC925.23 y AOAC945.46 respectivamente; AOAC, 2006), de proteína

cruda por el método Kjeldahl (Thiex et al., 2002) y de grasa láctea por el método

Gerber (método AOAC-2000.18; AOAC, 2006). La lactosa se calculó por diferencia

(lactosa = 100 - grasa - proteína cruda - cenizas) según Lynch et al. (2007).

Forraje, suplementos y desperdicio. Se determinó humedad y cenizas por

gravimetría (métodos AOAC925.23 y AOAC945.46 respectivamente; AOAC, 2006),

proteína cruda por el método Kjeldahl (Thiex et al., 2002), extracto etéreo (método

AOAC-930.39; AOAC, 2006), fibra detergente neutro corregida por N (FDNn), fibra

detergente ácido corregida por N (FDAn; Van Soest et al., 1991; NRC, 2001), lignina

(Van Soest et al., 1991), proteína cruda insoluble en detergente neutro, proteína cruda

insoluble en detergente ácido (Licitra et al., 1996) y FDAi (Sunvold y Cochran, 1991).

Los carbohidratos no fibrosos corregidos por N (CNFn) y la energía neta de lactancia

(ENL) se estimaron según el NRC (2001). Al desperdicio sólo se le determinó la

humedad.

Fluido ruminal. Muestras frescas se usaron para medir el pH con un potenciómetro

(Beckman®) y las muestras congeladas para determinar amonio según adaptación

al método Kjeldahl (Thiex et al., 2002).

Heces. Se determinó la concentración de FDAi (Sunvold y Cochran, 1991) y de Cr por

absorción atómica (Williams et al., 1962) con un espectrofotómetro de absorción

atómica Shimadzu® modelo AA7000.

2.2.5 Cálculos

Consumo de forraje. Para determinar el consumo de forraje se utilizó Cr2O3 como

marcador indigerible externo (Holden et al., 1994) y FDAi como marcador indigerible

interno (Sunvold y Cochran, 1991). La producción de heces (Kg / d) se determinó usando

la ecuación (2-1) ajustando lo propuesto por Holden et al. (1994) teniendo en cuenta la

tasa de recuperación de Cr reportada por Correa et al. (2009).

PH = DME x [MEH]-1

x TR x 1000-1

(2-1)

Capítulo 2

63

Donde: PH es la producción de heces (Kg de MS / d); DME es la dosis del marcador

externo (g de Cr / d); [MEH] es la concentración del marcador externo en las heces (g de

Cr / g de MS de heces); TR es la tasa de recuperación del Cr, que según Correa et al.

(2009) es de 0.794. La concentración de Cr en el Cr2O3 fue 50.9 % en base húmeda.

El consumo de forraje se determinó a través de la ecuación (2-2) según lo descrito por

Aguilar et al. (2009).

CF = (PH x [FDAi]H – CS x [FDAi]S) x [FDAi]F-1

(2-2)

Donde: CF es el consumo de forraje (Kg de MS / d); PH es la producción de heces (Kg de

MS / d); [FDAi]H, [FDAi]S y [FDAi]F son las concentraciones de FDAi en heces,

suplemento y forraje respectivamente (g de FDAi / g de MS de heces, suplemento o

forraje); CS es el consumo de suplemento (Kg de MS / d).

Consumo de AG. Para determinar el consumo de AG se utilizó la ecuación (2-3).

CAG = (CF x [TAG]F x [AG]F) + (CS x [TAG]S x [AG]S) (2-3)

Donde: CAG es el consumo total de cada AG (g de AG / d); CF y CS son los consumos de

forraje y de suplemento respectivamente (g de MS de forraje o suplemento / d); [TAG]F y

[TAG]S son las concentraciones del total de AG en el forraje y en el suplemento

respectivamente (g del total de AG / g de MS de forraje o suplemento); [AG]F y [AG]S son

las concentraciones de cada AG en el total de AG de forraje y del suplemento

respectivamente (g de cada AG / g del total de AG del forraje o del suplemento). El total

de AG se estimó según el contenido de extracto etéreo con la ecuación (2-4) propuesta

por Allen (2000).

TAG = -0.98 + 1.03 x EE (2-4)

Donde: TAG es el porcentaje del total de AG en base seca (g de AG / 100 g de MS) y EE

es el porcentaje de extracto etéreo en base seca (g de EE / 100 g de MS).

Índice de actividad Δ9desaturasa. Se calculó con la ecuación (2-5) según Gagliostro et

al. (2006).

64



IΔ9 = PΔ

9 x (PΔ

9 + SΔ

9)

-1 (2-5)

Donde: IΔ9 es el índice de actividad de la enzima Δ9desaturasa; PΔ9 es la sumatoria de

productos de la Δ9desaturasa (C14:1c9 + C16:1c9 + C18:1c9 + C18:2c9,t11); SΔ9 es la

sumatoria de sustratos de la Δ9desaturasa (C14:0 + C16:0 + C18:0 + C18:1t11).

Índice de aterogenicidad. Se calculó con la ecuación (2-6) según Ulbricht y Southgate

(1991).

IA = (SC12 + 4SC14 + SC16) x AGI-1 (2-6)

Donde: IA es el índice de aterogenicidad; SC12, SC14 y SC16 AG saturados de 12, 14 y 16 C

respectivamente; AGI es la sumatoria de los AG insaturados.

Índice de trombogenicidad. Se calculó con la ecuación (2-7) según Ulbricht y Southgate

(1991).

IT = (SC14 + SC16 + SC18) x [0.5MI + 0.5ω6 + 3ω3 + (ω3/ω6)]-1 (2-7)

Donde: IT es el índice de trombogenicidad; SC14, SC16 y SC18 AG saturados de 14, 16 y

18 C respectivamente; MI sumatoria AG monoinsaturados; ω3 y ω6 AG de la serie

omega 3 y 6 respectivamente.

2.2.6 Análisis estadístico

Los datos fueron analizados estadísticamente como un diseño Cuadrado Latino 3 x 3

doble (Kaps y Lamberson, 2004) de acuerdo con el modelo presentado en la ecuación (2-

8).

yij(k)m = µ + ϒm + η(ϒ)im + λ(ϒ)jm + τ(k) + εij(k)m (2-8)

Donde:

yij(k)m = Valor de la observación del i-ésimo periodo (i = 1, 2, 3), j-ésimo animal (j = 1, 2,

…, 6), k-ésimo tipo de suplemento (k = C, HA, SA) y m-ésimo cuadrado (m = 1,

Capítulo 2

65

2)

µ = Promedio de la población

ϒm = Efecto del m-ésimo cuadrado (m = 1, 2)

η(ϒ)im = Efecto del i-ésimo periodo (i = 1, 2, 3) dentro del m-ésimo cuadrado (m = 1, 2)

λ(ϒ)jm = Efecto del j-ésimo animal (j = 1, 2, 3) dentro del m-ésimo cuadrado (m = 1, 2)

τ(k) = Efecto del k-ésimo tipo de suplemento (k = C, HA, SA)

εij(k)m = Error experimental

Los supuestos fueron probados con la metodología indicada para cada caso. Cuando el

modelo resultó estadísticamente significativo se procedió con un análisis de comparación

de medias usando la prueba Tukey. Para el análisis de los resultados se utilizó el

programa SAS versión 9.0 (Copyright© 2002 by SAS Institute Inc., Cary, NC, USA).

2.3 Resultados

2.3.1 Consumo de alimento

Los consumos de MS, de proteína cruda, FDNn, FDAn, Lignina, CNFn, extracto etéreo y

ENL no se vieron afectados por el tipo de suplemento (Tabla 2-3).

66



Tabla 2-3: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA)

como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el consumo de alimento de vacas lactantes que pastaban P. clandestinum

Fracción del alimento Suplemento

ESM1 RC

2 p

3

Control HA SA

Materia seca Suplemento, Kg/d 5.1 5.1 4.8 0.70 0.51 NS Forraje, Kg/d 11.7 11.6 12.6 1.85 0.83 NS Total

Kg/d 16.8 16.6 17.4 1.94 0.77 NS Kg/100 Kg de PV

4 3.0 3.0 3.1 0.32 0.68 NS

Proteína cruda Suplemento, Kg/d 0.8 0.9 1.0 0.15 0.69 NS Forraje, Kg/d 2.2 2.2 2.4 0.35 0.84 NS Total, Kg/d 3.0 3.1 3.4 0.37 0.80 NS

ENLP5

Suplemento, Mcal/d 9.4 9.3 9.4 1.32 0.52 NS Forraje, Mcal/d 17.3 17.1 18.5 2.62 0.84 NS Total, Mcal/d 26.7 26.4 27.9 2.75 0.77 NS

Fibra detergente neutro6

Suplemento, Kg/d 1.1 1.3 1.0 0.15 0.71 NS Forraje, Kg/d 5.6 5.5 6.0 0.87 0.82 NS Total

Kg/d 6.7 6.8 7.0 0.89 0.79 NS Kg/100 Kg de PV

4 1.2 1.2 1.2 0.15 0.69 NS

Fibra detergente ácido6

Suplemento, Kg/d 1.0 0.8 0.9 0.13 0.76 NS Forraje, Kg/d 3.2 3.1 3.4 0.50 0.80 NS Total, Kg/d 4.2 3.9 4.3 0.51 0.77 NS

Lignina Suplemento, g/d 501 463 463 68.1 0.53 NS Forraje, g/d 286 282 306 44.9 0.82 NS Total, g/d 787 745 769 80.1 0.41 NS

Carbohidratos no fibrosos6

Suplemento, Kg/d 2.1 1.9 1.8 0.27 0.58 NS Forraje, Kg/d 2.2 2.1 2.3 0.34 0.83 NS Total, Kg/d 4.2 4.1 4.1 0.42 0.64 NS

Extracto etéreo Suplemento, g/d 590 522 545 79.9 0.57 NS Forraje, g/d 430 417 459 68.6 0.90 NS Total, g/d 1021 939 1003 97.2 0.74 NS

1Error estándar de la media de los tratamientos.

2R cuadrado.

3Significancia; NS: no significativa;

letras diferentes en la misma fila indican diferencias estadísticas *: p<0.05, **: p<0.01 y ***: p<0.001.

4Peso vivo.

5Energía neta de lactancia corregida al nivel de consumo (NRC, 2001).

6Corregido por N (NRC, 2001).

2.3.2 Consumo de precursores de los ácidos trans-vaccénico y

ruménico

En el experimento, el consumo promedio de lípidos provenientes del suplemento y del

forraje fue 552 y 435 g / d respectivamente; de tal manera que el 55.9 % de los lípidos de

la dieta provenían del suplemento, aunque éste sólo aportó el 29.6 % de la MS. Los

Capítulo 2

67

animales que recibieron el suplemento HA o SA aumentaron casi dos veces el consumo

de Li comparativamente con aquellos que consumieron el suplemento C (113, 179 y 211

g / d para los tratamientos C, HA y SA respectivamente; p<0.01). Este incremento se

debió principalmente a la suplementación ya que los consumos de Li y Ln provenientes

del forraje fueron similares entre tratamientos. Como consecuencia del mayor consumo

de Li en los suplementos HA y SA (148 y 176 g / d respectivamente; p<0.01) se

incrementó el consumo total de precursores de TVa y Ru, en comparación al obtenido

con el suplemento C (235, 300 y 343 g/d para los tratamientos C, HA y SA

respectivamente; p<0.01; Tabla 2-4).


como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el consumo de los ácidos linoleico y linolénico, precursores de los ácidos trans-vaccénico y ruménico en la leche de vacas que pastaban P. clandestinum

Ítem Suplemento

ESM1

RC2 p

3

Control HA SA

Consumo, g/d Linoleico

Suplemento 80b 148

a 176

a 24.6 0.90 **

Forraje 32 32 35 5.3 0.92 NS

Total 113b 179

a 211

a 23.6 0.90 **

Linolénico Suplemento 5 6 5 0.76 0.82 NS

Forraje 118 115 126 19.3 0.92 NS

Total 123 121 132 19.2 0.92 NS

Total precursores4

Suplemento 85b 154

a 181

a 25.3 0.90 **

Forraje 150 146 161 24.6 0.92 NS

Total 235b 300

a 343

a 30.6 0.91 **

Aporte relativo5, %

Linoleico Suplemento 72.2

b 82.5

a 82.6

a 3.74 0.94 **

Forraje 27.8a 17.5

b 17.4

b 3.74 0.94 **

Linolénico Suplemento 4.1

b 5.5

a 4.5

ab 0.73 0.92 *

Forraje 95.9a 94.5

b 95.5

ab 0.73 0.92 *

Total precursores4

Suplemento 32.6b 46.3

a 48.6

a 5.29 0.92 **

Forraje 67.4a 53.7

b 51.4

b 5.29 0.92 **


2R cuadrado.



4Sumatoria de los ácidos grasos linoleico y linolénico.

5g de ácido graso proveniente del

suplemento o del forraje / 100 g de precursores consumidos al día

68



2.3.3 Producción y calidad de la leche

La producción diaria de leche disminuyó cuando las vacas recibieron SA (20.2 Kg / d;

p<0.01) frente a la obtenida con los otros tratamientos. La concentración de sólidos

totales, proteína cruda, cenizas y lactosa en la leche fue similar entre tratamientos. Sin

embargo, las vacas que consumieron SA presentaron mayores concentraciones de grasa

en la leche comparadas con HA (3.6 y 3.2 % respectivamente; p<0.05; Tabla 2-5).

La producción de leche expresada en sólidos totales fue superior para HA en

comparación con SA (2.58 y 2.40 Kg/d respectivamente; p<0.05). La mayor producción

en estos tratamientos se explicó por un aumento en la producción de lactosa y cenizas ya

que las producciones de grasa y proteína fueron similares entre los tratamientos. Las

vacas que consumieron HA produjeron leche con mayores concentraciones de TVa (0.10

%; p<0.01) y Ru (0.05%; p<0.05) lo que se reflejó en una mayor producción diaria de

estos AG (21.8 y 9.8 g/d respectivamente; p<0.01; Tabla 2-5).


como las principales fuentes de ácido linoleico sobre la producción y calidad de la leche de vacas que pastaban P. clandestinum

Ítem Suplemento

ESM1 RC

2 p

3

Control HA SA Leche

Producción, Kg/d 21.2a 22.0

a 20.2

b 0.62 0.99 **

Sólidos totales Concentración, % 12.1 11.8 11.9 0.18 0.97 NS Producción, Kg/d 2.56

ab 2.58

a 2.40

b 0.103 0.96 *

Proteína cruda Concentración, % 2.9 2.8 2.9 0.16 0.95 NS Producción, Kg/d 0.61 0.60 0.58 0.029 0.89 NS

Grasa Concentración , % 3.4

ab 3.2

b 3.6

a 0.15 0.96 *

Producción, Kg/d 0.71 0.70 0.73 0.045 0.94 NS Cenizas

Concentración , % 0.8 0.8 0.7 0.03 0.77 NS Producción, Kg/d 0.16

a 0.17

a 0.15

b 0.008 0.97 *

Lactosa Concentración, % 5.0 5.0 4.7 0.21 0.79 NS Producción, Kg/d 1.07

ab 1.10

a 0.95

b 0.072 0.94 *

Ácido trans-vaccénico Concentración, % 0.08

b 0.10

a 0.09

b 0.007 0.95 **

Producción, g/d 16.9b 21.8

a 18.4

b 1.51 0.95 **

Ácido ruménico Concentración, % 0.04

b 0.05

a 0.04

b 0.004 0.92 *

Producción, g/d 8.0b 9.8

a 7.2

b 0.65 0.94 **


2R cuadrado.


letras diferentes en la misma fila indican diferencias estadísticas *: p<0.05 y **: p<0.01.

Capítulo 2

69

2.3.4 Perfil de ácidos grasos de la grasa láctea

La concentración de los AG C4:0, C6:0, C8:0, C10:0, C11:0, C13:0, C15:0, C17:0,

C18:2c-9,c-12 y C18:3c-9,c-12,c-15 en la grasa láctea fue similar entre tratamientos. La grasa

láctea de las vacas que consumieron HA presentó una mayor concentración de los AG

C12:0 (2.27 %; p<0.01), C14:0 (8.85 %; p<0.01), C18:1c-9, (26.44 %; p<0.01), C18:1t-11

(TVa; 3.11 %; p<0.01;) y C18:2c-9,t-11 (Ru; 1.41 %; p<0.001), mientras la concentración de

C16:0 fue menor (26.35 %; p<0.001). Con HA se incrementó la concentración de C14:1c-9

(0.79 %; p<0.05), C18:1c-11 (0.28 %; p<0.05) y C18:2c-9,t-12 (0.22 %; p<0.01) en

comparación a SA, pero no frente al C. La concentración de C16:1c-9 fue mayor con el

tratamiento C (1.41 %; p<0.01). La concentración de C18:0 fue diferente al comparar los

tres tratamientos, siendo menor para C y mayor para HA (14.05 y 16.31 %

respectivamente; p<0.001; Tabla 2-6).

Cuando las vacas recibieron HA produjeron grasa láctea con mayor cantidad de AG

insaturados y menor de saturados (34.9 y 60.8% respectivamente; p<0.01). Los

tratamientos no afectaron la concentración de AG de cadena corta (<C12), pero sí el

porcentaje de los AG de cadena media (C12-16) y larga (>C16). El porcentaje de AG de

cadena media fue menor para HA y mayor para el C (40.7 y 44.6 % respectivamente;

p<0.001), este último tratamiento presentó un menor porcentaje de AG de cadena larga

(44.9%; p<0.001; Tabla 2-6).

La grasa láctea presentó una menor concentración de AG preformados (>C17) cuando las

vacas fueron alimentadas con el C (44.5%; p<0.001) y mayor concentración de AG de

novo (<C16) cuando recibieron HA (19.8%; p<0.01; Tabla 2-6).

Los índices calculados Ru / TVa (0.39; p<0.01), C14:1 / C14:0 (0.08; p<0.05) y C16:1 /

C16:0 (0.042; p<0.05) fueron menores para la leche de animales que recibieron SA. Con

el tratamiento HA se encontró un mayor índice de actividad de la Δ9-desaturasa (0.37;

p<0.01), una mayor concentración de los productos de esta enzima (31.49%; p<0.01) y

menor de los sustratos (53.31; p<0.001; Tabla 2-6).

El índice de aterogenicidad fue mayor para la grasa láctea de las vacas que

recibieron C (2.03; p<0.05) frente al HA pero no frente a SA. El índice de

trombogenicidad fue menor para HA (3.09; p<0.01; Tabla 2-6).

70



Tabla 2-6: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el perfil de ácidos grasos (AG) de la grasa láctea de vacas que pastaban P. clandestinum

Ítem Suplemento

ESM1 RC

2 p

3

Control HA SA

AG, g/100 g de AG C4:0 2.48 2.46 2.55 0.154 0.91 NS C6:0 1.50 1.53 1.55 0.090 0.94 NS C8:0 0.81 0.85 0.83 0.055 0.95 NS C10:0 1.59 1.71 1.60 0.123 0.95 NS C11:0 0.20 0.20 0.19 0.014 0.97 NS C12:0 1.99

b 2.27

a 1.87

b 0.139 0.94 **

C13:0 0.10 0.10 0.09 0.013 0.87 NS C14:0 8.07

b 8.85

a 7.99

b 0.298 0.94 **

C14:1c-9 0.72ab

0.79a 0.63

b 0.074 0.94 *

C15:0 1.06 1.08 1.03 0.079 0.81 NS C16:0 31.30

a 26.35

b 29.36

a 0.512 0.99 ***

C16:1c-9 1.41a 1.22

b 1.22

b 0.060 0.95 **

C17:0 0.43 0.44 0.47 0.035 0.73 NS C18:0 14.05

c 15.00

b 16.31

a 0.531 0.96 ***

C18:1c-9 25.09b 26.44

a 25.07

b 0.515 0.98 **

C18:1c-11 0.27ab

0.28a 0.25

b 0.013 0.93 *

C18:1t-11 (trans-vaccénico) 2.38b 3.11

a 2.52

b 0.209 0.90 **

C18:2c-9,c-12 0.96 1.02 1.08 0.085 0.92 NS C18:2c-9,t-11 (ruménico) 1.13

b 1.41

a 0.98

b 0.106 0.93 ***

C18:2c-9,t-12 0.19ab

0.22a 0.17

b 0.018 0.93 **

C18:3c-9,c-12,c-15 0.40 0.37 0.37 0.051 0.85 NS Otros 3.88 4.29 3.89 0.251 0.85 NS

AG según su saturación, g/100 g de AG

AG insaturados 32.5b 34.9

a 32.3

b 0.9 0.96 **

AG saturados 63.6a 60.8

b 63.8

a 0.9 0.96 **

AG según su longitud, g/100 g de AG AG de cadena corta (<C12) 6.6 6.7 6.7 0.4 0.95 NS AG de cadena media (C12-16) 44.6

a 40.7

c 42.2

b 0.7 0.97 ***

AG de cadena larga (>C16) 44.9b 48.3

a 47.2

a 0.7 0.97 ***

AG según su origen, g/100 g de AG De novo (<C16) 18.5

b 19.8

a 18.3

b 0.6 0.96 **

Preformados (>C17) 44.5b 47.9

a 46.7

a 0.7 0.98 ***

Indicadores actividad Δ9-Desaturasa

Índice Ru / ATVa 0.48a 0.46

a 0.39

b 0.03 0.92 **

Índice C14:1 / C14:0 0.09a 0.09

a 0.08

b 0.01 0.97 *

Índice C16:1 / C16:0 0.045a 0.047

a 0.042

b 0.003 0.92 *

Productos de la Δ9-Desaturasa

4 29.90

b 31.49

a 29.52

b 0.74 0.97 **

Sustratos de la Δ9-Desaturasa

5 55.80

a 53.31

b 56.17

a 0.65 0.97 ***

Índice Δ9-Desaturasa

6 0.35

b 0.37

a 0.34

b 0.008 0.97 **

Índice Aterotogénicidad7 2.03

a 1.85

b 1.97

ab 0.08 0.96 *

Índice Trombogenicidad8 3.43

a 3.09

b 3.50

a 0.11 0.97 **


2R cuadrado.



4C14:1c-9 + C16:1c-9 + C18:1c-9 + C18:2c-9,t-11.

5C14:0 + C16:0 + C18:0 + C18:1t-11.

6productos de la Δ

9-desaturasa/(sustratos de la Δ

9-desaturasa + productos de la Δ

9desaturasa)

-1;

Gagliostro et al. (2006). 7(C12:0 + 4C14:0 + C16:0) / AG insaturados; Ulbricht y Southgate (1991).

8 (C14:0 + C16:0 + C18:0) x [0.5 monoinsaturados + 0.5ω-6 + 3ω-3 + (ω-3/ω-6)]

-1; Ulbricht y

Southgate (1991).

Capítulo 2

71

2.3.5 Peso vivo, condición corporal y fluido ruminal

El peso vivo, la condición corporal y el fluido ruminal no se vieron afectados por el tipo de

suplemento (Tabla 2-7).

Tabla 2-7: Efecto del uso de suplementos con harina de arroz (HA) o semilla de algodón (SA) como las principales fuentes de ácido linoleico sobre el peso, la condición corporal y el fluido ruminal de de vacas lactantes que pastan P. clandestinum

Ítem Suplemento

ESM1

RC2 p

3

Control HA SA

Peso vivo, Kg 559 561 562 10.7 0.97 NS Condición corporal 3.5 3.5 3.6 0.17 0.96 NS Fluido ruminal

pH 6.6 6.6 6.9 0.25 0.91 NS N-NH3, mg/dL 13.7 14.5 13.8 1.59 0.88 NS


2R cuadrado.



2.4 Discusión

Este trabajo buscaba comparar dos fuentes tradicionalmente usadas en la

suplementación de vacas lecheras (SA y HA) que contienen cantidades apreciables de Li

sobre el perfil de AG de la leche. La literatura es abundante en señalar que el incremento

del Li en la ración aumenta las concentraciones de Ru y TVa en la leche (Dhiman et al.,

2000; Bu et al., 2007). Se elaboraron dos suplementos con SA o HA, con similares

cantidades de Li y semejante composición nutricional. Se incluyó un control con

concentración similar de lípidos y con un aporte menor de Li. De esta manera se

esperaba documentar el efecto de la fuente del Li (SA o HA) sobre el perfil de AG de la

leche.


No se presentaron diferencias en el consumo de MS asociadas al origen de los lípidos en

el suplemento (HA o SA) o a las concentraciones de Li. Algunos autores han sugerido

que al incrementar la grasa en la dieta se puede disminuir el consumo de MS (Schauff y

Clark, 1992) y que este efecto aumenta con el incremento en la proporción de AG

insaturados en el suplemento (Firkins y Eastridge, 1994; Bremmer et al., 1998) lo cual no

fue observado en nuestro experimento. Concentraciones mayores al 8 ó 9 % de grasa en

la dieta disminuyen el consumo de MS (Palmquist y Jenkins, 1980), mientras que en las

72



revisiones de experimentos con vacas en pastoreo Schroeder et al. (2004) y Bargo et al.

(2003) no encontraron diferencias en el consumo MS al suplementar con grasa. En

nuestro trabajo, la grasa representó el 5.8 % del total de la MS consumida y la grasa

proveniente de los suplementos fue cercano al 3 %. El NRC (2001) recomienda que no

se debe sobrepasar entre 3 a 4 % de grasa en la dieta proveniente del suplemento.

La ausencia de diferencias en los consumos de MS y de nutrientes entre tratamientos

sugiere que los principales efectos que se presentaron en este estudio estarían

principalmente asociados al perfil de AG y al origen de los mismos. Se puede señalar

que el consumo de Li fue cerca del doble en los tratamientos de HA o SA al compararlos

con los del C mientras que los consumos de C16:0 fueron mayores para del C (p < 0.01;

datos no incluidos). Los consumos de HA y SA fueron similares en todos los nutrientes

incluyendo el Li aunque su concentración fue superior para SA. El suplemento aportó 46

y 49 % de los precursores para los tratamientos HA o SA respectivamente, pero sólo el

33 % para el C. La composición de los forrajes puede afectar la concentración de Ru en

la leche (Lourenço et al., 2007) ya que el forraje es una fuente rica en Ln (Mohammed et

al., 2009) y su concentración en los forrajes es directamente proporcional al contenido de

Ru en ésta (Mel´uchová et al., 2008). El consumo de Ln proveniente del forraje no se vio

afectado por la adición de HA o SA por lo tanto las variaciones en TVa y Ru no estarían

relacionadas con el consumo de Ln.


La producción de leche y sólidos totales fue menor para SA. Las diferencias en el aporte

de Li entre los tratamientos no explicaron las diferencias en la producción de leche y los

sólidos totales entre tratamientos ya que el consumo de este AG en SA y HA fue similar

y diferente al control. Las diferencias en la producción de leche han sido asociadas con el

consumo de energía (van Knegsel et al., 2007). En este trabajo, los consumos de energía

digestible estimada con el uso de los marcadores o energía neta por fórmulas (NRC,

2001) no fueron diferentes entre los tratamientos. Sin embargo, la menor producción de

leche en el tratamiento con SA implicaría de alguna manera una menor eficiencia en el

uso de la energía digestible por parte de los animales en este tratamiento.

La semilla de algodón posee factores tóxicos como el gosipol (Zhang et al., 2007), pero

las vacas lecheras son menos susceptibles de manifestar síntomas de intoxicación que

Capítulo 2

73

los no rumiantes (Coppock et al., 1987; Blauwiekel et al., 1997), pues el gosipol se

detoxifica en el rumen (Reiser y Fu, 1962). Sin embargo, se ha evidenciado que parte del

gosipol escapa de la detoxificación (Hawkins et al., 1985; Mena et al., 2004) y puede

afectar la salud o el desempeño animal (Risco et al., 2002). Algunos autores sugieren

que en vacas lecheras se puede usar semilla de algodón hasta niveles del 15 % de la

ración o entre 3 a 4 Kg / vaca / d sin que se presenten efectos negativos (Coppock et al.,

1987; Arieli, 1998; Zhang et al., 2007) como fragilidad osmótica del eritrocito (Risco et al.,

2002), bajas concentraciones de hemoglobina y hematocrito (Velasquez-Pereira et al.,

1999), limitación del sistema antioxidante de la célula (Risco et al., 2002), disminución en

el desempeño reproductivo (Santos et al., 2003; Villaseñor et al., 2008), reducción de la

producción láctea, dificultad respiratoria y hasta la muerte (Lindsey et al., 1980). Aunque

en este trabajo no se determinó el gosipol es probable que los efectos tóxicos de este

compuesto modifiquen la eficiencia del uso de la energía en el animal. El consumo de

semilla de algodón fue de 1.5 Kg / vaca / d (8.6 % de la MS consumida) que fue inferior al

máximo recomendado en la literatura (Coppock et al., 1987; Arieli, 1998; Zhang et al.,

2007). Sin embargo, las concentraciones de gosipol son variables y están asociadas a

las variedades de algodón (Zhang et al., 2007).

Las vacas suplementadas con SA produjeron leche con mayor porcentaje de grasa, pero

debido a la menor producción de leche en este tratamiento, la producción diaria de grasa

no fue diferente a los demás tratamientos. El efecto de la suplementación con semilla de

algodón sobre la concentración y producción de grasa no es consistente (Arieli, 1998).

Algunos trabajos no encuentran efectos sobre la concentración y producción de grasa

láctea (Bitman et al., 1996), mientras que otros señalan un incremento (Belibasakis y

Tsirgogianni, 1995; Harrison et al., 1995) o una disminución (Wilks et al., 1991; Smith et

al., 1993).


El perfil de AG de la grasa láctea se modificó por el mayor consumo de Li en HA pero no

en SA que fue similar al perfil de AG del tratamiento C para la mayoría de AG. Los AG

en la leche que se modificaron debido al consumo de HA fueron el C12:0, C14:0,

C18:1c9, TVa, Ru y C18:2c9,t12 que se encontraron en mayor concentración y el C16:0 en

menor concentración que en los demás tratamientos. Varios trabajos han señalado que la

adición de AG insaturados en forma de semillas enteras tiene un menor impacto sobre la

74



presencia de AG en la leche como el TVa y el Ru que cuando el AG se suministra en una

semilla molida o en forma de aceite no protegido (Dhiman et al., 2000). Esto podría

explicar parcialmente porque se presentaron diferentes concentraciones de AG con HA y

no con SA donde la semilla se proporcionó entera.

Algunos autores han sugerido que la menor concentración de TVa y Ru en la grasa

láctea de vacas consumiendo semillas enteras comparadas con aquellas consumiendo

semillas procesadas se debe a una menor disponibilidad ruminal de los AG insaturados

en las semillas enteras que están protegidos de la biohidrogenación ruminal (Dhiman et

al., 2000; Khanal et al., 2005; Paradis et al., 2008). Esta protección de los AG

insaturados se refleja en una mayor concentración de estos AG en la leche. Sin

embargo, las concentraciones de Li en la grasa láctea fueron iguales para el control y el

SA. Por lo tanto, la menor concentración de TVa, Ru, C18:1c-9, C18:1c-11 y C18:2c-9,t-12 en

la leche para el tratamiento SA en comparación con HA no se podría atribuir a una menor

disponibilidad de los AG en el rumen.

Otra posible explicación es que la biohidrogenación ruminal para el Li en la SA fue mayor

que en HA. Algunos autores han reportado una mayor biohidrogenación para la semilla

de algodón. Pires et al. (1997) encontraron una mayor biohidrogenación del Li a C18:0

cuando se suministra semilla de algodón sin procesar y una menor concentración de

C18:2 en la leche. Harvatine et al. (2002) encontraron un incremento lineal en la

biohidrogenación y flujo de C18:0 hacia el intestino al incrementar la semilla de algodón

de 0 a 15 % en la dieta. Pires et al. (1997) indican que posiblemente se incrementa la

saturación del Li debido a que la semilla de algodón permanece mayor tiempo en el

rumen (tasas de paso más lentas). En nuestro estudio, la mayor concentración de C18:0

en la grasa láctea de vacas que consumieron el suplemento con semillas de algodón

reafirmaría esta teoría. De otra parte, sugeriría que la harina de arroz sería una mejor

alternativa para modificar el perfil de los ácidos grasos hacia TVa y Ru que la semilla de

algodón cuando aportan cantidades similares de Li debido a tasas de paso diferentes

entre estos dos recursos.

Las explicaciones para otras modificaciones en el perfil de la grasa láctea en nuestro

experimento son menos claras. Las mayores concentraciones de C12:0 y C14:0 y

menores de C16:0 en la grasa láctea de animales suplementados con HA al compararlos

Capítulo 2

75

con el C o SA implicarían cambios en la fermentación o en el metabolismo de los lípidos

en el animal para este tratamiento comparativamente con los otros dos. Normalmente los

alimentos y los microorganismos tienen concentraciones muy bajas de C12:0 y C14:0

(AbuGhazaleh et al., 2002), de tal manera que estos AG provienen principalmente de la

síntesis de novo en la glándula mamaria (Garnsworthy et al., 2006), siendo el C14:0 el

principal producto de la misma (Barber et al., 1997). La síntesis de novo es mayor

cuando los animales se encuentran en un mejor balance energético y dependen en

menor grado de las reservas corporales (Palmquist et al., 1993). Bajo estas condiciones,

se esperaría un menor aporte de AG preformados (Garnsworthy et al., 2006) que no fue

el caso de este estudio ya que el suplemento con HA presentó mayores concentraciones

de AG preformados. El aporte similar de energía y producciones de leche entre HA y C

tampoco podría justificar una mayor movilización de tejido en uno o en el otro. El

consumo de C12:0 y C14:0 fue mayor para C en comparación con los otros tratamientos

(p<0.001; datos no incluidos), de tal manera que diferencias en el consumo de C12:0 y

C14:0 no explican la mayor concentración de estos AG con HA. Una variación en la

población microbiana en el rumen podría estar relacionada con la mayor concentración

de C12:0 y C14:0 para HA, pues los lípidos de los microorganismos pueden ser

generados por la síntesis de novo (Schmidely et al., 2008; Váradyová et al., 2008) y

teniendo en cuenta que las bacterias tienen más concentración de estos AG con relación

a los protozoarios (Or-Rashid et al., 2007) es probable que variaciones se debieron a una

disminución en la población de protozoarios.

El C16:0 en la grasa láctea de vacas alimentadas con suplemento que contenía HA fue

menor que SA y C. El C16:0 puede provenir de la dieta, la síntesis de novo, de la

movilización de tejido adiposo o de los microorganismos ruminales (Linzell y Peaker,

1971; Barber et al., 1997). La diferencia con C podría explicarse por un menor consumo

de C16:0 en HA. Sin embargo, la diferencia entre HA y SA no se podría relacionar con

variaciones en el consumo de C16:0, ya que los dos tratamientos presentaron niveles

similares de C16:0 en la dieta. Adicionalmente, C y SA tuvieron concentraciones

similares de C16:0 en la leche. Difícilmente, la menor concentración de C16:0 en HA

podría explicarse por una menor síntesis de novo ya que las concentraciones de C12 y

C14 provenientes de esta ruta metabólica fueron mayores en este tratamiento. Las

menores concentraciones de C16:0 tampoco podrían explicarse por una menor

movilización de lípidos en los tejidos ya que los AG preformados en la grasa láctea

76



también fueron mayores para HA. Una menor concentración de C16:0 en los

microorganismos del rumen podría explicar la disminución de este AG para HA pues el

C16:0 es uno de los AG predominantes en los microorganismos ruminales (Bas et al.,

2003; Or-Rashid et al., 2007; Váradyová et al., 2008) y puede ser producido a través de

la síntesis de novo en el rumen (Williams, 1986). La suplementación con diferentes

aceites produce cambios en la composición de AG del contenido ruminal asociados a

modificaciones en las poblaciones microbianas (Toral et al., 2012). Aproximadamente del

7.5 al 15 % de los lípidos presentes en la digesta ruminal (Or-Rashid et al., 2007) y tres

cuartas partes de los AG presentes en los microorganismos del rumen (Jenkins et al.,

2008) provienen de los protozoarios. Teniendo en cuenta que los protozoarios

representan una fuente importante de lípidos para el animal hospedero (Or-Rashid et al.,

2007) y que poseen mayor concentración de C16:0 que la bacterias (Or-Rashid et al.,

2007; Váradyová et al., 2008) es probable que la suplementación con HA produjera una

disminución de los protozoarios en el rumen, lo cual podría explicar la baja concentración

de C16:0 en la grasa láctea para este tratamiento. En apoyo de esta hipótesis se ha

observado que el suministro de grasa disminuyó la población de protozoarios en el rumen

dependiendo del tipo y disponibilidad de AG (Reveneau et al., 2012) y la adición de

aceite de girasol sólo o en combinación con algas marinas disminuyeron la concentración

de C16:0 en el fluido ruminal de ovejas (Toral et al., 2009).

La HA presentó el menor índice de aterogenicidad y trombogenicidad en la grasa láctea,

las diferencias fueron significativas frente al tratamiento C y se presentó una tendencia

frente a la SA (Tabla 2-6). Los menores índices de aterogenicidad y trombogenicidad del

HA pueden ser explicados por la menor concentración de C16:0 y la mayor

concentración de AG insaturados. Un aumento en la proporción de AG insaturados

puede ser benéfico para la salud humana (Jacobs et al., 2011). El uso de leches con

mejores índices de aterogenicidad y trombosidad serían una opción para mercados

saludables ya que las enfermedades coronarias en la mayoría de los casos se deben a la

obstrucción de los vasos por aterosclerosis o trombosis, de manera aislada o en

combinación (Ulbricht y Southgate, 1991).

2.4.4 Actividad de la Δ9desaturasa

En este trabajo no se midió la actividad de la Δ9desaturasa. Sin embargo, algunos

autores sugieren que las relaciones entre los sustratos y los productos de esta enzima en

Capítulo 2

77

la grasa láctea pueden ser un indicador de su actividad (Jacobs et al., 2011) o de una

mayor concentración en la glándula mamaria (Feng et al., 2004). Las relaciones entre los

principales sustratos y productos de esta enzima fueron menores para la SA lo que

sugeriría una menor actividad de esta enzima en la glándula mamaria de las vacas que

consumieron el suplemento con SA y mayor para C y HA. Algunos autores han

demostrado que la presencia de los AG ciclopropenos malválico y estercúlico, presentes

en semilla de algodón (Coppock et al., 1987), inhiben la enzima Δ9desaturasa (Allen et

al., 1967). Su efecto depende de la biohidrogenación de estos ácidos en el rumen ya que

ésta produce ciclopropano que no es capaz de inhibir la Δ9desaturasa (Cook et al.,

1976). Aunque no se conocen las concentraciones de los ácidos malválico y estercúlico,

nuestros resultados podrían sugerir que éstos AG inactivaron la acción de la enzima

Δ9desaturasa similar a lo reportado por Hawkins et al. (1985), debido a que algunos AG

ciclopropenos escapan de la hidrogenación en el rumen (Yang et al., 1999). La diferencia

entre los índices de la Δ9desaturasa de la HA y SA no es suficiente para argumentar una

inactivación de esta enzima con la SA pues no existe diferencia entre SA y C para este

índice. Sin embargo, la relación entre C14:1 / C14:0 fue menor para la SA frente a los

otros dos tratamientos, apoyando la teoría de que los AG ciclopropenos de la SA

inactivaron la acción de la Δ9desaturasa ya que el C14:0 es sintetizado principalmente

de novo por la glándula mamaria y el C14:1 se origina de la desaturación del C14:0 por la

Δ9desaturasa (Corl et al., 2001) de tal manera que la reducción en el índice C14:1 /

C14:0 provee un estimativo de la inhibición de la Δ9desaturasa. La menor actividad de la

Δ9desaturasa contribuiría a que la concentración de C18:0 fuera mayor y la de Ru menor

en la grasa láctea de vacas que consumieron SA como fue el caso en nuestro ensayo.

Otros autores sugieren que en los rumiantes no hay efectos negativos sobre la

Δ9desaturasa debido al suministro de semilla de algodón (Archibeque et al., 2005; Liu et

al., 2008; Vasta et al., 2008) debido a que los ácidos ciclopropenoicos representan una

menor proporción del total de la dieta y la biohidrogenación ruminal los convierte en

compuestos inactivos (Corl et al., 2001) que aparentemente no fue el caso en este

experimento.

2.5 Conclusiones

El tratamiento con harina de arroz incrementó la concentración de los ácidos

transvaccénico (3.11 %; p<0.01) y ruménico (1.41 %; p<0.001) en la grasa láctea;

además, disminuyó los índices de aterogenicidad (1.85; p<0.05) y trombogenicidad (3.09;

78



p<0.01) en la leche. La semilla de algodón no logró aumentar la proporción de estos

ácidos grasos y de ácidos grasos insaturados, ni mejorar los índices de aterogenicidad y

trombogenicidad a pesar de que el consumo de ácido linoleico y linolénico fue similar a

los del tratamiento harina de arroz. Por el contrario, la semilla de algodón presentó

mayores proporciones de C18:0 (16.31 %; p<0.001) y menores relaciones ruménico /

transvaccénico (0.39; p<0.01) y C14:1 / C14:0 (0.08; p<0.05) indicando mayor

biohidrogenación y menor actividad de la enzima Δ9desaturasa. A diferencia de la

semilla de algodón, la harina de arroz es una buena alternativa de suplementación para

las vacas lecheras en pastoreo pues induce una mayor concentración de transvaccénico

y ruménico en la leche, y mayor concentración de ácidos grasos insaturados (34.9;

p<0.01) que se sugiere son mejores para la salud del consumidor.

2.6 Agradecimientos


elaboración de este trabajo. Al Laboratorio de Nutrición Animal de la Facultad de

Medicina Veterinaria y de Zootecnia -Unal, Sede Bogotá-, al Centro de Investigación

Agropecuario Marengo -Unal, Sede Bogotá- y al Grupo de Investigación en Nutrición

Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria de y de Zootecnia -Unal, Sede Bogotá- por

el apoyo en la fase experimental y el trabajo en el laboratorio.

2.7 Referencias

ABUGHAZALEH, A. A.; FELTON, D. O. y IBRAHIM, S. A. 2007. Milk conjugated linoleic acid response to fish oil and sunflower oil supplementation to dairy cows managed under two feeding systems. J. Dairy Sci. 90(10):4763-4769.



ABUGHAZALEH, A. A.; SCHINGOETHE, D. J.; HIPPEN, A. R.; KALSCHEUR, K. F. y WHITLOCK, L. A. 2002. Fatty acid profiles of milk and rumen digesta from cows fed fish oil, extruded soybeans or their blend. J. Dairy Sci. 85(9):2266-2276.

AGUILAR, O. X.; MORENO, B. M.; PABÓN, M. L. y CARULLA, J. E. 2009. Efecto del consumo de kikuyo (Pennisetum clandestinum) o raigrás (Lolium hibridum) sobre

la concentración de ácido linoléico conjugado y el perfil de ácidos grasos de la grasa láctea. Livest. Res. Rural Dev. 21(49).

Capítulo 2

79

ALLEN, E.; JOHNSON, A.; FOGERTY, A.; PEARSON, J. y SHENSTONE, F. 1967. Inhibition by cyclopropene fatty acids of the desaturation of stearic acid in hen liver. Lipids. 2(5):419-423.

ALLEN, M. S. 2000. Effects of diet on short-term regulation of feed intake by lactating dairy cattle. J. Dairy Sci. 83(7):1598-1624.


AOAC. 2006. Official methods of analysis of AOAC International. 18a ed. Association Official to Analytical Chemistry Intenational, Maryland.


ARIELI, A. 1998. Whole cottonseed in dairy cattle feeding: a review. Anim. Feed Sci. and Technol. 72(1-2):97-110.

BARBER, M. C.; CLEGG, R. A.; TRAVERS, M. T. y VERNON, R. G. 1997. Lipid metabolism in the lactating mammary gland. Biochim. Biophys. Acta (BBA) - Lipids and Lipid Metabolism. 1347(2-3):101-126.

BARGO, F.; MULLER, L. D.; KOLVER, E. S. y DELAHOY, J. E. 2003. Invited review: Production and digestion of supplemented dairy cows on pasture. J. Dairy Sci.

86(1):1-42.

BAS, P.; ARCHIMÈDE, H.; ROUZEAU, A. y SAUVANT, D. 2003. Fatty acid composition of mixed-rumen bacteria: effect of concentration and type of forage. J. Dairy Sci.

86(9):2940-2948.

BELIBASAKIS, N. G. y TSIRGOGIANNI, D. 1995. Effects of whole cottonseeds on milk yield, milk composition, and blood components of dairy cows in hot weather. Anim.

Feed Sci. and Technol. 52(34):227-235.


BITMAN, J.; WOOD, D. L.; MILLER, R. H.; TYRRELL, H. F.; REYNOLDS, C. K. y BAXTER, H. D. 1996. Comparison of milk and blood lipids in jersey and holstein cows fed total mixed rations with or without whole cottonseed. J. Dairy Sci. 79(9):1596-1602.

BLAUWIEKEL, R.; XU, S.; HARRISON, J. H.; LONEY, K. A.; RILEY, R. E. y CALHOUN, M. C. 1997. Effect of whole cottonseed, gossypol, and ruminally protected lysine supplementation on milk yield and composition. J. Dairy Sci. 80(7):1358-1365.


91(6):2399-2407.

BREMMER, D. R.; RUPPERT, L. D.; CLARK, J. H. y DRACKLEY, J. K. 1998. Effects of chain length and unsaturation of fatty acid mixtures infused into the abomasum of

80



lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 81(1):176-188.



COOK, C. W. 1964. Symposium on nutrition of forages and pastures: collecting forage samples representative of ingested material of grazing animals for nutritional studies. J. Anim Sci. 23(1):265-270.


11(9):705-711.




CORREA, H. J.; PABÓN, M. L. y CARULLA, J. E. 2008. Valor nutricional del pasto kikuyo (Pennisetum clandestinum Hoechst Ex Chiov.) para la producción de leche en

Colombia (Una revisión): I - Composición química y digestibilidad ruminal y posruminal. Livest. Res. Rural Dev. 20(4).

CORREA, H. J.; PABÓN, M. L. y CARULLA, J. E. 2009. Estimación del consumo de materia seca en vacas Holstein bajo pastoreo en el trópico alto de Antioquia. Livest. Res. Rural Dev. 21(4).



131(3-4):168-206.

DHIMAN, T. R.; HELMINK, E. D.; MCMAHON, D. J.; FIFE, R. L. y PARIZA, M. W. 1999. Conjugated linoleic acid content of milk and cheese from cows fed extruded oilseeds. J. Dairy Sci. 82(2):412-419.

DHIMAN, T. R.; SATTER, L. D.; PARIZA, M. W.; GALLI, M. P.; ALBRIGHT, K. y TOLOSA, M. X. 2000. Conjugated linoleic acid (CLA) content of milk from cows offered diets rich in linoleic and linolenic acid. J. Dairy Sci. 83(5):1016-1027.

DÍAZ-GONZÁLEZ, G.; GUTIÉRREZ, R.; PÉREZ, N.; VEGA, S.; LEÓN, S.; GONZÁLEZ, M.; PRADO, G.; URBÁN, G.; RAMÍREZ, A. y PINTO, M. 2002. Detección de adulteraciones en la grasa de leche pasteurizada mexicana. Rev. Salud Anim.

24(1):54-59.

Capítulo 2

81

EDMONSON, A. J.; LEAN, I. J.; WEAVER, L. D.; FARVER, T. y WEBSTER, G. 1989. A body condition scoring chart for Holstein dairy cows. J. Dairy Sci. 72(1):68-78.

FENG, S.; LOCK, A. L. y GARNSWORTHY, P. C. 2004. Technical note: a rapid lipid separation method for determining fatty acid composition of milk. J. Dairy Sci. 87(11):3785-3788.

FIRKINS, J. L. y EASTRIDGE, M. L. 1994. Assessment of the effects of iodine value on fatty acid digestibility, feed intake, and milk production. J. Dairy Sci. 77(8):2357-2366.

FLOWERS, G.; IBRAHIM, S. A. y ABUGHAZALEH, A. A. 2008. Milk fatty acid composition of grazing dairy cows when supplemented with linseed oil. J. Dairy Sci. 91(2):722-730.

FOLCH, J.; LEES, M. y STANLEY, G. H. S. 1957. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues. J. Biol. Chem. 226(1):497-509.

GAGLIOSTRO, G. A.; RODRÍGUEZ, A.; PELLEGRINI, P.; GATTI, P.; MUSSET, G.; CASTAÑEDA, R. A.; COLOMBO, D. y CHILLIARD, Y. 2006. Efectos del suministro de aceite de pescado sólo o en combinación con aceite de girasol sobre las concentraciones de ácido linoleico conjugado (CLA) y omega 3 (n-3) en leche de cabra. Rev. Argent. Prod Anim. 26:71-87.

GARCES, R. y MANCHA, M. 1993. One-step lipid extraction and fatty acid methyl esters preparation from fresh plant tissues. Anal. Biochem. 211(1):139-143.

GARNSWORTHY, P. C.; MASSON, L. L.; LOCK, A. L. y MOTTRAM, T. T. 2006. Variation of milk citrate with stage of lactation and de novo fatty acid synthesis in dairy cows. J. Dairy Sci. 89(5):1604-1612.

HARRISON, J. H.; KINCAID, R. L.; MCNAMARA, J. P.; WALTNER, S.; LONEY, K. A.; RILEY, R. E. y CRONRATH, J. D. 1995. Effect of whole cottonseeds and calcium salts of long-chain fatty acids on performance of lactating dairy cows. J. Dairy Sci.

78(1):181-193.

HARVATINE, D. I.; FIRKINS, J. L. y EASTRIDGE, M. L. 2002. Whole linted cottonseed as a forage substitute fed with ground or steam-flaked corn: digestibility and performance. J. Dairy Sci. 85(8):1976-1987.

HAWKINS, G. E.; CUMMINS, K. A.; SILVERIO, M. y JILEK, J. J. 1985. Physiological effects of whole cottonseed in the diet of lactating dairy cows. J. Dairy Sci.

68(10):2608-2614.


HOLDEN, L. A.; MULLER, L. D. y FALES, S. L. 1994. Estimation of intake in high producing Holstein cows grazing grass pasture. J. Dairy Sci. 77(8):2332-2340.


HUANG, Y.; SCHOONMAKER, J. P.; BRADFORD, B. J. y BEITZ, D. C. 2008. Response

82



of milk fatty acid composition to dietary supplementation of soy oil, conjugated linoleic acid, or both. J. Dairy Sci. 91(1):260-270.

HUANG, Y.; SCHOONMAKER, J. P.; OREN, S. L.; TRENKLE, A. y BEITZ, D. C. 2009. Calcium salts of CLA improve availability of dietary CLA. Livest. Sci. 122(1):1-7.

HURLEY, W. L.; WARNER, G. J. y GRUMMER, R. R. 1987. Changes in triglyceride fatty acid composition of mammary secretions during involution. J. Dairy Sci.

70(11):2406-2410.

IP, C.; BANNI, S.; ANGIONI, E.; CARTA, G.; MCGINLEY, J.; THOMPSON, H. J.; BARBANO, D. y BAUMAN, D. 1999. Conjugated linoleic acid-enriched butter fat alters mammary gland morphogenesis and reduces cancer risk in rats. J. Nutr. 129(12):2135-2142.


JENKINS, T. C.; WALLACE, R. J.; MOATE, P. J. y MOSLEY, E. E. 2008. Board-Invited review: Recent advances in biohydrogenation of unsaturated fatty acids within the rumen microbial ecosystem. J. Anim Sci. 86(2):397-412.


KAPS, M. y LAMBERSON, W. R. 2004. Biostatistics for animal science., London.



114(2-3):164-175.

KHANAL, R. C.; DHIMAN, T. R.; URE, A. L.; BRENNAND, C. P.; BOMAN, R. L. y MCMAHON, D. J. 2005. Consumer acceptability of conjugated linoleic acid-enriched milk and cheddar cheese from cows grazing on pasture. J. Dairy Sci.

88(5):1837-1847.


LICITRA, G.; HERNANDEZ, T. M. y VAN SOEST, P. J. 1996. Standardization of procedures for nitrogen fractionation of ruminant feeds. Anim. Feed Sci. and Technol. 57(4):347-358.


LINDSEY, T. O.; HAWKINS, G. E. y GUTHRIE, L. D. 1980. Physiological responses of lactating cows to gossypol from cottonseed meal rations. J. Dairy Sci. 63(4):562-

573.

LINZELL, J. L. y PEAKER, M. 1971. Mechanism of milk secretion. Physiol. Rev.

51(3):564-597.

Capítulo 2

83

LIU, Z. L.; CHEN, P.; LI, J. M.; LIN, S. B.; WANG, D. M.; ZHU, L. P. y YANG, D. P. 2008. Conjugated linoleic acids (CLA) moderate negative responses of heat-stressed cows. Livest. Sci. 118(3):255-261.

LOOR, J. J.; FERLAY, A.; OLLIER, A.; DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 2005a. Relationship among trans and conjugated fatty acids and bovine milk fat yield due to dietary concentrate and linseed oil. J. Dairy Sci. 88(2):726-740.

LOOR, J. J.; FERLAY, A.; OLLIER, A.; UEDA, K.; DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 2005b. High-concentrate diets and polyunsaturated oils alter trans and conjugated isomers in bovine rumen, blood, and milk. J. Dairy Sci. 88(11):3986-3999.

LOURENÇO, M.; VAN RANST, G.; DE SMET, S.; RAES, K. y FIEVEZ, V. 2007. Effect of grazing pastures with different botanical composition by lambs on rumen fatty acid metabolism and fatty acid pattern of longissimus muscle and subcutaneous fat. Animal. 1(04):537-545.

LYNCH, J. M.; BARBANO, D. M. y FLEMING, J. R. 2007. Determination of the lactose content of fluid milk by spectrophotometric enzymatic analysis using weight additions and path length Adjustment: Collaborative Study. Journal of AOAC International. 90(1):196-215.

MCCREARY, D. K.; KOSSA, W. C.; RAMACHANDRAN, S. y KURTZ, R. R. 1978. A novel and rapid method for the preparation of methyl rsters for gas chromatography: application to the determination of the fatty acids of edible fats and oils. J. Chromat. Sci. 16(8):329-331.

MEL´UCHOVÁ, B.; BLASKO, J.; KUBINEC, R.; GÓROVÁ, R.; DUBRAVSKÁ, J.; MARGETÍN, M. y SOJÁK, L. 2008. Seasonal variations in fatty acid composition of pasture forage plants and CLA content in ewe milk fat. Small Ruminant Res. 78(1-3):56-65.

MENA, H.; SANTOS, J. E. P.; HUBER, J. T.; TARAZON, M. y CALHOUN, M. C. 2004. The effects of varying gossypol intake from whole cottonseed and cottonseed meal on lactation and blood parameters in lactating dairy cows. J. Dairy Sci.

87(8):2506-2518.

MOHAMMED, R.; STANTON, C. S.; KENNELLY, J. J.; KRAMER, J. K. G.; MEE, J. F.; GLIMM, D. R.; O'DONOVAN, M. y MURPHY, J. J. 2009. Grazing cows are more efficient than zero-grazed and grass silage-fed cows in milk rumenic acid production. J. Dairy Sci. 92(8):3874-3893.



MUIR, J. P. 2002. Hand-Plucked forage yield and quality and seed production from annual and short-lived perennial warm-season legumes fertilized with composted manure. Crop Sci. 42(3):897-904.


NRC. 2001. Nutrient requerimients of dairy cattle. 7a ed. National Academy Press, Washington DC.

ODONGO, N. E.; OR-RASHID, M. M.; BAGG, R.; VESSIE, G.; DICK, P.; KEBREAB, E.;

84



FRANCE, J. y MCBRIDE, B. W. 2007. Long-effects of feeding monensin on milk fatty acid composition in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 90(11):5126-5133.

OR-RASHID, M. M.; ODONGO, N. E. y MCBRIDE, B. W. 2007. Fatty acid composition of ruminal bacteria and protozoa, with emphasis on conjugated linoleic acid, vaccenic acid, and odd-chain and branched-chain fatty acids. J. Anim Sci.

85(5):1228-1234.

PALMQUIST, D. L.; BEAULIEU, A. D. y BARBANO, D. M. 1993. Feed and animal factors influencing milk fat composition. J. Dairy Sci. 76(6):1753-1771.

PALMQUIST, D. L. y JENKINS, T. C. 1980. Fat in lactation rations: Review. J. Dairy Sci.

63(1):1-14.


86(7):1624-1636.

PARK, H. S.; RYU, J. H.; HA, Y. L. y PARK, J. H. Y. 2001. Dietary conjugated linoleic acid (CLA) induces apoptosis of colonic mucosa in 1,2-dimethylhydrazine-treated rats: a possible mechanism of the anticarcinogenic effect by CLA. Br. J. Nutr. 86(05):549-555.

PIRES, A. V.; EASTRIDGE, M. L.; FIRKINS, J. L. y LIN, Y. C. 1997. Effects of heat treatment and physical processing of cottonseed on nutrient digestibility and production performance by lactating cows. J. Dairy Sci. 80(8):1685-1694.

REISER, R. y FU, H. C. 1962. The mechanism of gossypol detoxification by ruminant animals. J. Nutr. 76(2):215-218.

REVENEAU, C.; RIBEIRO, C. V. D. M.; EASTRIDGE, M. L. y FIRKINS, J. L. 2012. Interaction of unsaturated fat or coconut oil with monensin in lactating dairy cows fed 12 times daily. II. Fatty acid flow to the omasum and milk fatty acid profile. J. Dairy Sci. 95(4):2061-2069.

RISCO, C. A.; ADAMS, A. L.; SEEBOHM, S.; THATCHER, M. J.; STAPLES, C. R.; VAN HORN, H. H.; MCDOWELL, L. R.; CALHOUN, M. C. y THATCHER, W. W. 2002.

Effects of gossypol from cottonseed on hematological responses and plasma -tocopherol concentration of dairy cows. J. Dairy Sci. 85(12):3395-3402.

SANTOS, J. E. P.; VILLASENOR, M.; ROBINSON, P. H.; DEPETERS, E. J. y HOLMBERG, C. A. 2003. Type of cottonseed and level of gossypol in diets of lactating dairy cows: plasma gossypol, health, and reproductive performance. J. Dairy Sci. 86(3):892-905.

SCHAUFF, D. J. y CLARK, J. H. 1992. Effects of feeding diets containing calcium salts of long-chain fatty acids to lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 75(11):2990-3002.

SCHMIDELY, P.; GLASSER, F.; DOREAU, M. y SAUVANT, D. 2008. Digestion of fatty acids in ruminants: a meta-analysis of flows and variation factors. 1. Total fatty acids. Animal. 2(05):677-690.


86(10):3237-3248.

Capítulo 2

85


SMITH, W. A.; HARRIS, B.; VAN HORN, H. H. y WILCOX, C. J. 1993. Effects of forage type on production of dairy cows supplemented with whole cottonseed, tallow, and yeast. J. Dairy Sci. 76(1):205-215.

SUNVOLD, G. D. y COCHRAN, R. C. 1991. Technical note: evaluation of acid detergent lignin, alkaline peroxide lignin, acid insoluble ash, and indigestible acid detergent fiber as internal markers for prediction of alfalfa, bromegrass, and prairie hay digestibility by beef steers. J. Anim Sci. 69(12):4951-4955.

THIEX, N. J.; MANSON, H.; ANDERSON, S. y PETACCHI, F. 2002. Determination of crude protein in animal feed, forage, grain, and oilseeds by using block digestion with a copper catalyst and steam distillation into boric acid: collaborative study. J. AOAC Inter. 85(2):309-317.

TORAL, P. G.; BELENGUER, A.; FRUTOS, P. y HERVÁS, G. 2009. Effect of the supplementation of a high-concentrate diet with sunflower and fish oils on ruminal fermentation in sheep. Small Ruminant Res. 81(2-3):119-125.

TORAL, P. G.; BELENGUER, A.; SHINGFIELD, K. J.; HERVÁS, G.; TOIVONEN, V. y FRUTOS, P. 2012. Fatty acid composition and bacterial community changes in the rumen fluid of lactating sheep fed sunflower oil plus incremental levels of marine algae. J. Dairy Sci. 95(2):794-806.



ULBRICHT, T. L. V. y SOUTHGATE, D. A. T. 1991. Coronary heart disease: seven dietary factors. The Lancet. 338(8773):985-992.

VAN KNEGSEL, A. T. M.; VAN DEN BRAND, H.; DIJKSTRA, J.; VAN STRAALEN, W. M.; HEETKAMP, M. J. W.; TAMMINGA, S. y KEMP, B. 2007. Dietary energy source in dairy cows in early lactation: energy partitioning and milk composition. J. Dairy Sci.

90(3):1467-1476.

VAN SOEST, P. J.; ROBERTSON, J. B. y LEWIS, B. A. 1991. Methods for dietary fiber, neutral detergent fiber, and nonstarch polysaccharides in relation to animal nutrition. J. Dairy Sci. 74(10):3583-3597.

VÁRADYOVÁ, Z.; KIŠIDAYOVÁ, S.; SIROKA, P. y JALC, D. 2008. Comparison of fatty acid composition of bacterial and protozoal fractions in rumen fluid of sheep fed diet supplemented with sunflower, rapeseed and linseed oils. Anim. Feed Sci. and Technol. 144(1-2):44-54.


VELASQUEZ-PEREIRA, J.; RISCO, C. A.; MCDOWELL, L. R.; STAPLES, C. R.; PRICHARD, D.; CHENOWETH, P. J.; MARTIN, F. G.; WILLIAMS, S. N.; ROJAS,

86



L. X.; CALHOUN, M. C. y WILKINSON, N. S. 1999. Long-term effects of feeding gossypol and vitamin E to dairy calves. J. Dairy Sci. 82(6):1240-1251.

VILLASEÑOR, M.; COSCIONI, A. C.; GALVÃO, K. N.; CHEBEL, R. C. y SANTOS, J. E. P. 2008. Gossypol Disrupts Embryo Development in Heifers. J. Dairy Sci. 91(8):3015-3024.

WILKS, D. L.; COPPOCK, C. E.; BROOKS, K. N. y GATES, C. E. 1991. Effects of differences in starch content of diets with whole cottonseed or rice bran on milk casein. J. Dairy Sci. 74(4):1314-1320.

WILLIAMS, A. G. 1986. Rumen holotrich ciliate protozoa. Microbio. Rev. 50(1):25-49.

WILLIAMS, C. H.; DAVID, D. J. y IISMAA, O. 1962. The determination of chromic oxide in faeces samples by atomic absorption spectrophotometry. J. Agr. Sci. 59(03):381-

385.

YAMASAKI, M.; KISHIHARA, K.; IKEDA, I.; SUGANO, M. y YAMADA, K. 1999. A recommended esterification method for gas chromatographic measurement of conjugated linoleic acid. J. American Oil Chemists' Society. 76(8):933-938.

YANG, A.; LARSEN, T.; SMITH, S. y TUME, R. 1999. Ä9 desaturase activity in bovine

subcutaneous adipose tissue of different fatty acid compositiondesaturase activity in bovine subcutaneous adipose tissue of different fatty acid composition. Lipids. 34(9):971-978.

ZHANG, W. J.; XU, Z. R.; PAN, X. L.; YAN, X. H. y WANG, Y. b. 2007. Advances in gossypol toxicity and processing effects of whole cottonseed in dairy cows feeding. Livest. Sci. 111(1-2):1-9.

.

Capítulo 3

87

3. Capítulo 3: Efecto de la utilización de dos niveles de inclusión de la mezcla harina de arroz y semilla de algodón sobre la concentración de los ácidos transvaccénico (C18:1t11) y ruménico (C18:2c9,t11) en la leche de vacas en pastoreo





4 Profesor Titular. Departamento de Producción Animal. Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia. Universidad Nacional de Colombia, Sede Bogotá. E-mail: [email protected]

Resumen

Con el fin de determinar el efecto de suplementar con dos niveles de ácido linoleico (Li)

proveniente de la mezcla de harina de arroz (HA) y semilla de algodón (SA) sobre el

contenido de los ácidos grasos transvaccénico (TVa; C18:1t11) y ruménico (Ru

C18:2c9,t11) en la grasa láctea de vacas lecheras que pastan P. clandestinum se

evaluaron dos suplementos que contenían una mezcla de HA y SA (relación 4.8 : 1)

como la principal fuente lipídica de Li: uno con baja concentración de Li y otro con alta

(2.64 y 4.08 g de Li / 100 g de MS respectivamente). Se utilizaron seis vacas Holstein


producción láctea de 19.2 ± 0.9 Kg / d; valor medio ± DE) que fueron distribuidas según

un diseño Crossover 6 x 2 x 2 x 2 (6 vacas x 2 periodos x 2 tratamientos x 2

88



ordenamientos). Cada periodo tuvo una duración de 28 d (20 d de acostumbramiento a

las dietas experimentales y 8 d para la recolección de muestras), los animales fueron

ordeñados dos veces al día (05:00 y 14:00 h), permanecieron con agua a voluntad,

pastorearon en P. clandestinum y recibieron durante cada ordeño 60 g de sal

mineralizada, 3 Kg de suplemento según el tratamiento y 5 g de Cr2O3. Al incrementar el

nivel de Li no se afectaron las concentraciones de TVa y Ru en la grasa láctea, pero

aumentaron los ácidos grasos insaturados (35.1 %; p<0.05) y se presentó un mayor

índice calculado de actividad de la Δ9desaturasa y menores índices de aterogenicidad y

trombogenicidad (0.37, 1.79 y 3.22 respectivamente; p<0.05). Incrementar la

concentración de Li en la dieta de vacas lecheras que pastan P. clandestinum utilizando

un suplemento alimenticio que contiene una mezcla de HA y SA como la principal fuente

lipídica de Li no logró incrementar el contenido de TVa y Ru en la grasa láctea.

Palabras claves: ácido linoleico, ácido linoleico conjugado, ácidos grasos lácteos, vaca lechera.

Abstract

In order to determine the effect of supplementing the diet with two levels of linoleic acid

(Li) from the mixture of rice bran (RB) and cottonseed (CS) on transvaccenic (TVa;

C18:1t11) and rumenic (Ru; C18:2c9,t11) fatty acids content in milk fat from dairy cows

grazing on P. clandestinum two supplements containing a mixture of RB and CS (4.8 : 1

ratio) as the main source of Li was tested: one with low concentration of Li and other with

high level (2.64 and 4.08 g Li / 100 g DM respectively). We used six Holstein (4.2 ± 1.7

years old, 544 ± 35 Kg live weight, 168 ± 40 d of lactation and 19.2 ± 0.9 Kg / d of milk

production; average ± SD) distributed in a Crossover design 6 x 2 x 2 x 2 (6 cows x 2

periods x 2 treatments x 2 orders). Periods of 28 d were used (20 d of adaptation to the

experimental diets and 8 d for collection samples), animals were milked twice a day

(05:00 and 14:00 h), water ad libitum, grazed on P. clandestinum and received during

each milking 60 g of mineralized salt, 3 Kg of supplement according to the treatment and

5 g of Cr2O3. Increasing the level of Li not affect concentrations of TVa and Ru in milk fat,

but increased the unsaturated fatty acids (35.1 %; p<0.05) and had higher Δ9desaturase

activity index and lower of atherogenicity and thrombogenicity indixes (0.37, 1.79 and

3.22 respectively; p <0.05). Increasing the concentration of Li using a mixture of HA and

SA as the main source of Li failed to increase the content TVa and Ru in milk fat.

Capítulo 3

89


Abreviaturas.

A: tratamiento nivel alto. AG: ácido graso. Li: ácido linoleico. Ln: ácido linolénico. Ru:

ácido ruménico. TVa: ácido transvaccénico. B: tratamiento nivel bajo. CNFn:

carbohidratos no fibrosos corregidos por N. ENL: energía neta de lactancia. FDAi: fibra

detergente ácido indigerible. FDAn: fibra detergente ácido corregida por N. FDNn: fibra

detergente neutro corregida por N. HA: harina de arroz. SA: semilla de algodón.

3.1 Introducción

Los ácidos grasos (AG) transvaccénico (TVa, C18:1t11) y ruménico (Ru, C18:2c9,t11) se

encuentran en la grasa láctea y se consideran como compuestos funcionales por tener

propiedades anticarcinogénicas (Ip et al., 1999; Park et al., 2001), antiaterogénicas,

antidiabetogénicas (Houseknecht et al., 1998; Munday et al., 1999), antiobesidad (Khanal

y Olson, 2004), regulación del sistema inmune (Moya-Camarena et al., 1999; Jensen,

2002) y mejoramiento de la mineralización del hueso (Jensen, 2002). La dieta es el

mayor determinante de la concentración láctea de Ru (Khanal y Olson, 2004). La

suplementación con fuentes lipídicas AG insaturados (Dhiman et al., 2000; Khanal y

Olson, 2004), las características de los forrajes (Mel´uchová et al., 2008; Vasta et al.,

2008), la relación concentrado : forraje (Ueda et al., 2003; Loor et al., 2005b), el sistema

de alimentación ya sea pastoreo o dietas totalmente mezcladas (TMR por sus siglas en

inglés; Kelly et al., 1998; Schroeder et al., 2003; Khanal et al., 2008) y el suministro de

antibióticos (Odongo et al., 2007; AlZahal et al., 2008) son factores relacionados con la

dieta que afectan la concentración de TVa y Ru en la leche. Adicionalmente, el pH

ruminal, el tipo de lípidos ingeridos y el tipo de bacterias presentes en el rumen afectan la

biohidrogenación o limitan la conversión de TVa a ácido esteárico (Chilliard et al., 2000;

Tsiplakou et al., 2008).

La concentración de TVa y Ru se incrementa en la leche cuando se suministran

suplementos ricos en AG insaturados (Dhiman et al., 2000). Se han evaluado diferentes

fuentes lipídicas con AG insaturados, entre las cuales se resaltan la soya (Huang et al.,

2008; Bouattour et al., 2008), la linaza (Loor et al., 2005a; Flowers et al., 2008), el girasol

(AbuGhazaleh et al., 2007; Hervás et al., 2008), el maíz (Dewhurst et al., 2006;

Bharathan et al., 2008) y el aceite de pescado (AbuGhazaleh et al., 2003; AbuGhazaleh

90



et al., 2004). El efecto es diferente según el tipo de fuente lipídica, aquellas con elevadas

concentraciones de ácido linoleico (ALi) son más eficientes en producir incremento en la

concentración de TVa y Ru que las ricas en Ln (Bu et al., 2007).

La producción lechera en el trópico alto colombiano tiene alto potencial para producir

leches ricas en TVa y Ru debido a las características del forraje y al aporte de lípidos a

través del suplemento (Castaño et al., 2013). La harina de arroz (HA) y la semilla de

algodón (SA) se utilizan frecuentemente en la elaboración de suplementos alimenticios

para vacas lecheras en Colombia y son fuente de AG insaturados (Dhiman et al., 1999;

Lin et al., 2009). La elevada concentración de Li en la grasa de estos dos recursos, del

36 al 42% para la HA (de Campos et al., 2007) y del 57.3% para la SA (Dhiman et al.,

1999; Khanal y Olson, 2004), son cualidades que podrían ser aprovechadas para

producir leche con altos niveles de TVa y Ru. Castaño et al. (2013) evaluaron el efecto

de suplementar con HA y SA sobre el contenido de TVa y Ru en la leche de vacas en

pastoreo y encontraron que la HA logró incrementar los niveles de estos AG, mientras la

SA no. Los autores sugieren que estos resultados se podrían haber presentado por una

intensa biohidrogenación ruminal de los AG provenientes de la SA y por la presencia de

AG ciclopropenos en esta semilla, ya que éstos inactivan la actividad de la Δ9desaturasa

(Cook et al., 1976). Otros autores indican que no es posible disminuir la actividad de la

Δ9desaturasa con la adición de SA (Archibeque et al., 2005) ya que los ciclopropenos

representan una menor proporción de la dieta y la biohidrogenación ruminal los inactiva

(Corl et al., 2001). El mezclar SA con HA permite aumentar la cantidad Li en el

suplemento y si se maneja una mayor proporción de HA con respecto a la SA se podría

evitar el efecto negativo de la SA sobre la concentración TVa y Ru encontrado por

Castaño et al. (2013), lo cual podría ser una alternativa para producir leche benéfica para

la salud humana. El objetivo de este experimento fue determinar el efecto de suplementar

con dos niveles de Li a través de suplementos que contienen como principal fuente

lipídica una mezcla de HA y SA (relación 4.8 : 1) sobre el contenido de TVa y Ru en la

leche de vacas que pastan P. clandestinum.

3.2 Materiales y métodos

3.2.1 Localización

El experimento se realizó en el Centro de Investigación Agropecuario Marengo de la

Capítulo 3

91

Universidad Nacional de Colombia; localizado a 4° 40’ 89’’ de latitud norte, 74° 13’ 13’’ de

longitud oeste y a una altitud de 2540 msnm. La temperatura promedio es de 13 °C (con

variaciones de 0 a 20 ºC), la humedad relativa oscila entre 80 a 85 % y la precipitación

promedio anual es 900 mm / año con dos épocas marcadas de invierno (abril - mayo y

septiembre - noviembre). El experimento fue desarrollado entre septiembre y noviembre

de 2009.

3.2.2 Periodo experimental y tratamientos

El experimento tuvo una duración de 55 d, divididos en tres periodos de 28 d (20 d de

acostumbramiento a las dietas experimentales y 8 d para la recolección de muestras).

Los tratamientos consistieron en dos diferentes suplementos suministrados a vacas

pastando P. clandestinum, que contenían como principal fuente lipídica de Li una mezcla

de HA y SA (relación 4.8 : 1): uno con baja concentración de Li (B) y otro con alta (A;

2.64 y 4.08 g de Li / 100 g de MS respectivamente). Se suministraron 6 Kg de

suplemento al día, repartidos durante los dos ordeños (05:00 y 14:00 h). Los

suplementos eran isoenergéticos e isoproteicos, pero con diferente concentración de

grasa. Los ingredientes, la composición química y el perfil de AG de los suplementos se

pueden apreciar las Tablas 3-1 y 3-2.

92



Tabla 3-1: Composición de ingredientes y nutrientes de los suplementos alimenticios utilizados

en el experimento

Ítem Suplemento

Bajo Alto

Ingrediente, %

Harina de arroz 39.3 65.5 Semilla de algodón 8.1 13.5 Aceite de palma 2.1 0.2 Torta de soya 17.1 11.8 Harina de yuca 11.0 - Palmiste (solvente) 16.3 3.0 Melaza de caña 5.0 5.0 Premezcla de vitaminas y minerales 0.5 0.5

Composición química Materia seca (MS), % 89.6 90.3 Proteína cruda, % MS 20.2 19.4 Fibra detergente neutro

1, % MS 28.9 28.9

Fibra detergente ácido1, % MS 19.8 17.8

Lignina, % MS 4.4 6.2 Carbohidratos no fibrosos

1, % MS 28.5 26.5

Extracto etéreo, % MS 9.6 12.6 Cenizas, % MS 7.3 6.9 ENL1X

2, Mcal/Kg MS 2.2 2.2

Ácido linoleico, % MS 2.64 4.08 1Corregidos por N (NRC, 2001).

2Energía neta de lactancia a 1X el consumo de mantenimiento

(NRC, 2001).

Tabla 3-2: Perfil de ácidos grasos (AG) de los suplementos alimenticios y del forraje utilizado en

el experimento

AG, g / 100 g AG Suplemento

Forraje Bajo Alto

C12:0 1.81 0.95 3.34 C14:0 1.33 0.91 0.73 C16:0 24.07 22.57 21.65 C16:1 0.11 0.19 1.94 C18:0 3.45 2.81 3.98 C18:1c9 36.94 35.27 3.23 C18:2c9,c12 29.74 33.83 13.44 C18:3c9,c12,c15 1.00 1.26 43.75 Otros 1.6 2.2 7.94

3.2.3 Animales y manejo

Todos los procesos y procedimientos del experimento fueron aprobados por el Comité de

Bioética de la Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia de la Universidad

Nacional de Colombia sede Bogotá (Acta 001 de 2009). Se utilizaron 6 vacas Holstein


producción láctea de 19.2 ± 0.9 Kg/d; valor medio ± DE) que fueron asignadas

aleatoriamente a dos grupos de 3 animales, cada grupo corresponde a un ordenamiento

en un diseño Cross-over 6 x 2 x 2 x 2 (6 animales x 2 periodos x 2 tratamientos x 2

Capítulo 3

93

ordenamientos). Las vacas fueron ordeñadas dos veces al día (05:00 y 14:00 h)

utilizando un sistema de ordeño mecánico. Los animales permanecieron con agua a

voluntad y recibieron durante cada ordeño 60 g de sal mineralizada, 3 Kg de suplemento

según el tratamiento y 5 g de Cr2O3 para calcular el consumo de forraje.

Durante el experimento los animales pastaron en un lote 2.5 Ha de P. clandestinum bajo

un sistema de pastoreo en franjas donde se corrió la cuerda dos veces al día (a.m. y

p.m.). Para establecer la masa forrajera se tuvo en cuenta la proporción de la pastura con

producciones de forraje baja, media o alta según lo descrito por Castaño et al. (2013). Se

utilizó un equipo de geo-posicionamiento GPSMAP® 76CSx (Garmin Ltda., Kansas,

EUA) para la medición de las áreas de pastoreo que se ajustaron con el fin de garantizar

una oferta diaria de 4 Kg de materia seca (MS) por cada 100 Kg de peso vivo.

3.2.4 Mediciones, toma de muestras y análisis de laboratorio

Mediciones. Se pesaron los animales (día 28 de cada periodo) antes de recibir el

alimento (05:00 h).

Toma de muestras.

Leche. Se pesó la producción láctea en cada ordeño (a.m. y p.m.) entre los días 21 y

28 de cada periodo. Se colectaron muestras de leche en cada ordeño de los días 21 y

28, que inmediatamente después del ordeño de la tarde se mezclaron de manera

proporcional a la producción del día hasta completar 200 mL de leche, que se

dividieron en dos alícuotas de 100 mL. A una alícuota se le adicionó 1 mL de solución

de dicromato de potasio al 6 % y se conservó a - 20 °C. La otra alícuota fue remitida

inmediatamente al laboratorio para la evaluación de la grasa.

Forraje. Los días 20 y 27 de cada periodo y previo al pastoreo se recolectaron

muestras de forraje (aprox. 500 g) utilizando el sistema “hand plucking” (Cook, 1964;

Muir, 2002). Las muestras se empacaron al vacío en bolsas plásticas y se

conservaron a - 20 °C, posteriormente fueron secadas en un liofilizador (Martin

Christ® Alpha 14LD Plus), molidas con un molino Romer® con criba de 1 mm.

Adicionalmente, se tomaron muestras los días 13, 16, 19, 22, 25 y 28, se secaron a 60

°C por 48 h, se molieron utilizando un molino Romer® con criba de 1 mm y se

mezclaron homogéneamente para formar una muestra compuesta que fue utilizada

94



para determinar el contenido de fibra detergente ácido indigerible (FDAi).

Suplementos. El día 24 de cada periodo se colectó una muestra de cada suplemento

(aprox. 500 g), se molió utilizando un molino Romer® con criba de 1 mm. Se recolectó

el desperdicio de suplemento entre el día 21 y 28, se empacó en bolsas plásticas y se

conservó a 8 °C hasta ser pesado y enviado al laboratorio para determinar la

humedad.

Fluido ruminal. Se colectó fluido ruminal (aprox. 350 mL) a las 14:30 h del día 25 de

cada periodo utilizando una sonda ororuminal (Haumptner®); los primeros 250 mL

fueron eliminados y los 100 mL restantes fueron filtrados a través de dos capas de

gasa. Una alícuota de 70 mL fue utilizada para medir inmediatamente el pH con un

potenciómetro (Beckman®) y a una segunda alícuota de 30 mL se le adicionaron 3 mL

de ácido clorhídrico 6 N (Huang et al., 2009), se congeló a - 20 °C y posteriormente

fue utilizada para determinar amonio según adaptación al método Kjeldahl (Thiex

et al., 2002).

Heces. Se recolectaron dos muestras diarias (05:00 y 13:00 h) de heces entre los días

22 y 27. Las muestras se empacaron en bolsas plásticas y se conservaron a – 20 °C,

posteriormente fueron secadas a 60 °C por 48 h, molidas utilizando un molino Romer®

con criba de 1 mm y mezcladas homogéneamente para formar una muestra

compuesta de heces por animal.

Extracción de grasa y metilación (leche, forraje y suplementos). Se realizó según lo

descrito por Castaño et al. (2013).

Cuantificación de AG (leche, forraje y suplementos). Los ésteres de AG metilados

(FAMES por sus iniciales en inglés) de la grasa de la leche, del forraje y de los

suplementos fueron cuantificados por cromatografía de gases, utilizando un cromatógrafo

de gases marca Shimadzu® modelo GC2014 con auto inyector AOC20i y auto

muestreador AOC20C. Los FAMES fueron separados en columna capilar (Rt 2560; 100

m x 0.25 mm di x 0.2 µm espesor de la capa; Restek®). Las temperaturas del inyector y

del FID fueron 260 °C y 270 °C respectivamente. El programa de temperatura fue: 140 °C

por 5 min, se incrementó 4 °C/min hasta 190 °C y se mantuvo por 32.5 min. El Split ratio

fue de 1 : 100 y el He fue el gas de arrastre con una presión de 40.4 psi. Los tiempos de

retención fueron comparados con estándares conocidos (Food Industry FAMEX Mix cat

35077).

Capítulo 3

95

Análisis químicos

Leche. Se determinó el contenido de sólidos totales y de cenizas por gravimetría

(métodos AOAC925.23 y AOAC945.46 respectivamente; AOAC, 2006), de proteína

cruda por el método Kjeldahl (Thiex et al., 2002) y de grasa láctea por el método

Gerber (método AOAC-2000.18; AOAC, 2006). La lactosa se calculó por diferencia

(lactosa = 100 - grasa - proteína cruda - cenizas) según Lynch et al. (2007).

Forraje, suplementos y desperdicio. Se determinó humedad y cenizas por

gravimetría (métodos AOAC925.23 y AOAC945.46 respectivamente; AOAC, 2006),

proteína cruda por el método Kjeldahl (Thiex et al., 2002), extracto etéreo (método

AOAC-930.39; AOAC, 2006), fibra detergente neutro corregida por N (FDNn), fibra

detergente ácido corregida por N (FDAn; Van Soest et al., 1991; NRC, 2001), lignina

(Van Soest et al., 1991), proteína cruda insoluble en detergente neutro, proteína cruda

insoluble en detergente ácido (Licitra et al., 1996) y FDAi (Sunvold y Cochran, 1991).

Los carbohidratos no fibrosos corregidos por N (CNFn) y la energía neta de lactancia

(ENL) se estimaron según el NRC (2001). Al desperdicio sólo se le determinó la

humedad.

Fluido ruminal. Muestras frescas se usaron para medir el pH con un potenciómetro

(Beckman®) y las muestras congeladas para determinar amonio según adaptación

al método Kjeldahl (Thiex et al., 2002).

Heces. Se determinó la concentración de FDAi (Sunvold y Cochran, 1991) y de Cr por

absorción atómica (Williams et al., 1962) con un espectrofotómetro de absorción

atómica Shimadzu® modelo AA7000.

3.2.5 Cálculos

Consumo de forraje. Para determinar el consumo de forraje se utilizó Cr2O3 como

marcador indigerible externo (Holden et al., 1994) y FDAi como marcador indigerible

interno (Sunvold y Cochran, 1991). Los cálculos se realizaron según lo descrito por

Castaño et al. (2013).

Consumo de AG. Para determinar el consumo de AG se utilizó la ecuación (3-1).

CAG = (CF x [TAG]F x [AG]F) + (CS x [TAG]S x [AG]S) (3-1)

96



Donde: CAG es el consumo total de cada AG (g AG / d); CF y CS son los consumos de

forraje y de suplemento respectivamente (g de MS de forraje o suplemento/d); [TAG]F y

[TAG]S son las concentraciones del total de AG en el forraje y en el suplemento

respectivamente (g del total de AG / g de MS de forraje o suplemento); [AG]F y [AG]S son

las concentraciones de cada AG en el total de AG del forraje y del suplemento

respectivamente (g de cada AG / g del total de AG del forraje o del suplemento). El total

de AG se estimó según el contenido de extracto etéreo con la ecuación (3-2) propuesta

por Allen (2000).

TAG = -0.98 + 1.03 x EE (3-2)

Donde: TAG es el porcentaje del total de AG en base seca (g de AG / 100 g de MS) y EE

es el porcentaje de extracto etéreo en base seca (g de EE / 100 g de MS).

Índice de actividad Δ9desaturasa. Se calculó con la ecuación (3-3) según Gagliostro et

al. (2006).

IΔ9 = PΔ

9 x (PΔ

9 + SΔ

9)

-1 (3-3)

Donde: IΔ9 es el índice de actividad de la enzima Δ9desaturasa; PΔ9 es la sumatoria de

productos de la Δ9desaturasa (C14:1c9 + C16:1c9 + C18:1c9 + C18:2c9,t11); SΔ9 es la

sumatoria de sustratos de la Δ9desaturasa (C14:0 + C16:0 + C18:0 + C18:1t11).

Índice de aterogenicidad. Se calculó con la ecuación (3-4) según Ulbricht y Southgate

(1991).

IA = (SC12 + 4SC14 + SC16) x AGI-1 (3-4)

Donde: IA es el índice de aterogenicidad; SC12, SC14 y SC16 AG saturados de 12, 14 y 16 C

respectivamente; AGI es la sumatoria de los AG insaturados.

Índice de trombogenicidad. Se calculó con la ecuación (3-5) según Ulbricht y Southgate

(1991).

Capítulo 3

97

IT = (SC14 + SC16 + SC18) x [0.5MI + 0.5ω6 + 3ω3 + (ω3/ω6)]-1 (3-5)

Donde: IT es el índice de trombogenicidad; SC14, SC16 y SC18 AG saturados de 14, 16 y

18 C respectivamente; MI sumatoria AG monoinsaturados; ω3 y ω6 AG de la serie

omega 3 y 6 respectivamente.

3.2.6 Análisis estadístico

Los datos fueron analizados estadísticamente como un diseño diseño Cross-over 6 x 2 x

2 x 2 (animales x periodos x tratamientos x ordenamientos; Kaps y Lamberson, 2004) de

acuerdo con el modelo presentado en la ecuación (2-8).

yijkl = µ + τi + ϒk + λ(ϒ)jk +ωl + εijkl (3-6)

Donde:

yijkl = Valor de la observación del i-ésimo nivel (i = A, B), j-ésimo animal (j = 1, 2, …,

6), k-ésimo ordenamiento (k = 1, 2) y l-ésimo periodo (l = 1, 2)

µ = Promedio de la población

τi = Efecto del i-ésimo nivel (m = A, B)

ϒk = Efecto del k-ésimo ordenamiento (k = 1, 2)

λ(ϒ)jk = Efecto del j-ésimo animal (j = 1, 2, …, 6) dentro del k-ésimo ordenamiento (k = 1,

2)

ωl = Efecto del l-ésimo periodo (l = 1, 2)

εijkl = Error experimental

Los supuestos fueron probados con la metodología indicada para cada caso. Para el

análisis de los resultados se utilizó el programa SAS versión 9.0 (Copyright© 2002 by

SAS Institute Inc., Cary, NC, USA).

3.3 Resultados


Cuando las vacas recibieron el suplemento A consumieron mayor cantidad de lípidos

98



(940 g / d; p<0.05) que se explica por un incremento en la ingestión de extracto etéreo

proveniente del suplemento (618 g / d; p<0.01), ya que los tratamientos no afectaron el

consumo de esta fracción proveniente del forraje. El consumo promedio de lípidos

provenientes del suplemento para el tratamiento B fue 495 g / d y para el A 618 g / d, que

corresponden al 59.6 % y 65.7 % de los lípidos ingeridos por los tratamientos B y A

respectivamente, aunque los suplementos sólo aportaron el 33 % de la MS consumida.

Los consumos de FDA y CNF provenientes del suplemento fueron mayores para el

tratamiento B (1.0 y 1.5 Kg / d respectivamente; p<0.05), mientras que el de lignina fue

menor (457 g / d; p<0.05); sin embargo, el consumo total para cada una de estas

fracciones no se vio afectado. Los consumos de MS, PC, ENL y FDN no se vieron

afectados por el tipo de suplemento (Tabla 3-3).

Capítulo 3

99

Tabla 3-3: Efecto del uso de suplementos con dos niveles de ácido linoleico (bajo y alto) y que

contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el consumo de alimento de vacas lactantes que pastaban P. clandestinum

Fracción del alimento Nivel

1

ESM2 p

3

Bajo Alto

Materia seca Suplemento, Kg/d 5.2 4.9 0.1 NS Forraje, Kg/d 10.3 9.9 1.5 NS Total

Kg/d 15.5 14.7 1.4 NS Kg/100 Kg de PV

4 2.9 2.8 0.3 NS

Proteína cruda Suplemento, Kg/d 1.0 0.9 0.1 NS Forraje, Kg/d 1.9 1.8 0.3 NS Total, Kg/d 2.9 2.7 0.2 NS

ENLP5

Suplemento, Mcal/d 10.1 10.2 0.7 NS Forraje, Mcal/d 14.8 14.2 2.1 NS Total, Mcal/d 25.0 24.4 1.8 NS

Fibra detergente neutro6

Suplemento, Kg/d 1.5 1.4 0.1 NS Forraje, Kg/d 5.2 5.0 0.7 NS Total

Kg/d 6.7 6.4 0.7 NS Kg/100 Kg de PV

4 1.2 1.2 0.2 NS

Fibra detergente ácido6

Suplemento, Kg/d 1.0 0.9 0.1 * Forraje, Kg/d 2.9 2.8 0.4 NS Total, Kg/d 4.0 3.7 0.4 NS

Lignina Suplemento, g/d 457 610 79 * Forraje, g/d 284 272 40 NS Total, g/d 741 882 120 NS

Carbohidratos no fibrosos6

Suplemento, Kg/d 1.5 1.3 0.1 * Forraje, Kg/d 1.8 1.8 0.3 NS Total, Kg/d 3.3 3.1 0.2 NS

Extracto etéreo Suplemento, g/d 495 618 45 ** Forraje, g/d 335 322 49 NS Total, g/d 830 940 42 *

12.64 g y 4.08 g de ácido linoleico / 100 g MS para los niveles Bajo y Alto respectivamente.

2 Error

estándar de la media de los tratamientos. 3Significancia; NS: no significativa, *: p<0.05, **: p<0.01

y ***: p<0.001. 4Peso vivo.

5Energía neta de lactancia corregida al nivel de consumo (NRC, 2001).

6Corregido por N (NRC, 2001).

3.3.2 Consumo de precursores de los ácidos trans-vaccénico

y ruménico

Cuando los animales recibieron el suplemento A se incrementó el consumo de Li (253 g /

d; p<0.01) y de precursores de los TVa y Ru (341 g / d; p<0.01). Estos incrementos se

100



debieron al suplemento, pues el consumo de Li proveniente del forraje fue similar entre

los tratamientos. Aunque se presentó un mayor consumo de Ln proveniente del

suplemento A (7 g / d; p<0.001), el consumo total de este AG no se vio afectado por el

tratamiento. Como consecuencia del mayor consumo de Li del suplemento, se

incrementó el consumo total de precursores de TVa y Ru en comparación a B (Tabla 3-

4).

Tabla 3-4: Efecto del uso de suplementos con dos niveles de ácido linoleico (bajo y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el consumo del ácido linoleico, ácido linolénico y precursores de los ácidos transvaccénico y ruménico en la leche de vacas que pastaban P. clandestinum

Ítem Nivel

1

ESM2 p

3

Bajo Alto

Consumo, g/d Linoleico

Suplemento 137 199 14 ** Forraje 33 32 5 NS Total 170 231 13 **

Linolénico Suplemento 5 7 0.5 *** Forraje 107 103 16 NS Total 111 110 16 NS

Total precursores4

Suplemento 141 206 15 ** Forraje 140 134 21 NS Total 281 341 17

**

Aporte relativo5, %

Linoleico Suplemento 80.7 86.2 2.9 * Forraje 19.3 13.8 2.5 *

Linolénico Suplemento 4.2 6.9 1.2 * Forraje 95.8 93.1 1.2 *

Total precursores4

Suplemento 50.6 60.5 4.8 *

Forraje 49.4 39.5 4.8 * 12.64 g y 4.08 g de ácido linoleico / 100 g MS para los niveles Bajo y Alto respectivamente.

2Error

estándar de la media de los tratamientos. 3Significancia; NS: no significativa,*: p<0.05, **: p<0.01 y

***: p<0.001. 4Sumatoria de los ácidos grasos linoleico y linolénico.

5g de ácido graso proveniente

del suplemento o del forraje/100 g de precursores consumidos al día


La producción de leche y su composición química no se vieron afectadas por los

tratamientos (Tabla 3-5).

Capítulo 3

101


contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre la producción y calidad de la leche de vacas que pastaban P. clandestinum

Ítem Nivel

1

ESM2 p

3

Bajo Alto

Leche, Kg/d 17.8 17.4 1.5 NS Sólidos totales

Concentración, % 12.1 12.2 0.7 NS Producción, Kg/d 2.16 2.13 0.23 NS

Proteína cruda Concentración, % 3.2 3.1 0.2 NS Producción, Kg/d 0.56 0.54 0.03 NS

Grasa Concentración , % 3.9 3.7 0.6 NS Producción, Kg/d 0.69 0.63 0.11 NS

Cenizas Concentración , % 0.8 0.8 0.03 NS Producción, Kg/d 0.14 0.14 0.01 NS

Lactosa Concentración, % 4.3 4.6 0.3 NS Producción, Kg/d 0.77 0.82 0.11 NS

Ácido transvaccénico Concentración, % 0.09 0.09 0.01 NS Producción, g/d 16.26 15.13 2.98 NS

Ácido ruménico Concentración, % 0.04 0.04 0.002 NS Producción, g/d 7.00 7.18 0.92 NS


2Error


y ***: p<0.001.


Los tratamientos no afectaron la concentración de los AG C11:0, C13:0, C14:0, C14:1c-9,

C15:0, C16:1c9, C17:0, C18:0, C18:1c11, C18:1t11 (TVa), C18:2c9,c12, C18:2c9,t11 (Ru) y

C18:3c9,c12,c15. Con el tratamiento A se presentó una tendencia a incrementar la

concentración en la grasa láctea de C18:1c9 (27.71 %; p=0.08) y a disminuir C8:0 (0.67

%; p=0.08) y C10:0 (1.35 %; p=0.06; Tabla 3-6).

El tratamiento A incrementó los AG insaturados y disminuyó los saturados (35.1 y

60.0 % respectivamente; p<0.05), presentó una tendencia a disminuir los AG de

cadena corta (3.4 %; p=0.06) y media (41.4 %; p=0.06) e incrementar los AG de

cadena larga (50.1 %; p=0.09). Los AG de novo no se vieron afectados por los

tratamientos, pero se presentó una tendencia a incrementar los AG preformados

con el tratamiento A (49.5 %; p=0.08).

102



Los índices Ru / TVa, C14:1 / C14:0 y C16:1 / C16:0 no fueron alterados por los

tratamientos, pero el índice calculado de actividad de la Δ9desaturasa fue mayor

para el tratamiento A (0.37 %; p<0.05) debido a que presentó mayor

concentración de productos de la enzima y menor de sustratos (32.5 y 55.7 %

respectivamente; p<0.05). Los índices de aterogenicidad y trombogenicidad

fueron mayores para el tratamiento B (1.79 y 3.22 respectivamente; p<0.05; Tabla 3-

6).

Capítulo 3

103


contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el perfil de ácidos grasos (AG) de la grasa láctea de vacas que pastaban P. clandestinum

Ítem Nivel

1

ESM2 p

3

Bajo Alto

AG, g / 100 g de AG C6:0 1.39 1.25 0.07 * C8:0 0.78 0.67 0.08 0.07 C10:0 1.62 1.35 0.18 0.06 C11:0 0.20 0.17 0.03 NS C12:0 2.30 1.91 0.23 * C13:0 0.10 0.08 0.01 NS C14:0 9.00 8.08 0.81 NS C14:1c9 0.77 0.70 0.15 NS C15:0 1.10 1.13 0.05 NS C16:0 28.79 28.32 0.62 * C16:1c9 1.22 1.23 0.07 NS C17:0 0.44 0.44 0.07 NS C17:0t11 0.17 0.16 0,01 * C18:0 15.36 16.57 1.26 NS C18:1c9 26.01 27.71 1.25 0.08 C18:1c11 0.27 0.26 0.02 NS C18:1t11 (trans-vaccénico) 2.34 2.34 0.15 NS C18:2c9,c12 1.02 1.07 0.05 NS C18:2c9,t11 (ruménico) 1.02 1.12 0.12 NS C18:2c9,t12 0.18 0.22 0.03 * C18:3c9,c12,c15 0.27 0.26 0.03 NS Otros 4.64 4.96 0.39 NS

AG según su saturación, g / 100 g de AG

AG insaturados 33.3 35.1 1.1 * AG saturados 62.1 60.0 0.9 *

AG según su longitud, g / 100 g de AG AG de cadena corta (<C12) 4.0 3.4 0.4 0.06 AG de cadena media (C12-16) 44.3 41.4 1.9 0.06 AG de cadena larga (>C16) 47.1 50.1 2.4 0.09

AG según su origen, g / 100 g de AG De novo (<C16) 17.3 15.3 1.64 NS Preformados (>C17) 46.5 49.5 2.34 0.08

Indicadores actividad Δ9Desaturasa

Índice Ru / TVa 0.44 0.49 0.04 NS Índice C14:1 / C14:0 0.09 0.09 0.01 NS Índice C16:1 / C16:0 0.04 0.04 0.00 NS Productos de la Δ

9Desaturasa

4 30.7 32.5 1.0 *

Sustratos de la Δ9Desaturasa

5 56.9 55.7 0.5 *

Índice Δ9Desaturasa

6 0.35 0.37 0.01 *

Índice Aterotogénicidad 7 2.08 1.79 0,17 *

Índice Trombogenicidad 8 3.50 3.22 0.15 *

12.64 g y 4.08 g de ácido linoleico / 100 g MS para Bajo y Alto respectivamente.

2Error estándar

de la media de los tratamientos. 3Significancia; NS: no significativa, *: p<0.05, **: p<0.01 y ***:

p<0.001. 4C14:1c-9 + C16:1c-9 + C18:1c-9 + Ru.

5C14:0 + C16:0 + C18:0 + TVa.

6productos de la Δ

9-

desaturasa / (sustratos de la Δ9-desaturasa + productos de la Δ

9desaturasa)

-1; Gagliostro et al.

(2006). 7(C12:0 + 4C14:0 + C16:0) / AG insaturados; Ulbricht y Southgate (1991).

8 (C14:0 + C16:0

+ C18:0) x [0.5 monoinsaturados + 0.5ω-6 + 3ω-3 + (ω-3/ω-6)]-1; Ulbricht y Southgate (1991)

104



3.3.5 Peso vivo y fluido ruminal

El peso vivo y el fluido ruminal no se vieron afectados por el tipo de suplemento (Tabla 3-

7).

Tabla 3-7: Efecto del uso de suplementos con dos niveles de ácido linoleico (bajo y alto) y que contienen como principal fuente lipídica una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) sobre el peso vivo y el fluido ruminal de vacas lactantes que pastan P. clandestinum

Ítem Nivel

ESM2 p

3

Bajo Alto

Peso vivo, Kg 536 538 4 NS Fluido ruminal

pH 6.7 6.8 0.2 NS NNH3, mg/dl 14.2 13.1 3.7 NS


2Error


y ***: p<0.001.

3.4 Discusión

Este trabajo buscaba comparar la suplementación con dos niveles de Li utilizando como

principal fuente lipídica una mezcla de dos recursos tradicionalmente usados en la

suplementación de vacas lecheras (HA y SA) sobre el perfil de AG de la leche, en

especial sobre la concentración de Ru y TVa. La literatura es abundante en señalar que

el incremento del Li en el suplemento aumenta las concentraciones de Ru y TVa en la

leche (AbuGhazaleh et al., 2003; Bu et al., 2007; Huang et al., 2008); sin embargo, los

efectos son variables según la fuente de Li (Khanal y Olson, 2004; Paradis et al., 2008).

Castaño et al. (2013) evaluaron la SA y la HA como principales fuentes lipídicas de Li y

encontraron que a diferencia de la SA, la HA es una buena alternativa para incrementar

los niveles de Ru y TVa.

Se preparó un suplemento con un contenido de Li similar al utilizado por Castaño et al.

(2013), con el cual dichos autores evidenciaron un incremento en la concentración de Ru

y TVa en la grasa láctea al utilizar HA como principal fuente lipídica y otro cuya

composición nutricional fuera similar al anterior pero con mayor concentración de Li y de

lípidos. En los dos suplementos se utilizó como principal fuente de Li la mezcla de HA y

SA (relación 4.8 : 1) presumiendo que la mayor proporción de HA con respecto a la SA

podría evitar el efecto negativo de la SA sobre la concentración TVa y Ru encontrado por

Castaño et al. (2013). De tal manera se esperaba documentar el efecto de aumentar la

Capítulo 3

105

concentración de Li utilizando una mezcla de las dos fuentes (HA y SA) sobre el perfil de

AG lácteos.


No se presentaron diferencias en el consumo de MS asociadas a las concentraciones de

Li o de lípidos que fueron mayores en el tratamiento A. Algunos autores han sugerido

que al incrementar la grasa en la dieta se puede disminuir el consumo de MS (Schauff y

Clark, 1992) y que este efecto aumenta con el incremento en la proporción de AG

insaturados en el suplemento (Firkins y Eastridge, 1994; Bremmer et al., 1998) lo cual no

fue observado en nuestro experimento. Concentraciones mayores del 8 ó 9 % de grasa

en la dieta disminuyen el consumo de MS (Palmquist y Jenkins, 1980), mientras que en

las revisiones de experimentos con vacas en pastoreo Schroeder et al. (2004) y Bargo et

al. (2003) no encontraron diferencias en el consumo MS al suplementar con grasa. En

nuestro trabajo, la grasa representó el 5.4 y 6.4 % del total de la MS consumida para los

tratamientos B y A respectivamente, mientras que la grasa proveniente de los

suplementos fue 3.2 y 4.2 % para los tratamientos B y A respectivamente. El NRC (2001)

recomienda que no se debe sobrepasar el 3 al 4 % de grasa en la dieta proveniente del

suplemento.

El consumo de FDAn y de CNFn proveniente del suplemento fue menor para el

tratamiento A, mientras que el consumo de lignina fue mayor; sin embargo, el consumo

total de estas fracciones del alimento fue similar entre los tratamientos. La ausencia de

diferencias en los consumos de MS y nutrientes sugiere que los principales efectos que

se presentaron en este estudio en otras variables estarían principalmente asociados al

perfil de AG. En este sentido se puede señalar que el consumo de Li en el tratamiento A

fue un 31 % superior al B.

El incremento en el consumo de grasa se debió al suplemento, ya que los consumos de

extracto etéreo provenientes del forraje fueron similares entre los dos tratamientos. El

suplemento B aportó el 59.0 % de la grasa en la dieta y el A el 66 %; aunque estos

suplementos sólo aportaron en promedio el 33.1 % de la MS consumida. El mayor

consumo de grasa del tratamiento A sugiere un mayor consumo de precursores.

La biosíntesis de Ru en la leche requiere una fuente de AG poliinsaturados como el Li y

106



Ln en el alimento, los cuales son biohidrogenados en el rumen supliendo una

combinación del precursor TVa y pequeñas cantidades del producto Ru en la glándula

mamaria (Mohammed et al., 2009). Un mayor consumo Li y Ln está relacionado con

elevados niveles TVa y Ru en la leche, aunque el consumo de precursores no es el único

factor que afecta la producción de Ru (Mohammed et al., 2009). El consumo total de

precursores fue mayor para el tratamiento A pero las concentraciones de TVa y Ru en la

leche no fueron mayores. Castaño et al. (2013).encontraron incrementos en TVa y Ru

cuando las vacas consumieron 300 g / d de precursores y 179 g / d de Li, cantidades

similares a las del tratamiento B (281 g / d y 193 g / d de precursores y de Li

respectivamente). El incremento en el consumo de Li y de precursores TVa y Ru del

tratamiento A con respecto al tratamiento B fue del 31.1 % y 21.4 % respectivamente, lo

cual no fue suficiente para generar un incremento en la concentración de TVa y Ru

lácteos.

La composición de los forrajes puede afectar la concentración de Ru en la leche

(Lourenço et al., 2007). El forraje fresco es una fuente rica en Ln (Mohammed et al.,

2009) y su concentración en los forrajes es directamente proporcional al contenido de Ru

en leche (Mel´uchová et al., 2008). El forraje fue la principal fuente de Ln y el consumo

de Ln proveniente del forraje no se vio afectado por los tratamientos, de tal manera que

no es posible asociar el consumo de Ln proveniente del forraje con variaciones en Ru de

la leche.


La producción y composición de la leche fue similar para los dos tratamientos. La SA

contiene factores tóxicos como el gosipol (Zhang et al., 2007b) que puede afectar la

producción láctea (Lindsey et al., 1980) si se suministra por encima de los niveles

recomendados (Coppock et al., 1987; Arieli, 1998; Zhang et al., 2007a). Aunque en este

trabajo no se determinó la concentración de gosipol, es probable que los niveles

consumidos fueran lo suficientemente bajos como para modificar la eficiencia en el uso

de la energía por parte del animal. En este trabajo el consumo de SA fue de 0.47 y 0.73

Kg / d para los tratamiento B y A respectivamente, que corresponden al 3 y al 5 % de la

MS consumida en los tratamientos B y A respectivamente; estos valores son inferiores a

lo utilizado por Castaño et al. (2013) quienes con 1.5 Kg de SA / d (8.6 % de la MS

consumida) encontraron disminución en la producción láctea y también son inferiores al

Capítulo 3

107

máximo recomendado en la literatura (15 % de la ración ó 3 a 4 Kg/vaca/d; Coppock et

al., 1987; Arieli, 1998; Zhang et al., 2007a).


La composición de AG puede indicar sobre la fuente de precursores (Barber et al., 1997).

Los AG hasta C12, la mayoría de C14:0 y cerca del 50 % de C16:0 son sintetizados en la

glándula mamaria a partir del acetato y butirato producidos por la degradación ruminal de

los carbohidratos de la dieta, mientras que una pequeña cantidad de C14:0, cerca del 50

% de C16:0 y todos los AG de C18 son extraídos de la sangre arterial (Enjalbert et al.,

1998). El tratamiento A presentó menor concentración de los AG C6:0, C12:0 y C16:0,

además de una tendencia hacia menor concentración de C8:0 y C10:0 que como se

mencionó anteriormente son sintetizados en la glándula mamaria. Aunque no se encontró

una diferencia significativa entre los tratamientos para la concentración de los AG de

novo, hay evidencia para suponer que el tratamiento A presentó menor síntesis de AG,

debido a la menor concentración C6:0, C12:0 y C16:0, una tendencia a una menor

concentración de C8:0, C10:0 y de AG de cadena corta (<C12), además a una tendencia

a mayor concentración de AG de preformados.

La biosíntesis de Ru en la leche depende de la cantidad de sustrato consumido, del

grado de biohidrogenación en el rumen y de la actividad de la enzima Δ9desaturasa en

el tejido mamario (Mohammed et al., 2009). El suministro de lípidos con elevado

contenido de AG insaturados tiene un efecto positivo sobre el contenido de Ru y TVa en

la leche (Dhiman et al., 2000) especialmente si las fuentes lipídicas contienen niveles

elevados de Li (Bu et al., 2007). En nuestro experimento, las concentraciones y las

producciones diarias de TVa y Ru no se afectaron al incrementar el nivel de Li en el

suplemento, de tal manera que es probable que otros aspectos relacionados con la

biohidrogenación en el rumen y con la actividad de la Δ9desaturasa a nivel de la

glándula mamaria se asocien con la ausencia de un incremento en la concentración de

Ru al suministrar el tratamiento A.

La variación del Ru está relacionada con diferencias en la acción de la Δ9desaturasa

(Corl et al., 2001) pues entre el 75 al 90% del Ru en la leche se deriva de la

Δ9desaturación del TVa (Bauman et al., 2008) y al inhibir la actividad de la

Δ9desaturasa se disminuye la proporción de Ru en la leche (Griinari et al., 2000). Dos

108



AG ciclopropenos, el malválico y el estercúlico, se presentan en la SA (alrededor de 1%

del aceite; Coppock et al., 1987) e inhiben la enzima Δ9desaturasa (Cook et al., 1976). El

mayor consumo de SA con el tratamiento A podría explicar la ausencia de un incremento

de Ru en la leche al suministrar el suplemento A. Aunque no se midió la actividad de la

Δ9desaturasa, los resultados sugieren que esta enzima fue más activa con el tratamiento

A ya que se encontró menor concentración de los sustratos y mayor de los productos de

la enzima, sumado a un mayor índice calculado de actividad de la Δ9desaturasa. La

biohidrogenación en el rumen produce ciclopropano que no es capaz de inhibir la

Δ9desaturasa (Cook et al., 1976) y nuestros resultados indican que aparentemente los

AG ciclopropenos se inactivaron en el rumen o que se consumieron en una cantidad

insuficiente como para inactivar la actividad de la Δ9desaturasa.

El Ru y el TVa son producidos como intermediarios de la biohidrogenación de AG

insaturados en el rumen (AbuGhazaleh, 2008; Bauman et al., 2008), de tal manera que el

suministro de lípidos con elevado contenido de AG insaturados tiene un efecto positivo

sobre el contenido de Ru y TVa en la leche, siempre y cuando el aceite esté disponible a

los microorganismos del rumen para la biohidrogenación (Dhiman et al., 2000; Khanal y

Olson, 2004; Paradis et al., 2008). Sin embargo, la completa biohidrogenación de los Li y

Ln produce el ácido esteárico (Doreau y Chilliard, 1997), por lo que se han buscado

estrategias para reducir la biohidrogenación ruminal hacia ácido esteárico (Vlaeminck et

al., 2008) y permitir un mayor flujo de intermediarios hacia el intestino delgado

(especialmente Ru y el TVa; Odongo et al., 2007; Aldai et al., 2008), dentro de dichas

estrategias resalta el suministro de ionóforos (Odongo et al., 2007; Aldai et al., 2008),

aceites marinos (AbuGhazaleh et al., 2003; Vlaeminck et al., 2008) y de algas (Vlaeminck

et al., 2008; AlZahal et al., 2008). Una mayor biohidrogenación en el rumen podría

explicar la ausencia de un incremento en la concentración de TVa y Ru al suministrar el

tratamiento A debido al mayor consumo de SA, pues Pires et al. (1997) y Harvatine et al.

(2002) indican que existe una extensa biohidrogenación de los AG de la SA; además,

Castaño et al. (2013) encontraron que la SA no logró incrementar la concentración de Ru

en la leche y los autores sugieren que probablemente esto se debió en parte a una mayor

biohidrogenación de los AG de la SA.

Otros cambios en el perfil de AG son aún más difíciles de explicar. La concentración de

C17:1t9 en la grasa láctea fue menor para el tratamiento A, lo cual indica posibles

Capítulo 3

109

diferencias en los procesos de biohidrogenación. Se presentó una tendencia a

incrementar la concentración de C18:1c9 con el tratamiento A y este AG puede provenir

de la sangre (Enjalbert et al., 1998) o a gracias a la acción de la Δ9desaturasa en la

glándula mamaria sobre ácido esteárico (Corl et al., 2001). La información obtenida no

permite explicar el motivo de estos cambios.

La relación entre el tipo de grasa en la dieta y varias enfermedades crónicas en humanos

se ha investigado ampliamente, incluyendo las enfermedades cardiovaculares (Jacobs et

al., 2011). Las enfermedades coronarias en la mayoría de los casos se deben a la

obstrucción de los vasos por aterosclerosis o trombosis, de manera aislada o en

combinación (Ulbricht y Southgate, 1991). El A presentó el menor índice de

aterogenicidad que concuerda con la menor concentración de C12:0 y C16:0, y mayor

concentración de AG insaturados para este tratamiento. El índice de trombogenicidad fue

menor para el tratamiento A lo cual también puede ser explicado por la menor

concentración de C16:0 y mayor concentración de AG insaturados para este tratamiento.

Una disminución en la proporción de AG saturados puede ser benéfico para la salud

humana (Jacobs et al., 2011). Un aspecto importante en el perfil de AG y su relación con

la salud humana es la concentración de AG saturados de cadena corta, como el C12:0 y

C14:0, ya que según Liu et al. (2007) al reducir estos AG se observan efectos positivos

sobre la salud humana.

3.5 Conclusiones

El tratamiento alto no logró incrementar la concentración de los ácidos trans-

vaccénico y ruménico; además, presentó un mayor índice calculado de actividad

de la Δ9desaturasa (0.37; p<0.05), lo cual sugiere una extensa biohidrogenación

en el rumen. El tratamiento A incrementó los AG insaturados, disminuyó los

saturados (35.1 y 60.0 % respectivamente; p<0.05) y presentó menores índices

de aterogenicidad y trombogenicidad (1.79 y 3.22 respectivamente; p<0.05).

3.6 Agradecimientos


elaboración de este trabajo. Al Laboratorio de Nutrición Animal de la Facultad de

Medicina Veterinaria y de Zootecnia -Unal, Sede Bogotá-, al Centro de Investigación

110



Agropecuario Marengo -Unal, Sede Bogotá- y al Grupo de Investigación en Nutrición

Animal de la Facultad de Medicina Veterinaria de y de Zootecnia -Unal, Sede Bogotá- por

el apoyo en la fase experimental y trabajo en el laboratorio.

3.7 Referencias

ABUGHAZALEH, A. A. 2008. Effect of fish oil and sunflower oil supplementation on milk conjugated linoleic acid content for grazing dairy cows. Anim. Feed Sci. and Technol. 141(3-4):220-232.

ABUGHAZALEH, A. A.; FELTON, D. O. y IBRAHIM, S. A. 2007. Milk conjugated linoleic acid response to fish oil and sunflower oil supplementation to dairy cows managed under two feeding systems. J. Dairy Sci. 90(10):4763-4769.



ALDAI, N.; DUGAN, M. E. R.; KRAMER, J. K. G.; MIR, P. S. y MCALLISTER, T. A. 2008. Non-ionophore antibiotics do not affect the trans-18:1 and CLA composition in beef adipose tissue. J. Anim Sci. 86(12):3522-3532.

ALLEN, M. S. 2000. Effects of diet on short-term regulation of feed intake by lactating dairy cattle. J. Dairy Sci. 83(7):1598-1624.


AOAC. 2006. Official methods of analysis of AOAC International. 18a ed. Association Official to Analytical Chemistry Intenational, Maryland.


ARIELI, A. 1998. Whole cottonseed in dairy cattle feeding: a review. Anim. Feed Sci. and Technol. 72(1-2):97-110.

BARBER, M. C.; CLEGG, R. A.; TRAVERS, M. T. y VERNON, R. G. 1997. Lipid metabolism in the lactating mammary gland. Biochim. Biophys. Acta (BBA) - Lipids and Lipid Metabolism. 1347(2-3):101-126.

BARGO, F.; MULLER, L. D.; KOLVER, E. S. y DELAHOY, J. E. 2003. Invited review: Production and digestion of supplemented dairy cows on pasture. J. Dairy Sci.

86(1):1-42.

BAUMAN, D. E.; PERFIELD, J. W., II; HARVATINE, K. J. y BAUMGARD, L. H. 2008. Regulation of fat synthesis by conjugated linoleic acid: lactation and the ruminant

Capítulo 3

111

model. J. Nutr. 138(2):403-409.



91(6):2399-2407.

BREMMER, D. R.; RUPPERT, L. D.; CLARK, J. H. y DRACKLEY, J. K. 1998. Effects of chain length and unsaturation of fatty acid mixtures infused into the abomasum of lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 81(1):176-188.


CASTAÑO, G. A.; PABÓN R., M. L. y CARULLA F., J. E. 2013. Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla de algodón sobre el contenido de los ácidos trans-vaccénico (C18:1trans-11) y ruménico (C18:2cis-9, trans-11) en la leche de vacas pastando Pennisetum clandestinum. Master Science Producción Animal, Universidad Nacional de Colombia, Colombia.


COOK, C. W. 1964. Symposium on nutrition of forages and pastures: collecting forage samples representative of ingested material of grazing animals for nutritional studies. J. Anim Sci. 23(1):265-270.


11(9):705-711.






131(3-4):168-206.

DHIMAN, T. R.; HELMINK, E. D.; MCMAHON, D. J.; FIFE, R. L. y PARIZA, M. W. 1999. Conjugated linoleic acid content of milk and cheese from cows fed extruded oilseeds. J. Dairy Sci. 82(2):412-419.

112



DHIMAN, T. R.; SATTER, L. D.; PARIZA, M. W.; GALLI, M. P.; ALBRIGHT, K. y TOLOSA, M. X. 2000. Conjugated linoleic acid (CLA) content of milk from cows offered diets rich in linoleic and linolenic acid. J. Dairy Sci. 83(5):1016-1027.

DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 1997. Digestion and metabolism of dietary fat in farm animals. Br. J. Nutr. 78(01):S15-S35.

ENJALBERT, F.; NICOT, M. C.; BAYOURTHE, C. y MONCOULON, R. 1998. Duodenal infusions of palmitic, stearic or oleic acids differently affect mammary gland metabolism of fatty acids in lactating dairy cows. J. Nutr. 128(9):1525-1532.

FIRKINS, J. L. y EASTRIDGE, M. L. 1994. Assessment of the effects of iodine value on fatty acid digestibility, feed intake, and milk production. J. Dairy Sci. 77(8):2357-2366.

FLOWERS, G.; IBRAHIM, S. A. y ABUGHAZALEH, A. A. 2008. Milk fatty acid composition of grazing dairy cows when supplemented with linseed oil. J. Dairy Sci. 91(2):722-730.

GAGLIOSTRO, G. A.; RODRÍGUEZ, A.; PELLEGRINI, P.; GATTI, P.; MUSSET, G.; CASTAÑEDA, R. A.; COLOMBO, D. y CHILLIARD, Y. 2006. Efectos del suministro de aceite de pescado sólo o en combinación con aceite de girasol sobre las concentraciones de ácido linoleico conjugado (CLA) y omega 3 (n-3) en leche de cabra. Rev. Argent. Prod. Anim. 26:71-87.

GRIINARI, J. M.; CORL, B. A.; LACY, S. H.; CHOUINARD, P. Y.; NURMELA, K. V. V. y BAUMAN, D. E. 2000. Conjugated linoleic acid is synthesized endogenously in

lactating dairy cows by 9-Desaturase. J. Nutr. 130(9):2285-2291.

HARVATINE, D. I.; FIRKINS, J. L. y EASTRIDGE, M. L. 2002. Whole linted cottonseed as a forage substitute fed with ground or steam-flaked corn: digestibility and performance. J. Dairy Sci. 85(8):1976-1987.


HOLDEN, L. A.; MULLER, L. D. y FALES, S. L. 1994. Estimation of intake in high producing Holstein cows grazing grass pasture. J. Dairy Sci. 77(8):2332-2340.


HUANG, Y.; SCHOONMAKER, J. P.; BRADFORD, B. J. y BEITZ, D. C. 2008. Response of milk fatty acid composition to dietary supplementation of soy oil, conjugated linoleic acid, or both. J. Dairy Sci. 91(1):260-270.

HUANG, Y.; SCHOONMAKER, J. P.; OREN, S. L.; TRENKLE, A. y BEITZ, D. C. 2009. Calcium salts of CLA improve availability of dietary CLA. Livest. Sci. 122(1):1-7.

IP, C.; BANNI, S.; ANGIONI, E.; CARTA, G.; MCGINLEY, J.; THOMPSON, H. J.; BARBANO, D. y BAUMAN, D. 1999. Conjugated linoleic acid-enriched butter fat alters mammary gland morphogenesis and reduces cancer risk in rats. J. Nutr.

129(12):2135-2142.

Capítulo 3

113



KAPS, M. y LAMBERSON, W. R. 2004. Biostatistics for animal science., London.



114(2-3):164-175.


LICITRA, G.; HERNANDEZ, T. M. y VAN SOEST, P. J. 1996. Standardization of procedures for nitrogen fractionation of ruminant feeds. Anim. Feed Sci. and Technol. 57(4):347-358.


LINDSEY, T. O.; HAWKINS, G. E. y GUTHRIE, L. D. 1980. Physiological responses of lactating cows to gossypol from cottonseed meal rations. J. Dairy Sci. 63(4):562-

573.

LOOR, J. J.; FERLAY, A.; OLLIER, A.; DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 2005a. Relationship among trans and conjugated fatty acids and bovine milk fat yield due to dietary concentrate and linseed oil. J. Dairy Sci. 88(2):726-740.

LOOR, J. J.; FERLAY, A.; OLLIER, A.; UEDA, K.; DOREAU, M. y CHILLIARD, Y. 2005b. High-concentrate diets and polyunsaturated oils alter trans and conjugated isomers in bovine rumen, blood, and milk. J. Dairy Sci. 88(11):3986-3999.

LOURENÇO, M.; VAN RANST, G.; DE SMET, S.; RAES, K. y FIEVEZ, V. 2007. Effect of grazing pastures with different botanical composition by lambs on rumen fatty acid metabolism and fatty acid pattern of longissimus muscle and subcutaneous fat. Animal. 1(04):537-545.

LYNCH, J. M.; BARBANO, D. M. y FLEMING, J. R. 2007. Determination of the Lactose Content of Fluid Milk by Spectrophotometric Enzymatic Analysis Using Weight Additions and Path Length Adjustment: Collaborative Study. J. AOAC Inter.

90(1):196-215.

MEL´UCHOVÁ, B.; BLASKO, J.; KUBINEC, R.; GÓROVÁ, R.; DUBRAVSKÁ, J.; MARGETÍN, M. y SOJÁK, L. 2008. Seasonal variations in fatty acid composition of pasture forage plants and CLA content in ewe milk fat. Small Ruminant Res. 78(1-

3):56-65.

MOHAMMED, R.; STANTON, C. S.; KENNELLY, J. J.; KRAMER, J. K. G.; MEE, J. F.; GLIMM, D. R.; O'DONOVAN, M. y MURPHY, J. J. 2009. Grazing cows are more efficient than zero-grazed and grass silage-fed cows in milk rumenic acid

114



production. J. Dairy Sci. 92(8):3874-3893.



MUIR, J. P. 2002. Hand-Plucked forage yield and quality and seed production from annual and short-lived perennial warm-season legumes fertilized with composted manure. Crop Sci. 42(3):897-904.


NRC. 2001. Nutrient requerimients of dairy cattle. 7a ed. National Academy Press, Washington DC.

ODONGO, N. E.; OR-RASHID, M. M.; BAGG, R.; VESSIE, G.; DICK, P.; KEBREAB, E.; FRANCE, J. y MCBRIDE, B. W. 2007. Long-effects of feeding monensin on milk fatty acid composition in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 90(11):5126-5133.

PALMQUIST, D. L. y JENKINS, T. C. 1980. Fat in lactation rations: Review. J. Dairy Sci.

63(1):1-14.


86(7):1624-1636.

PARK, H. S.; RYU, J. H.; HA, Y. L. y PARK, J. H. Y. 2001. Dietary conjugated linoleic acid (CLA) induces apoptosis of colonic mucosa in 1,2-dimethylhydrazine-treated rats: a possible mechanism of the anticarcinogenic effect by CLA. Br. J. Nutr.

86(05):549-555.

PIRES, A. V.; EASTRIDGE, M. L.; FIRKINS, J. L. y LIN, Y. C. 1997. Effects of heat treatment and physical processing of cottonseed on nutrient digestibility and production performance by lactating cows. J. Dairy Sci. 80(8):1685-1694.

SCHAUFF, D. J. y CLARK, J. H. 1992. Effects of feeding diets containing calcium salts of long-chain fatty acids to lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 75(11):2990-3002.


86(10):3237-3248.


SUNVOLD, G. D. y COCHRAN, R. C. 1991. Technical note: evaluation of acid detergent lignin, alkaline peroxide lignin, acid insoluble ash, and indigestible acid detergent fiber as internal markers for prediction of alfalfa, bromegrass, and prairie hay digestibility by beef steers. J. Anim Sci. 69(12):4951-4955.

THIEX, N. J.; MANSON, H.; ANDERSON, S. y PETACCHI, F. 2002. Determination of crude protein in animal feed, forage, grain, and oilseeds by using block digestion with a copper catalyst and steam distillation into boric acid: collaborative study. J.

Capítulo 3

115

AOAC Inter. 85(2):309-317.



ULBRICHT, T. L. V. y SOUTHGATE, D. A. T. 1991. Coronary heart disease: seven dietary factors. The Lancet. 338(8773):985-992.

VAN SOEST, P. J.; ROBERTSON, J. B. y LEWIS, B. A. 1991. Methods for dietary fiber, neutral detergent fiber, and nonstarch polysaccharides in relation to animal nutrition. J. Dairy Sci. 74(10):3583-3597.


VLAEMINCK, B.; MENGISTU, G.; FIEVEZ, V.; DE JONGE, L. y DIJKSTRA, J. 2008. Effect of in vitro docosahexaenoic acid supplementation to marine algae-adapted and unadapted rumen inoculum on the biohydrogenation of unsaturated fatty acids in freeze-dried grass. J. Dairy Sci. 91(3):1122-1132.

WILLIAMS, C. H.; DAVID, D. J. y IISMAA, O. 1962. The determination of chromic oxide in faeces samples by atomic absorption spectrophotometry. J. Agri. Sci. 59(03):381-

385.

ZHANG, W. J.; XU, Z. R.; PAN, X. L.; YAN, X. H. y WANG, Y. b. 2007a. Advances in gossypol toxicity and processing effects of whole cottonseed in dairy cows feeding. Livest. Sci. 111(1-2):1-9.

ZHANG, W. J.; XU, Z. R.; ZHAO, S. H.; SUN, J. Y. y YANG, X. 2007b. Development of a microbial fermentation process for detoxification of gossypol in cottonseed meal. Anim. Feed Sci. and Technol. 135(1-2):176-186.

.

116



Conclusiones y recomendaciones

117

4. Conclusiones y recomendaciones

4.1 Conclusiones

La alimentación es el principal factor para incrementar la concentración delos ácidos

transvaccénico y ruménico en leche. Aumentar el consumo de forraje fresco,

incrementar el consumo de ácido linoleico utilizando diferentes fuentes lipídicas y de

ácido linolénico del forraje, permite incrementar el contenido lácteo de los ácidos

transvaccénico y ruménico. El control de las condiciones ruminales con ionóforos y ácido

docosahexaenoico potencializa el suministro de ácidos grasos insaturados. La harina de

arroz y la semilla de algodón son dos fuentes lipídicas que aparentemente pueden

incrementar la concentración de estos ácidos grasos.

El suministro de harina de arroz incrementó la concentración de los ácidos

transvaccénico (3.11 %; p<0.01) y ruménico (1.41 %; p<0.001) en la grasa láctea;

además, disminuyó los índices de aterogenicidad (1.85; p<0.05) y trombogenicidad (3.09;

p<0.01). La semilla de algodón no logró aumentarla proporción de estos ácidos grasos y

de ácidos grasos insaturados, ni mejorar los índices de aterogenicidad y trombogenicidad

a pesar de que el consumo de ácido linoleico y linolénico fue similar a los del tratamiento

harina de arroz. Por el contrario, la semilla de algodón presentó mayores proporciones de

C18:0 (16.31 %; p<0.001) y menores relaciones ruménico / transvaccénico (0.39;

p<0.01) y C14:1 / C14:0 (0.08; p<0.05) indicando mayor biohidrogenación y menor

actividad de la enzimaΔ9desaturasa. A diferencia de la semilla de algodón, la harina de

arroz es una buena alternativa de suplementación para las vacas lecheras en pastoreo

pues induce una mayor concentración de transvaccénico y ruménico en la leche, y

mayor concentración de ácidos grasos insaturados (34.9; p<0.01) que se sugiere son

mejores para la salud del consumidor.

Cuando se suministró un concentrado con elevada concentración de ácido linoleico

(4.28% de la materia seca) que contenían como principal fuente lipídica de ácido linoleico

118



una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) no se logró

incrementar la concentración de los ácidos transvaccénico y ruménico y se presentó un

mayor índice calculado de actividad de la enzima Δ9desaturasa (0.37; p<0.05), lo cual

sugiere una extensa biohidrogenación en el rumen. También incrementó los ácidos

grasos insaturados, disminuyó los saturados (35.1 y 60.0% respectivamente; p<0.05) y

presentó menores índices de aterogenicidad y trombogenicidad (1.79 y 3.22

respectivamente; p<0.05).

4.2 Recomendaciones

La harina de arroz incrementa la concentración de los transvaccénico y ruménico en la

grasa láctea, pero sería importante determinar si su combinación con aceite de pescado

o ionóforos permite maximizar su efecto sobre la concentración de estos ácidos grasos.

La semilla de algodón no presentó el efecto esperado sobre la concentración de

transvaccénico y ruménico en la grasa láctea, probablemente por una mayor

biohidrogenación o por el efecto de los ácidos ciclopropeno. Por lo tanto, evaluar el

ambiente ruminal y la actividad de la enzima Δ9desaturasa de manera que se pueda

determinar el motivo por el cual en condiciones pastoriles se presentó menor

concentración de estos ácidos grasos.

El suministro de La semilla de algodón ya sea como principal fuente lipídica o como parte

de una mezcla de harina de arroz y semilla de algodón (relación 4.8 : 1) no incrementó la

concentración de transvaccénico y ruménico en la grasa láctea, probablemente debido a

una extensa biohidrogenación. Sería importante evaluar si la adición de aceites vegetales

podría disminuir la biohidrogenación e incrementar el flujo de transvaccénico y ruménico

hacia la glándula mamaria.

Anexos

119

5. Anexos

Anexo 1. Características de los animales al iniciar el experimento y distribución de los animales a

los tratamientos en el primer experimento

Ítem

Edad(años)

Días de lactancia

Peso vivo(kg)

Producción láctea(kg/d)

Distribución de los tratamiento según el

periodo1

1 2 3

Cuadrado 1

Vaca

1 6,06 95 593,00 20,7 C HA SA 2 6,01 98 539,00 30,7 SA C HA 3 4,95 103 591,00 26,6 HA SA C

Promedio 5,7 98,7 574,3 26,0 DE 0,6 4,0 30,6 5,0

Cuadrado 2 Vaca

1 2,58 149 472,50 19,5 HA SA C

2 2,92 152 498,00 15,8 SA C HA 3 2,60 153 501,50 17,1 C HA SA

Promedio 2,7 151,3 490,7 17,5 DE 0,2 2,1 15,8 1,9 General Promedio 4,2 125,0 532,5 21,7 DE 1,7 29,0 50,7 5,8

1C: suplemento con bajo nivel de ácido linoléico; HA: suplemento con harina de arroz como la

principal fuente de ácido linoléico; SA: suplemento con semilla de algodón como la principal fuente de ácido linoléico.

120



Anexo 2. Características de los animales al iniciar el experimento y distribución de los animales a

los tratamientos en el segundo experimento

Ítem Grupo Edad(años

) Peso

vivo(kg)

Días de lactanci

a

Producción láctea(kg/d

)

Distribución de los tratamientos alPeriodo

1

1 2

Vaca

1 1 6,1 499 151 18,2 A B 2 2 6,0 570 174 19,2 B A 3 1 4,9 497 147 19,2 A B 4 2 2,6 588 232 18,3 B A 5 1 2,9 566 107 19,5 A B 6 2 2,6 542 197 21,0 B A Promedio

4,2 544 168 19,2

DE 1,7 35 40 0,9

1B:suministro de un suplemento con bajo nivel de ácido linoleico (2.64 g / 100 g MS) y A:

suministro de un suplemento con alto nivel bajo de ácido linoleico (4.08 g / 100 gMS).

Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla ... · Efecto de la suplementación con...

Documents

Transcript of Efecto de la suplementación con harina de arroz y semilla ... · Efecto de la suplementación con...