Detección rápida de microorganismos. PhD Antonio Baldi Coll
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Detección rápida de microorganismosTendencias
Detección rápida de microorganismosTendencias
Antonio Baldi
Detección rápida de microorganismosTendencias
Niveles y análisis en alimentosComida para consumo inmediatoAerobic colony count 30ºC/48hValor recomendable < 10 UFC/gValor peligroso > 104 – 106 UFC/g (según tipo de alimento)
PatógenosValor recomendable Salmonella spp = 0 UFC/gValor recomendable S. aureus < 20 UFC/g
Materia primaCarne picadaValor recomendable E. coli < 50 UFC/gValor máximo aceptable E. coli < 500 UFC/g
Detección rápida de microorganismosTendencias
Análisis de parámetros microbiológicos
Métodos de análisis estandarizados• Fermentación en tubos múltiples• Cultivo de tubos positivos en medio de confirmación• Recuento según la cantidad más probable o filtrado en membrana, cultivo en medio apropiado, sub‐cultivo e identificación de cepas sospechosas
Tiempo de análisis: 16‐48 h, pudiendo extenderse hasta 72 h.
Robustos FiablesLargosCarosLaboratorios especializadosPersonal entrenado
Detección rápida de microorganismosTendencias
BiosensoresRobustos, compactos, fiables, fáciles de manejar, instrumentación sencilla
COSTE POR ANÁLISIS
Indicadores de calidad (E. coli)
Detección directa (sensibilidad)
• Rapidez• Frecuencia de muestreo
• Medida in situ
Patógenos
Muestreo y cultivo
Detección
• Disminución tiempo de cultivo• Mínimo consumo de reactivos
Detección rápida de microorganismosTendencias
Biosensores: dispositivo GTQInmunosensor impedimétrico para la medida directa de E.coli
E.coliTransductor impedimétrico
Detección rápida de microorganismosTendencias
Biosensores: dispositivo GTQInmunosensor impedimétrico para la medida directa de E.coli
• Pequeño tamaño, robustez – técnicas de microfabricación• Selectividad ‐ Inmunodetección• Detección directa ‐ Una única incubación• Sensibilidad ‐ límite de detección de 300 UFC/mL• Selectividad añadida – Impedancia ‐ detección de células viables• Rapidez – 1 h tiempo de análisis
Detección rápida de microorganismosTendencias
Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Funcionamiento
LOD = 300 UFC/mL
• Concentración más baja medida: 100 UFC/ml• Límite de detección: 300 UFC/ml
Detección rápida de microorganismosTendencias
Biosensores: dispositivo GTQ ‐ Selectividad
Detección de células viables
Células vivas
Células muertas
Vivas
Muertas
105 UFC/mL
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Biosensores: Inmunosensor GTQ ‐ Perspectivas
Inmunosensor GTQ• Potencial para la detección rápida y fiable de microorganismos en aguas• Medida directa• Detección eléctrica – instrumentación compacta y sencilla• Selectividad a la detección de microorganismos vivos – menos falsos positivos
Trabajo en curso• Mejora de la sensibilidad – Optimización de la geometría• Versatilidad – aplicación a la detección de otros microorganismos• Automatización – medida in‐situ