Santi Cerrato Tomàs

Dept. Farmacologia, Fac. VeterinàriaUniversitat Autònoma de BarcelonaUNIVET, Parc Científic de la UAB.

Efectes del cannabinoide palmitoiletanolamida (PEA) sobre la

resposta inflamatòria en gossos Beagle

Compostos químics que interaccionen amb els receptors cannabinoides.

Originàriament descoberts en la planta del cànnabis.

Tipus:fitocannabinoides (plantes)endocannabionoides (animals) cannabinoides sintètics (produïts artificialment).

CANNABINOIDES

És un endocannabinoide que es troba a baixes concentracions ala majoria d‘animals.(Muccioli et al. 2009; Ozalp and Barroso , 2009; Chapman, 2004)

estructura química del PEA

Increment dels seus nivells durant processos inflamatoris i degeneratius (paper autoprotector). (Sagar et al., 2009; Re et al. 2007)

Activitat autacoide antagonista en front la inflamació i el dolor.

Autocoide antagonista de lesions locals (ALIA). (Lambert et al., 2002, Jack, 1996)

PALMITOILETANOLAMIDA (PEA)

1. Efectes immunomoduladors del PEA sobre els mastòcits cutanis de gos.

2. Efectes del PEA, administrat per via oral, sobre la resposta inflamatòria induïda per antigen en gossos Beagle.

3. Efectes de l’adelmidrol tòpic sobre la resposta cel·lular induïda per antigen en gossos Beagle.

PROJECTES

1. Efectes immunomoduladors del PEA sobre els mastòcits cutanis de gos.

PEA I MASTÒCITS CUTANIS

Objectiu:

Avaluar la capacitat del PEA per inhibir la resposta dels mastòcits cutanis de gos induïts per anti-IgE en front l’alliberació d’histamina, PGD2 i TNFα.

PEA I MASTÒCITS CUTANIS

HistaminaPGD2TNFα

anti-IgE

IgE

PEA(10-5M -10-8M)

Mètode:

PEA I MASTÒCITS CUTANIS

[PEA] (M)

Med

iato

r rel

ease

inhi

bitio

n(%

of a

nti-I

gE c

ontro

l)

0

20

40

60

80

100

*

**

**

*

****

10-8 10-7 10-6 10-5

Efectes inhibitoris del PEA en l’alliberació dels mediadors en dispersions de mastòcits cutanis induïts. (n=6) * P< 0.05 **P < 0.01.

histamina

PGD2

TNF-alfa

PEA I MASTÒCITS CUTANIS

Conclusió:

Efectes beneficiosos deguts:capacitat moduladora per reduirl’alliberament de mediadors(preformats i de nova síntesis).

Possible agent terapèutic:malalties inflamatòries de la pellmalalties cutànies que impliquinuna hiperreactivitat delsmastòcits.

PEA I MASTÒCITS CUTANIS

2. Efectes del PEA, administrat per via oral, sobre la resposta inflamatòria induïda per antigen en gossos Beagle.

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

Objectiu:

Avaluar els efectes inhibitoris del PEA sobre la

reacció al·lèrgica cutània induïda per diferents

estímuls immunològics i no immunològics.

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

PEA3, 10, 30 mg/kg po

salíhistaminaantigenanti-IgE canina substancia P

Mètode:

area en estat basal (mm2) − area t(n) (mm2)% inhibició = x100

area en estat basal (mm2)

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

Efectes inhibitoris del PEA sobre les àrees de les pàpules induïdes per l’extracte d’Ascaris suum (a) i l’anti-IgE (b) canina en gossos Beagle conscients.(n=6) *P<0.05 and **P<0.01

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

extracte d’Ascaris suum anti-IgE canina

Nivells plasmàtics de PEA i la inhibició de les àrees de les pàpules induïdes per extracte de A. suum i anti-IgE canina, després de l’administració oral de PEA a una dosi de 30 mg/kg (n=4 i n=6) *P<0.05 and **P<0.01

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

Conclusions:

El tractament de gossos hipersensibilitzats amb una única dosi oral de PEA va reduir de forma significativa les reaccions al·lèrgiques en forma de pàpules a la pell.

La dosi de PEA que va produir l’efecte antial·lèrgic màxim va ser de 10 mg/kg.

PEA I LA RESPOSTA INFLAMATÒRIA

3. Efectes de l’adelmidrol tòpic sobre la resposta cel·lular induïda per antigen en gossos Beagle.

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

Objectiu:

Avaluar l’efecte antiinflamatori de l’adelmidrol

tòpic en gossos Beagle hipersensibilitzats sobre

la resposta cel·lular cutània induïda per antigen.

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

20 min després:mesura de la pàpula 1 biòpsia

24h després dela 2ª inducció

2ª inducció de la pàpula

Dia -3 Dia -2 Dia -1 Dia 0 Dia +1

1ª inducció de la pàpula

1 biòpsia24h després dela 1ª inducció

pauta d’administració de l’adelmidrol

20 min després: mesura de la pàpula

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

Superficial

Mitja

Profunda

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

↓ mastòcits

↓ edema↓ hiperèmia

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

MASTÒCITS EN LES BIOPSIES RECOLLIDESABANS I DESPRÉS DEL TRACTAMENT AMB ADELMIDROL

Zona de la biòpsia

Abans del tractament

(MITJANA + ESM)

Després del tractament

(MITJANA + ESM)valor P

Superficial 5.5 ± 0.7 3.2 ± 0.4 < 0.001

Mitja 2.4 ± 0.3 1.8 ± 0.3 0.07

Profunda 0.7 ± 0.1 0.3 ± 0.1 0.01

Quantificació de mastòcits (400X) en biòpsies recollides abans i després del tractament tòpic amb adelmidrol.

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

Àrea de les pàpules (mm2) i percentatge d’inhibició observats abansi després de 3 dies de tractament.

ÀREA I INHIBICIÓ DE L’AREA DE LA PÀPULAABANS I DESPRÉS DEL TRACTAMENT AMB ADELMIDROL

CODI DEL GOS

CONTROLÀREA DE LA PÀPULA

(mm2)

TRACTAMENT Dia-3 ÀREA DE LA PÀPULA

(mm2)

INHIBICIÓ DE LA PÀPULA

(%)

A 166.1 ± 2.0 162.0 ± 2.2 2.4 ± 0.2

B 152.9 ± 1.0 166.9 ± 1.9 -9.2 ± 1.3

C 186.6 ± 1.3 185.2 ± 4.9 0.7 ± 2.0

D 214.2 ± 1.9 217.8 ± 8.0 -1.6 ± 4.7

E 190.9 ± 3.7 189.6 ± 0.9 0.7 ± 2.4

F 165.7 ± 1.7 168.7 ± 1.0 -1.8 ± 1.6

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

Conclusions:

Observacions macroscòpiques:no es van presentar diferències significatives a nivell de les pàpules.

Observacions microscòpiques: disminució en l’edema i hiperèmia.reducció significativa del número de mastòcits.

edema

hiperèmia

PEA I LA RESPOSTA CEL·LULAR IN VIVO

PEA • alliberament dels mediadors• número de mastòcits

• fase primerenca i tardana de la reacció inflamatòria

CONCLUSIONS FINALS

Moltes Gràcies!