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DETECCIÓN DE MASTITIS BOVINA E IDENTIFICACIÓN DE MICROORGANISMOS PATOGENOS EN VACAS LECHERAS DEL SUR DE LA GUAJIRA ENIRA PAOLA RINCON FERNANDEZ UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO VALLEDUPAR 2019
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DETECCIÓN DE MASTITIS BOVINA E IDENTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS PATOGENOS EN VACAS LECHERAS DEL SUR DE LA
GUAJIRA
ENIRA PAOLA RINCON FERNANDEZ
UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES
BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
VALLEDUPAR
2019
DETECCIÓN DE MASTITIS BOVINA E IDENTIFICACIÓN DE
MICROORGANISMOS PATOGENOS EN VACAS LECHERAS DEL SUR
DE LA GUAJIRA
ENIRA PAOLA RINCON FERNANDEZ
Trabajo de grado presentado para optar por el título de Bacteriología y
Laboratorio Clínico
DIRECTOR:
TANNIA MELISSA DAVID VENEGAS
Msc Diseño, Gestión y Dirección de Proyectos
UNIVERSIDAD DE SANTANDER UDES
BACTERIOLOGÍA Y LABORATORIO CLÍNICO
VALLEDUPAR
2019
AGRADECIMIENTOS
A mis padres que estuvieron constantes en mi vida, brindándome siempre
su apoyo y entusiasmo para salir adelante en cada una de las etapas de mi
carrera.
A los docentes porque en el transcurso de estos años fueron pieza
fundamental en este camino de aprendizaje, por todos sus conocimientos,
consejos, motivación, regaños, esfuerzo, dedicación, cariño, amistad para
formarme como un profesional integral.
A TANNIA MELISA DAVID, Bacterióloga. Docente Universitaria de
Santander UDES. Por su dirección, orientación y paciencia en la ejecución
de este proyecto.
Finalmente, a todas aquellas personas, que de una u otra forma
colaboraron en la realización de este proyecto.
DEDICATORIA
Agradezco a Dios todo poderoso, por su infinito amor y darme la sabiduría de
avanzar por caminos que me llevan hacer mejor persona, por darme la
oportunidad de culminar mi carrera que será para el servicio de Él y de la
comunidad, por darme fortaleza cuando muchas veces quise caer, por proteger mi
caminar, y porque ha sido mi fuete de vida, sustento y nada me ha faltado en este
trayecto.
A mis padres Carlos Rincon y Danitza Fernandez, porque son el motor que
impulsan mi vida por su ejemplo, lucha y dedicación, son los mejores padres que
Dios me pudo regalar, su constancia por la vida, sus esfuerzos, paciencia,
dedicación y sobre todo el gran amor que me han dado, gracias por su apoyo sin
ustedes no sería lo que soy ahora, son mi ejemplo a seguir, de no detenerme
nunca ante cualquier circunstancia que se presente en la vida.
A mis hermanos que me inspiraran a superarme, son mi admiración y parte de mi
corazón, gracias por su apoyo, de ustedes también es este logro.
Gracias a cada persona con la que me he trazado en este caminar, de cada uno,
siempre me llevare algo bueno, pues me han ayudado a forjar como persona.
TABLA DE CONTENIDO
INTRODUCCIÓN ................................................................................................... 16
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA ................................................................ 18
1.1 DESCRIPCIÓN DEL PROBLEMA ................................................................ 18
1.2 JUSTIFICACIÓN .......................................................................................... 21
2. OBJETIVOS ....................................................................................................... 24
2.1 GENERAL .................................................................................................... 24
2.2 ESPECÍFICOS ............................................................................................. 24
3. MARCO TEÓRICO ............................................................................................ 25
3.1. ANTECEDENTES ....................................................................................... 25
3.2 BASES TEÓRICAS ...................................................................................... 31
3.2.1 Mastitis bovina. ...................................................................................... 31
3.2.2 Clasificación de la mastitis. .................................................................... 34
3.2.3 Factores predisponentes a la mastitis. ................................................... 35
3.2.4 Respuesta celular de la glándula mamaria. ........................................... 37
3.2.5 Manejo Higiénico-Sanitario del Proceso de ordeño. .............................. 37
3.2.6 Pruebas y métodos de detección. .......................................................... 39
3.2 Bases legales ............................................................................................... 41
4. MATERIALES Y MÉTODOS .............................................................................. 43
4.1 CLASIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN .................................................. 43
4.2 POBLACIÓN DE ESTUDIO, MUESTRA, TIPO DE MUESTREO, CRITERIOS
DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÓN ......................................................................... 43
4.2.1 Criterios de inclusión. ............................................................................. 43
4.2.2 Criterios de exclusión. ............................................................................ 44
4.3 SISTEMA DE VARIABLES ........................................................................... 44
4.4 Diseño metodológico .................................................................................... 45
5. RESULTADOS ................................................................................................... 48
6. DISCUSIÓN ....................................................................................................... 52
7. CONCLUSIONES .............................................................................................. 59
8. RECOMENDACIONES ...................................................................................... 61
9. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS ................................................................... 62
ANEXOS ................................................................................................................ 73
LISTA DE FIGURAS
Pág.
Figura 1. Resultados en el recuento de células somáticas
(RCS)
49
Figura 2. Resultados en la identificación del agente etiológico
51
LISTA DE TABLAS
Pág.
Tabla 1. Patógenos de la mastitis 32
Tabla 2. Patógenos contagiosos 32
Tabla 3. Rutina de ordeño 38
Tabla 4. Operacionalización de las variables
44
Tabla 5. Variables Buenas Practicas de Ordeño (BPO)
48
Tabla 6. Periodo de lactancia
50
Tabla 7. Número de partos
50
Tabla 8. Variables asociadas estadísticamente a Mastitis 51
LISTA DE ANEXOS
Pág.
ANEXO 1. Encuesta ……………………………………………
73
ANEXO 2. Toma de muestra…………………………………...
74
ANEXO 3. Cadena de custodia………………………………...
75
ANEXO 4. Sabana de registros de laboratorio para el
aislamiento e identificación de microorganismos…………….
76
ANEXO 5. Informes de Resultados Laboratorio Calidad e
inocuidad de la Leche……………………………………………
77
ANEXO 6. Pruebas bacteriológicas a muestras de leche
cruda……………………………………………………………….
78
ANEXO 7. Registro fotográfico…………………………………. 79
LISTA DE SÍMBOLOS Y ABREVIATURAS
BPG: Buenas Prácticas Ganaderas
CMT: California Mastitis Test
ICA: Instituto Colombiano Agropecuario
RCS: Recuento de Células Somáticas
SCS: Score de Células Somáticas
SNG: Solidos No Grasos
ST: Solidos Totales
TRAM: Tiempo de Reducción de Azul de Metileno
UFC: Unidad Formadora de Colonias
ULDESA: Unión de Lecheros del Sauce
GLOSARIO
Bovinos: Son una subfamilia de mamíferos placentarios que pertenece a la familia
Bovidae. Utilizado como la fuente principal de proteínas por medio de su carne y
leche.
Células somáticas: Están constituidas por una asociación de leucocitos y células
epiteliales. Los leucocitos se introducen en la leche en respuesta a la inflamación
que puede aparecer debido a una enfermedad o, a veces, a una lesión. Las células
epiteliales se desprenden del revestimiento del tejido de la ubre.
Fossomatic-FC: Equipo con alta capacidad completamente automatizada de
contar células somáticas, basado en el Principio de Citometría de flujo.
Glándulas mamarias: Órganos que, en todos los mamíferos, producen leche para
la alimentación de sus crías o hijos durante los primeros meses o semanas de vida.
Hato: Terreno rural destinado a la cría del ganado.
Leche: Es el producto de la secreción mamaria normal de animales bovinos,
bufalinos y caprinos lecheros sanos, obtenida mediante uno o más ordeños
completos, sin ningún tipo de adición, destinada al consumo en forma de leche
líquida o a elaboración posterior.
Mastitis: Es la enfermedad infectocontagiosa más común en el ganado bovino y se
define como la inflamación de la glándula mamaria que generalmente se presenta
como una respuesta a la invasión por microorganismos y se caracteriza por daños
en el epitelio glandular, seguido por una inflamación clínica o subclínica.
Mastitis clínica: Es un proceso inflamatorio principalmente de origen infeccioso de
la glándula mamaria, producido por varias clases de microorganismos.
Mastitis subclínica: Es aquel proceso inflamatorio que no produce los signos
típicos de inflamación, calor, dolor, tumor, rubor, ni cambios macroscópicos de la
secreción láctea.
RESUMEN
Título: Detección de mastitis bovina e identificación de microorganismos
patógenos en vacas lecheras del sur de La Guajira
Autor: Rincon Fernandez, Enira Paola
Palabras claves: mastitis bovina, Staphylococcus aureus, recuento de
células
Descripción:
El Recuento de Células Somáticas (RCS) es ampliamente utilizado como un
indicador del estado de salud de la ubre y de calidad de leche, siendo una
herramienta muy valiosa en la toma de decisiones para la implementación de
medidas de prevención y control de la mastitis. El objetivo de la investigación fue
determinar infecciones intramamarias caracterizando factores higiénicos –
sanitarios e identificando agentes etiológicos para la correlación con el conteo
de células somáticas; efectuando un análisis descriptivo de las variables
influyentes en la calidad sanitaria de la misma, mediante la aplicación de una
encuesta y realizando un análisis sanitario de muestras de leche cruda a nivel
de laboratorio, identificando los factores y microorganismos que influyeron de
forma directa en el RCS. Se realizó el recuento de células somáticas a 104
animales ubicados en 7 predios. De las muestras positivas (≥300 000 cel/ml),
se obtuvo una fracción de leche y se realizó aislamiento microbiológico.
Mediante encuestas se analizaron 13 variables relacionadas con las
condiciones y sistema de ordeño en los predios y su correlación con la
presencia de la enfermedad utilizando pruebas de chi cuadrado (χ2). Se
determinó que el 63% de los cuartos estaban sanos, el 18% presento Mastitis
Subclínica, el 12% Mastitis Clínica y solo el 7% Infección Severa. De las
muestras en las cuales se pudo realizar aislamiento y caracterización
microbiológica, en 73.6% se aisló Staphylococcus aureus, y 26,4%
Streptococcus agalactiae. Un total de 4 características se asociaron a la
presencia de mastitis, mientras la totalidad de estos factores se relacionaron
con la ausencia de buenas prácticas de ordeño. La presencia, principalmente
de microorganismos asociados a mastitis contagiosas, evidencian la
necesidad de capacitación y asesoramiento para implementar buenas
prácticas de ordeño y mejorar la competitividad del sector en la región, lo que
redundará en un aumento en la producción.
ABSTRACT
Title: Detection of bovine mastitis and identification of pathogens
microorganisms in dairy cows of the south of La Guajira
Authors: Rincon Fernandez, Enira
Keywords: bovine mastitis, Staphylococcus aureus, cell count
Description:
The Somatic Cell Count (SCR) is widely used as an indicator of udder health
status and milk quality, being a very valuable tool in decision making for the
implementation of prevention and control measures of mastitis. The objective
of the research was to determine intramammary infections characterizing
hygienic - sanitary factors and identifying etiological agents through
conventional and automated laboratory tests for the correlation with the
somatic cell count in dairy cows of medium herds of the south of La Guajira;
performing a descriptive analysis of the influential variables in the sanitary
quality of the same, by applying a survey and carrying out a sanitary analysis
of samples of raw milk at the laboratory level, identifying the factors and
microorganisms that directly influenced the RCS . The count of somatic cells
was carried out on 104 animals located in 7 farms. Of the positive samples
(≥300,000 cel / ml), a milk fraction was obtained and microbiological isolation
was performed. Through surveys, 13 variables were analyzed related to the
conditions and milking system in the farms and their correlation with the
presence of the disease using chi-square tests (χ2). It was determined that
63% of the rooms were healthy, 18% presented Subclinical Mastitis, 12%
Clinical Mastitis and only 7% Severe Infection. Of the samples in which
isolation and microbiological characterization could be performed, in 73.6%
Staphylococcus aureus was isolated, and 26.4% Streptococcus agalactiae. A
total of 4 characteristics were associated with the presence of mastitis, while
all of these factors were related to the absence of good milking practices. The
presence, mainly of microorganisms associated with contagious mastitis,
evidences the need for training and advice to implement good milking
practices and improve the competitiveness of the sector in the region, which
will result in an increase in production.
16
INTRODUCCIÓN
La producción de leche en Colombia es una de las principales actividades
productivas del sector pecuario. El acopio pasó de 2756 millones de litros en 2008
a 3218 millones en 2016 (FEDEGAN, 2015), siendo el cuarto productor de leche en
América Latina entre 2013 y 2015 (FAO, 2017). Según el Ministerio de Agricultura y
Desarrollo Rural, 350 000 familias dependen de la producción y venta de leche en
2017. Las actuales condiciones para el ingreso del país en nuevos mercados
internacionales demandan que la industria lechera requiera ser más competitiva.
Los factores que influyen en la producción y calidad de la leche son de tipo genético
(especie, raza), de manejo (alimentación y ordeño), fisiológicos (fase y número de
lactación) y prevalencia de enfermedades (Campos et al., 2016). Dentro de estos
últimos, la mastitis bovina es considerada el principal problema del ganado lechero
a nivel global (Boldyreva, 2014; Gomes et al., 2016). La mastitis amenaza los
ingresos de los agricultores y al sector lácteo debido a problemas de bienestar
animal y reducción en la producción y en la calidad de la leche, costos por
tratamientos y sacrificio temprano (Heikkilä et al., 2012). Asimismo, por el riesgo
que puede representar para la salud humana, principalmente por el consumo de
leche cruda (Murphy et al., 2016).
La clasificación de mastitis clínica o subclínica depende del grado de severidad de
sus signos clínicos. La mastitis clínica se caracteriza por anormalidades visibles en
la leche o la ubre, mientras que la subclínica es la inflamación de la glándula
mamaria, sin generar cambios visibles. Esta última causa pérdidas económicas más
importantes que la mastitis clínica, debido a la reducción en la producción de la
leche que tiende a persistir y afectar mayor número de animales por unidad de
producción (Sinha et al., 2014).
Patógenos causantes de mastitis como Staphylococcus aureus, Streptococcus
agalactiae, Strectococcus uberis, Strectococcus dysgalatatiae y los coliformes son
17
conocidos como patógenos mayores por su virulencia y mayor daño al tejido
mamario, a diferencia de patógenos causantes de infecciones leves o de tipo
subclínico como Corynebacterium bovis y estafilococos coagulasa negativos (CNS,
por sus siglas en inglés), llamados patógenos menores (CBMQRN, 2015).
Por lo anteriormente expuesto, y conociendo que esta enfermedad no posee una
sintomatología evidente, se propuso la realización del presente trabajo de
Investigación que tuvo como objetivo caracterizar los factores higiénicos – sanitarios
e identificando agentes etiológicos mediante pruebas convencionales y
automatizadas de laboratorio para la correlación con el conteo de células somáticas
en vacas lecheras de hatos medianos del sur de La Guajira.
18
1. PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA
1.1 DESCRIPCIÓN DEL PROBLEMA
La mastitis bovina es una de las principales enfermedades infecciosas del ganado
lechero y, a diferencia de otras enfermedades, no se puede erradicar. Es una
enfermedad multifactorial en la cual interactúan el huésped susceptible, el medio
ambiente y los microorganismos patógenos capaces de producir infecciones
intramamarias. Aunque se han descrito numerosos microorganismos que pueden
producir mastitis, más del 95% de los casos son causados por agentes contagiosos
como Staphylococcus aureus y Streptococcus agalactiae (Centro Nacional de
Sanidad Agropecuaria, 2010).
Esta enfermedad constituye un importante problema tanto para la salud pública
como para la economía del sector lechero en general. Se estima que la mastitis
afecta por lo menos a la mitad del ganado vacuno, se calcula que alrededor del 70%
de los gastos para los productores lecheros están representados en la prevención
y tratamiento de la enfermedad. Los costos asociados a mastitis incluyen
disminución en la producción y calidad de leche, leche descartada, gastos derivados
de honorarios veterinarios, compra de drogas, trabajo extra, descarte de vacas y
ocurrencia de enfermedades concomitantes, Estos factores explican las variaciones
de costos totales de la enfermedad e influyen drásticamente en la conveniencia o
no del control de la misma a nivel del hato (Vissio, 2015).
Las pérdidas por producción atribuidas a la mastitis están relacionadas a sus formas
de presentación, clínica y subclínica. Cuando se presentan casos clínicos las
pérdidas productivas son apreciables con facilidad por el productor ya que se
19
evidencian cambios en la ubre como enrojecimiento, tumefacción o dolor; la leche
presenta una apariencia anormal y, en algunos casos, hay aumento de la
temperatura rectal, letargo, anorexia e incluso la muerte. Las pérdidas asociadas a
los casos de mastitis subclínica son estimadas a partir del recuento de células
somáticas (RCS) en leche, ya que esta forma de presentación de la mastitis es sutil
y difícil de corregir, puesto que la vaca parece saludable, la ubre no muestra ningún
signo de inflamación y la leche parece normal, sin que existan cambios
organolépticos en la misma (Bedolla 2008, Vissio 2015). Se estima que el productor
pierde un promedio de $450.000 por vaca al año, debido a la mastitis, sin considerar
los costos de control de residuos antibióticos, análisis de calidad de la leche, conteo
de células somáticas y el impacto reproductivo, a nivel mundial las pérdidas por
mastitis están alrededor de los 3.5 billones de dólares (Quiceno, 2015).
En Colombia, estudios realizados en el Altiplano Cundiboyacense demostraron que
de 34,4% de animales sospechosos de padecer mastitis, el 31,3% correspondió a
casos de mastitis subclínica, mientras que solo el 2,2% correspondió a mastitis
clínica (Mendoza et al., 2017), lo que provocó que se retomaran las investigaciones
sobre esta enfermedad. Sin embargo, los productores de leche ignoran la
problemática que acarrea la mastitis, considerándola una enfermedad transitoria y
de poca importancia.
Ruegg, 2015, “afirma que, en Colombia la incidencia de mastitis oscila entre el 15 y
el 25%, aunque en algunos hatos puede ser superior al 45%. A pesar de que en la
última década se han incorporado sistemas de detección de mastitis subclínica y
pago por calidad, esta continúa siendo una de las mayores causas de pérdidas
económicas en la producción lechera, sufrimiento animal, efectos negativos en la
calidad de leche y reducción en la higiene del producto. Es imposible cuantificar con
precisión el costo total de la mastitis: varía con el tiempo y depende de las
20
condiciones del hato. La disminución de la producción de leche representa
aproximadamente el 70% del costo total.
En el sur del departamento de La Guajira la explotación bovina es de doble propósito
carne y leche. En el 2014, el inventario bovino fue uno de los más pequeños del
país ocupando el puesto 20 con 330 mil bovinos, distribuido en 4.591 predios, que
ocupan un área de 1.578.371 hectáreas. Esto caracteriza a la ganadería bovina de
la Guajira como una de las de menor capacidad de carga (0,22 cabezas/ha). El
capital invertido en bovinos está alrededor de 345 mil millones de pesos. La
ganadería bovina guajira produce al año 389 millones de litros de leche (1 millón 66
mil litros de leche al día), y sacrifica cerca de 520 mil bovinos.
Actualmente, se cuenta con poca información acerca de la leche cruda en el
departamento de la Guajira y el efecto de los distintos factores en producción
primaria sobre la composición. El sistema vigente de pago por calidad de la leche
no contempla dentro de sus criterios el RCS, el cual sí es considerado como
fundamental para evaluar la calidad sanitaría en otros países del mundo. Por lo
tanto, esta investigación busca establecer una línea base para la calidad
composicional de la leche cruda en la región del sur de la Guajira, determinar cómo
factores de la producción primaria (días en lactancia, número de partos y la mastitis)
la afectan y determinar si el RCS afecta el rendimiento lechero. De esta manera, se
espera que el RCS sea considerado dentro de los criterios de bonificaciones
obligatorias dentro del sistema de pago por calidad de leche cruda, contribuyendo
de este modo a la competitividad de la cadena fortaleciendo el sistema de calidad
de leche cruda en la región y su aplicación a nivel industrial.
Formulación del problema: Identificación de microorganismos patógenos
causantes de mastitis bovina de hatos lecheros del sur de la Guajira, teniendo como
21
referente el RCS vaca a vaca, y los factores que influyen con mayor frecuencia a
nivel de hato lechero.
1.2 JUSTIFICACIÓN
Actualmente la mastitis se clasifica como una enfermedad infecciosa compleja, de
alto costo económico y con dificultad para su control y prevención de manera
efectiva, a esto se suma la baja calidad de la leche y sus subproductos, ya que el
tratamiento para esta deja trazas de antibióticos en la leche. Debido a que la mastitis
puede ser causada por lesiones, estrés o bacterias que invaden la glándula
mamaria, ésta es considerada una enfermedad altamente prevaleciente en el
ganado lechero.
La mastitis subclínica es un problema que implica disminución en la producción de
leche y por ende pérdidas económicas; en la estimación de pérdidas por mastitis se
tiene en cuenta un 34% que corresponde a inversión de medicamentos veterinarios,
asistencia técnica veterinaria, suspensión de leche por alto Recuento de Células
Somáticas, mano de obra y descarte de animales que en muchas ocasiones tienen
un alto valor genético y muerte. El 66% restante corresponde a la leche dejada de
producir por afecciones en los alvéolos de la glándula mamaria. (Cossio, 2016).
En Colombia la producción lechera y la cadena láctea en su conjunto representan
uno de los sectores con mayor potencial de crecimiento y posibilidades de
participación en los mercados internacionales y buen nivel competitivo. Sin
embargo, las enfermedades infecciosas en los animales socaban la competitividad
del sector al constituirse en factor de baja productividad con potencial de afectar la
calidad e inocuidad de la leche (Fedegan, 2014).
22
Con la finalidad de promover la calidad sanitaria de la leche se estableció que todos
los laboratorios deben ampliar el espectro de sus análisis incorporando la medición
de células somáticas para prevenir y controlar la mastitis bovina principalmente su
forma subclínica, debido a que actualmente se considera dentro de las principales
enfermedades que causan pérdidas en la ganadería en todo el mundo. Al incluir
este parámetro de análisis los productores de leche se verán beneficiados en el
aumento del valor de la liquidación en las bonificaciones por la calidad sanitaria de
la lecha cruda producida en su hato.
Así, el recuento de células somáticas hoy en día es uno de los indicadores más
importantes del estado de salud de la ubre y la calidad de la leche cruda, que permite
aceptar o rechazar un producto. Para ciertos países cuando la cifra es superior a
450.000 células/ml hasta de 750.000 cel/ml. Independientemente de estos valores
la industria espera y bonifica las leches con menos de 250.000 cel/ml porque obtiene
mejor rendimiento industrial, sabor de los productos y mayor duración en el
mostrador (Velásquez, 2012).
Estudios realizados a nivel mundial demostraron la importancia de diagnosticar
casos de mastitis en los hatos lecheros, ya que un caso clínico positivo de mastitis
genera una pérdida económica que va desde los $164 hasta los $235 euros.
Asimismo, las pérdidas por leche no vendida a causa de mastitis subclínica y clínica,
pueden comenzar en $65 y llegar a los $182 euros por vaca al año (Contexto
ganadero, 2013).
De acuerdo a lo anterior, se evidencia que el aseguramiento de los mercados y la
garantía de alimentos seguros para los consumidores, dependerá, de la capacidad
del productor para implementar programas confiables de inocuidad que garanticen
el cumplimiento de las exigencias para la protección del cliente. La implementación
de Buenas Practicas Ganaderas (BPG) de la mano con el control de la mastitis
23
bovina, bajo un programa integrado que involucre la salud de los animales, la rutina
de ordeño, las condiciones ambientales de alojamiento del bovino, las condiciones
de funcionamiento de los utensilios de ordeño y el nivel de formación de las
personas responsables del proceso determinaran la competitividad en el mercado,
y permitirá avanzar en el cumplimiento a las demandas de calidad, relacionados con
el origen y con la producción de alimentos inocuos y seguros para la salud
(Fedegan, 2014).
24
2. OBJETIVOS
2.1 GENERAL
Detectar mastitis bovina caracterizando factores higiénicos – sanitarios e
identificando agentes etiológicos mediante pruebas convencionales y
automatizadas de laboratorio para la correlación con el conteo de células somáticas
en vacas lecheras de hatos medianos del sur de La Guajira.
2.2 ESPECÍFICOS
• Caracterizar los factores higiénico-sanitarios en el ordeño y su relación con
la presencia de mastitis mediante la aplicación de una encuesta para su
respectivo análisis.
• Determinar mastitis mediante el recuento de células somáticas por Citometría
de Flujo, método normalizado ISO-13366-2, IDF 148-2; 2006 para
correlacionarlos con factores higiénico sanitarios
• Identificar los microorganismos patógenos causantes de mastitis clínica y
subclínica mediante pruebas bacteriológicas.
25
3. MARCO TEÓRICO
3.1. ANTECEDENTES
Yacchi (2017), realizó el trabajo de investigación en la Región Junín, distritos de
Concepción y Nueve de Julio, -Concepción, Matatahuasi – Matahuasi y Apata –
Jauja con la participación de 4 empresas acopiadoras de leche y de 20 ganaderos
productores de leche con un aproximado de 208 vacas, de los cuales 156 se
encontraban en producción con un promedio de 10 litros/animal/día de distintos
tipos de ganado vacuno (Simental, Holstein, Brown Swiss y criollas). Teniendo como
objetivo evaluar las buenas prácticas de manejo en el ganado y de la leche,
realizado por los ganaderos en el pre-ordeño, ordeño y post-ordeño y que
influencian en los parámetros de calidad. Se utilizó el modelo estadístico Lineal para
un factor en la comparación entre grupos y pruebas no paramétricas de acuerdo al
número de grupos a comparar: prueba de Kruskal-Wallis y prueba de Mann-
Whitney, para evaluar la composición de la leche hallándose, los siguientes
resultados, acidez (D°) 15.67, densidad (g/cm3) 1.030, grasa (%) 3.71, SNG (%)
8.19, ST (%) 11.90, proteína (%) 3.47, lactosa 4.15, y el TRAM 359 (mt) y en RCS
(miles) 445. Respecto a la calidad de la leche que colecta el dueño de la empresa y
la que entregan los acopiadores externos, para la planta de derivados, se hallaron
diferencias significativas en la temperatura de llegada, en el tiempo de reducción
del azul de metileno y en el conteo de células somáticas. En lo que refiere al
deterioro (en los tres tiempos), solo se encontró diferencias significativas en el
tiempo de reducción del azul de metileno. Se proponen recomendaciones de buenas
prácticas ganaderas para mejorar la gestión de calidad e inocuidad de la leche.
Mora y colaboradores (2016), El estudio evaluó el efecto de factores genéticos y
ambientales sobre el Score de Células Somáticas [SCS= log2 (RCS/100 000) +3]
26
en ganado lechero de Costa Rica. Se analizaron 198 685 registros diarios,
provenientes de 43 535 lactancias, 23 749 vacas lecheras, 237 hatos y 3 grupos
raciales. Se utilizó un modelo animal mixto para evaluar efectos fijos de zona, hato
dentro de zona, raza, número de lactancia, mes/año de registro, periodo de lactancia
y la covariable de producción de leche diaria; también para efectos aleatorios de
ambiente permanente, hato×semental y vaca. Se calcularon la heredabilidad (h2) y
repetibilidad (r) para el Recuento de Células Somáticas (SCS), así como los valores
de cría (BLUP) y confiabilidad para los individuos en la población. El promedio de
SCS fue 3,30 (DE=1,87) todos los efectos fijos, significativos. Entre zonas, SCS
varió desde 3,4 (va-p) a 3,7 (bmh-p). Para hatos dentro de zona, el SCS osciló entre
1,6 y 5,5. El SCS aumentó desde 2,7 en primera lactancia hasta 4,0 para lactancias
≥6. El SCS fue mayor en Enero (3,6) y menor en Abril (3,4). Se observó un patrón
descendente no lineal en SCS desde el 2004 (4,3) hasta el 2015 (3,3) y un patrón
no lineal de SCS a lo largo de la lactancia, que inició en 3,7 para disminuir hasta 3,1
al día 60 posparto, mientras que aumentó 3,9 al día 365. Se detectó una reducción
de 0,051 en SCS por cada aumento de 1 kg en producción diaria de leche. Los
valores de h2 y r fueron 0,08 (DE=0,008) y 0,33 (DE=0,004), respectivamente. La
confiabilidad de los BLUP en vacas y toros fue de 0,40 (DE=0,16) y 0,44 (DE=0,20),
respectivamente. Estos resultados son útiles para un mejor control de SCS a nivel
de hato, basado en el manejo preventivo de grupos más propensos, la optimización
del descarte y la selección de sementales.
Bonifaz & Conlago (2016), realizaron un estudio epidemiológico de prevalencia e
incidencia de mastitis bovina en la Comunidad de Paquiestancia cantón Cayambe
mediante la prueba de campo California Mastitis Test e identificación del agente
etiológico con pruebas microbiológicas de cultivo y antibiograma para resistencia de
antibióticos. El muestreo de leche se ejecutó en dos etapas con intervalo de 4
meses, se muestrearon 880 cuartos mamarios provenientes de 220 vacas en
producción en 42 fincas ganaderas. Se determinó una prevalencia (P) en la primera
etapa del 64% y en la segunda 66% con una incidencia (I) del 70%. El resultado de
27
laboratorio confirmó la presencia de los agentes etiológicos: Staphylococcus
intermedius 26%, Staphylococcus áureos 22%, Streptococcus dysgalactiae 13%,
Staphylococcus epidermis 13%, Escherichia coli cepa 1 13%, Micrococcus 5%,
Corynebacterium sp 4%. Según el análisis de antibiograma los animales en estudio
estaban reincidentes, Estreptomicina 48%, Amoxicilina 35%, Cefalexina 5%,
Tetraciclina 4% y Gentamicina 4%. El factor de riego que influye en la prevalencia
e incidencia de la enfermedad es la falta de aplicación de las buenas prácticas de
ordeño.
Barrera y colaboradores (2015), realizaron un estudio que pretendía dar a conocer
los principales agentes etiológicos de la mastitis bovina y sus patrones de
sensibilidad a los antibióticos, dando una visión global de su situación actual en los
municipios de importante producción lechera del departamento de Boyacá.
Mediante un estudio cuantitativo, descriptivo, observacional y transversal, se
procesaron 214 muestras de leche prevenientes de pezones afectados con algún
grado de mastitis bovina. Para el diagnóstico microbiológico se emplearon muestras
de leche a las que se les aplicaron protocolos habituales de identificación, siguiendo
los perfiles bioquímicos. Los patrones de sensibilidad a antibióticos se establecieron
mediante la técnica de Kirby-Bauer. Se encontró una prevalencia de 31 % (n=214)
de bacterias que ocasionan mastitis contagiosa, siendo Staphylococcus aureus el
agente etiológico más importante en un 26 %. Se presentó una alta sensibilidad a
los antibióticos betalactámicos evidente en el 20,6 % de los aislamientos,
correspondiente a bacterias Gram positivas presentando resistencia a la penicilina,
especialmente en especies de Staphylococcus spp. En este trabajo se aislaron e
identificaron algunos agentes etiológicos causantes de mastitis bovina de origen
contagioso, origen ambiental y agentes oportunistas e infrecuentes (Bacillus spp. y
Lactobacillus spp.). En estos aislamientos se encontró una alta sensibilidad a
antibióticos, principalmente a los betalactámicos.
28
Fonseca (2015), realizaron la investigación en el cantón de Cayambe, Parroquia
Olmedo, Comunidad de El Chaupi, teniendo como objetivo determinar la
prevalencia de la Mastitis bovina, mediante la prueba de California Mastitis Test. Se
tomaron 266 muestras de leche, de un total de 1064 cuartos, de los cuales 105
presentaron algún grado de infección y 161 no presentaron signos de la
enfermedad. De las muestras enviadas al laboratorio se obtuvo un RCS con valores
<100 el 30% y >700 con porcentajes del 9%, en Unidad Formadora de Colonias con
valores <100 el 86% y con valores >200 con porcentaje de 4,55%. El análisis
bacteriológico arrojo los siguientes resultados; el 59% de Estreptococos agalactiae,
45% de Staphylococcus aureus, 22% de Streptococcus dysgalactiae y 13% de
Escherichia coli. La alta frecuencia de la enfermedad está asociada con algunos
factores como: la falta de buenas prácticas de ordeño, desconocimiento de la
enfermedad, el mal uso de antibióticos hace de la Mastitis una enfermedad
recurrente. Con una prevalencia de la enfermedad de 8,3%.
Pulido y colaboradores (2014), realizaron el estudio evaluación de las prácticas de
ordeño, la calidad higiénica y nutricional de la leche, en el municipio de granada,
Antioquia – Colombia, con el objetivo de evaluar las prácticas de ordeño empleadas
en las fincas productoras de leche y la calidad higiénica y nutricional, antes y
después de la capacitación en Buenas Prácticas de Ordeño (BPO). Mediante
muestreo no probabilístico, se seleccionaron diez fincas productoras,
pertenecientes a ASOGRAN. La evaluación de las prácticas de ordeño fue realizada
mediante observación directa y, la detección de mastitis, se hizo en cada finca,
utilizando la Prueba California (CMT). Al finalizar el ordeño, se tomaron dos
muestras de leche, con un intervalo de 60 días, efectuándose análisis de unidades
formadoras de colonia (UFC), recuento de células somáticas (RCS), porcentajes de
proteína, grasa y sólidos totales; durante este intervalo, se capacitaron los
productores en buenas prácticas de ordeño (BPO). Los análisis estadísticos, se
realizaron mediante la prueba Wilcoxon. Antes de la capacitación, se registró
incumplimiento en las actividades de las BPO; se hallaron diferencias significativas
29
para las pruebas de mastitis y de UFC antes y después de la capacitación; además,
el 24% de las glándulas mamarias, se percibían afectadas por mastitis subclínica.
En la calidad higiénica de la leche, se encontró UFC promedio de 6x105 y 3x105
respectivamente. El RCS no presentó diferencias significativas, reportando valores
promedio de 630.000 y 750.000, respectivamente. La calidad nutricional reportó
porcentajes de grasa, proteína y sólidos totales, superiores a los exigidos en la
legislación colombiana. Los hallazgos indican la importancia de la aplicación de las
BPO sobre la calidad de la leche.
Mera (2013), llevó a cabo un estudio con el objetivo de evaluar la calidad de leche
mediante Citometría de flujo, proveniente de bovinos de la Parroquia Machachi,
Provincia de Pichincha”, se analizó la calidad de la leche con muestras de 409
bovinos y 12 tanques de enfriamiento. Se determinó el conteo de células somáticas
con el Fossomatic FC; grasa, proteína, sólidos totales y sólidos no grasos con el
Milkoscan FT+, bacterias con el Bactoscan FC, la prevalencia de Brucella spp.,
mediante MRT y la confirmación en medio específico Farrell y tipificación de
bacterias Gram negativas. De todas las muestras estudiadas el 87.04% SCC,
15.16% grasa, 90.22% proteína, 21.76% ST, 77.75% SNF y 98.77% bacterias se
encontraron dentro de la Norma Ecuatoriana INEN en cada uno de los parámetros
indicados, mientras que en las muestras de los tanques de enfriamiento se encontró
que el 83.34% SCC, 83.33% grasa, 91.67% proteína, ST, SNF y 100% bacterias.
La PA de Brucella spp., fue del 16.62% (67/403), pero debido a las reacciones
cruzadas sólo se pudo aislar E. coli y P. vulgaris.
Martínez (2012), En el estudio se determinó las prácticas de ordeño y la Prevalencia
de mastitis subclínica en vacas lecheras que abastecen el centro de acopio Unión
de lecheros del sauce (ULDESA) municipio el Sauce en el departamento de León
Septiembre – Noviembre 2011. Se realizó un estudio de corte transversal con una
población de todas las hembras bovinas a las que se realizó el test de California,
con una muestra de 365 hembras bovinas a las cuales se llenó una ficha con
30
información sobre las prácticas de ordeño. Se obtuvo 73.7% de las vacas con
reacción positiva al CMT. De 1,460 cuartos, el 48.7% estaban afectados en algún
grado de mastitis subclínica. La reacción con mayor frecuencia fue la de dos cruces
con un 35.9 %, las de una cruces con 23.8 % y en menor grado la de tres cruces
con 11 % de las reacciones. El lavado de manos, el tipo de ordeño artesanal, lugar
de ordeño, desinfección de ubre y Sustancia para desinfectar la ubre fueron las
principales variables asociadas a la enfermedad.
Picco (2011), realizo el trabajo de investigación diseño de un sistema de buenas
prácticas de ordeño para la hacienda santa rita en el sector de tambillo, su objetivo
principal fue el diseño de un Sistema de Buenas Prácticas de ordeño para la
Hacienda “Santa Rita”. Inicialmente se diagnosticó las condiciones de la sala de
ordeño para reconocer las falencias en las que se debía ejecutar mejoras, tomando
como aspectos a verificar las instalaciones, suministro de agua, equipo y utensilios,
higiene en el ordeño, personal, control de plagas, limpieza y desinfección, seguridad
con laboral y el ordeño. Siendo la seguridad laboral con 20% de cumplimiento el
que menos cumplía con los requisitos y el procedimiento de Higiene del ordeño con
100 %, el que más cumplimiento presentaba. Luego del diagnóstico realizado se
observó que el cumplimiento total era del 51% y se estableció un plan de mejoras
con sus respectivos planes de acción. Con este resultado se propuso desarrollar un
manual de Buenas Prácticas en la sala de ordeño de la Hacienda “Santa Rita” con
el fin de guiar y mostrar los beneficios que presenta la implementación de las
Buenas Prácticas de Ordeño, así poder asegurar la calidad higiénica en la
producción de leche. También se mostró la utilización de algunas medidas mínimas
y económicas que pueden lograr cambios significativos en cada una de las etapas
del ordeño la cual es uno de los puntos más importantes de la producción lechera.
31
3.2 BASES TEÓRICAS
3.2.1 Mastitis bovina.
La mastitis es un proceso inflamatorio de la glándula mamaria, comúnmente se
presenta a consecuencia de una infección microbiana causada por patógenos que
penetran a la glándula a través del canal del pezón. Es considerada una enfermedad
altamente prevaleciente en el ganado lechero, y es una de las más importantes que
afecta mundialmente la industria lechera; pues ocasiona pérdidas económicas muy
fuertes a todos los productores de leche en el mundo debido a la disminución de la
calidad y cantidad de leche producida, aumento en los costos de tratamiento y
servicios veterinarios, y pérdida de animales (Fernández et al., 2012).
El origen de la inflamación de la glándula mamaria se puede atribuir a diferentes
factores como son los ambientales, manejo durante el ordeño, entre otros. El cuadro
clínico de esta enfermedad puede variar desde la inflamación sobreaguda; con
toxemia y muerte del animal (mastitis clínica), hasta casos nulos en lo que no son
visibles los cambios morfológicos en el animal afectado y solo puede ser detectada
a través de pruebas diagnósticas (mastitis subclínica) siendo esta variante de la
enfermedad la de mayor incidencia en la actualidad (Andrade et al., 2017).
3.2.1.1 Principales patógenos que influyen sobre la mastitis. Los
microorganismos más frecuentes se pueden unir en 3 granes grupos: Contagiosos,
Ambientales y Oportunistas (Tabla 1).
32
Tabla 1. Patógenos de la mastitis
Contagiosos Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysgalactiae,
Corynebacterium spp, Mycoplasma spp.
Ambientales
Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, Klebsiella spp., Pseudomonas spp,
Escherichia coli, Enterobacter spp, Serratia spp, Pseudomonas spp, Proteus spp,
Hongos y levaduras.
Oportunistas Staphylococcus coagulasa negativo, Staphylococcus aureus, Streptococcus
agalactiae.
Fuente: Rincón, 2019
• Microorganismos patógenos
Contagiosos. Los patógenos contagiosos de primera importancia incluyen
al Staphylococcus aureus, Streptococcus agalactiae (Tabla 2). Estos
microorganismos se transmiten de vaca a vaca, donde el reservorio primario que
alberga los patógenos es el animal infectado o el cuarto de la ubre (Wolter, 2002).
Tabla 2. Patógenos contagiosos
Fuente: Rincón, 2019
Staphylococcus
aureus
Es la principal causa de infecciones intramamarias en los bovinos, se le considera el
agente causal más importante y frecuente de la mastitis bovina. No es un patógeno
obligado de la ubre, ya que se puede encontrar también en lesiones de la piel de los
pezones, en las manos de los ordeñadores, en las camas y en los equipos de ordeño
(Fernández, 2012).
Streptococcus
agalactiae
Este microorganismo es considerado un parásito intramamario obligado de los
bovinos, el cual puede sobrevivir por largos períodos de tiempo dentro de la glándula
mamaria. El 50 u 80% de un hato puede estar infectado por Streptococcus agalactiae,
aunque la mayoría son casos leves algunos de los cuartos infectados perderán la
capacidad de producir leche (Wolter, 2002).
33
Ambientales. Los patógenos ambientales se encuentran como su nombre lo indica
en el medio ambiente que rodea a los animales, de forma que el contagio se produce
fundamentalmente en el periodo entre los ordeños, aunque después puedan
comportarse también como contagiosas. Estos microorganismos considerados
ambientales son básicamente Coliformes, Streptococcus uberis y Streptococcus
dysgalactiae (Concha, 2009).
Coliformes. Coliformes es un término empleado para identificar a una serie de
bacterias de la familia enterobacteriaceae que incluye a los géneros Escherichia
spp, Enterobacter spp y Klebsiella spp. Las bacterias Gram negativas E. Coli,
Klebsiella spp., y Enterobacter spp., son habitantes normales del suelo e intestino
de las vacas. Se acumulan y multiplican en la materia fecal y en la cama de los
bovinos, pueden causar una variedad de síntomas de la enfermedad, desde una
simple inflamación local, hasta severos cuadros de enfermedad y muerte. Una vez
que las bacterias pasan el conducto del pezón durante la lactancia, los mecanismos
de defensa celular y humoral determinan la supervivencia de la bacteria y la
duración y severidad de la infección (Fernández, 2012).
Oportunistas. Los Staphylococcus coagulasa negativa son patógenos oportunistas
de elevado interés, debido a que al día de hoy son los microorganismos que con
más frecuencia son aislados en vacas y novillas de los rebaños, y en la actualidad
se consideran patógenos emergentes de la mastitis bovina. Normalmente estos
microorganismos se encuentran en la piel sana del pezón y en las manos del
ordeñador. Son denominados microorganismos oportunistas, ya que habitan zonas
donde les es sencillo colonizar el canal del pezón y penetrar hasta los tejidos
secretores (Fernández, 2012).
34
3.2.2 Clasificación de la mastitis.
3.2.2.1 Mastitis subclínica. La mastitis subclínica se caracteriza por la presencia
de un microorganismo en combinación con un conteo elevado de células somáticas
en leche. Este tipo de mastitis no presenta cambios visibles en la leche o ubre, se
percibe una pequeña reducción en el rendimiento de la leche, siendo alterada su
composición por la presencia de componentes inflamatorios y bacterias.
Esta presentación de la enfermedad es la más persistente en el ganado lechero;
Ocurre frecuentemente, y puede conducir a grandes pérdidas económicas no solo
por la reducción de la producción, también por los elevados conteos de células
somáticas. En la práctica, los casos de mastitis subclínica con frecuencia no son
detectados rápidamente, o pueden incluso no ser reconocidas por el ordeñador,
para identificar estos casos de mastitis se hace necesario las técnicas de laboratorio
como la medición del conteo de células somáticas y el cultivo bacteriológico
(Fernández, 2012).
3.2.2.1 Mastitis clínica. La mastitis clínica es definida como una anormalidad en la
glándula mamaria de la vaca o la leche (grumos), Se caracteriza por la tumefacción
o dolor en la ubre, enrojecimiento de la misma, en algunos casos, presenta letargo,
anorexia e incluso la muerte. Las bacterias están presentes en la leche, lo que
reduce el rendimiento y la calidad considerablemente (Yera, 2006).
Es un proceso inflamatorio principalmente de origen infeccioso de la glándula
mamaria, producido por varias clases de microorganismos. En Colombia, por lo
menos en el 85% de los casos, involucra bacterias de los géneros Streptococcus
spp y Staphylococcus spp. (Cotrino, 2010).
35
Salvador y Abner (2005) clasifican la Mastitis clínica como Mastitis ambiental y
Mastitis gangrenosa.
3.2.3 Factores predisponentes a la mastitis.
En la aparición de la mastitis, se encuentran una serie de factores que predisponen
a la enfermedad, entre los más importantes tenemos los relacionados al stress, la
nutrición, raza y condiciones ambientales (época del año, suelo, humedad), así
como, aquellos asociados a las vacas, como son, la edad, número de parto y etapa
de lactancia.
3.2.3.1 Factores Nutricionales. La alimentación actual de la vaca lechera está
destinada a mantener un alto nivel de producción; esto constituye un factor de
tensión fisiológico que puede provocar mastitis clínica en vacas con antecedentes
de infecciones o mastitis subclínica (Rivera, 2014).
3.2.3.2 Stress. Cualquier situación estresante para el ganado, como sería un día de
vacunaciones, tuberculización, calor excesivo, etc. reducirá la producción láctea, y
concentrará las células elevando su concentración por ml de leche. Además, se ha
demostrado que cuando las vacas se encuentran bajo tensión, los leucocitos en la
ubre son menos efectivos en combatir los organismos causantes de mastitis (Rivera,
2014).
3.2.3.3 Época del año. Las condiciones climáticas regionalizadas tienen una
influencia en el medio ambiente y por supuesto que ello repercute en los RCS
36
debido al estado en que se encuentran los corrales en los diferentes hatos. La
temporada de lluvias afecta directamente a estas condiciones ambientales y
elevara, por consiguiente, debido a un aumento en los microorganismos, los RCS a
nivel individual y de hato.
3.2.3.4 Edad. A mayor edad existe mayor predisposición, debido a una menor
tendencia de curación en las alteraciones de pezones donde el canal del pezón se
va alterando con la edad, facilitando la entrada a microorganismos (Báez, 2002).
3.2.3.5 Número de partos. Se ha descrito que a mayor número de partos existe un
aumento en los casos de mastitis, debido a una mayor exposición a infecciones
intramamarias y traumas, lo que deriva en un aumento del riesgo para el desarrollo
de la enfermedad (Laevens, 1997).
El número de parto, constituye uno de los factores que en mayor medida afectan el
contenido celular de la leche y el resultado del CMT o pruebas similares. En general,
el RCS y la intensidad de las inflamaciones subclínicas, evaluadas mediante el
CMT, aumentan al incrementarse el número de parto. Este fenómeno se atribuye
principalmente a un incremento de las tasas de infecciones intramamarias en las
vacas de más edad, que probablemente refleja su mayor exposición a infecciones
y traumas de la ubre (Solís, 2007).
3.2.3.6 Etapa de lactancia. Existe un incremento de RCS en las primeras y últimas
semanas de lactancia, en lo cual distintos autores postulan que sería provocado por
una mayor o menor dilución, asociada a las variaciones que experimenta la
producción durante la lactancia. También, el aumento en las infecciones
intramamarias juega un papel importante en esta curva, ya que animales
37
bacteriológicamente negativos no presentarían un aumento notorio de células
somáticas (Laevens, 1997).
3.2.4 Respuesta celular de la glándula mamaria.
3.2.4.1 Células Somáticas. Las células somáticas son células corporales que están
conformadas por leucocitos y células epiteliales, llegan a los tejidos desde la sangre
y conductos de la glándula mamaria, actúan como respuesta defensiva contra una
lesión inflamatoria generalmente de tipo infeccioso en la glándula y son un indicador
directo de mastitis, únicamente son liberadas en gran cantidad cuando y donde son
necesitadas (infección/lesión). Tras el ataque bacteriano al interior de la glándula
mamaria se produce una respuesta del sistema inmune del organismo enviando
glóbulos blancos de la sangre con el fin de neutralizar el efecto de los agentes
patógenos causantes del daño a la glándula mamaria, el cual puede ser
determinado por el número de células somáticas en la leche.
En una glándula mamaria sana en recuento de células somáticas es muy baja y
corresponde a células epiteliales y células inmunes, tiene concentraciones de
menos de 105 células somáticas por ml; no obstante, la variación individual es
amplia y se informa de valores que oscilan entre 104 y 107 células por mililitro
(Cuchillo, 2010).
3.2.5 Manejo Higiénico-Sanitario del Proceso de ordeño.
Diversos estudios demuestran que las infecciones se transmiten desde vacas
infectadas hacia vacas no infectadas durante el ordeño a través del equipo,
38
manipuladores, y de los elementos empleados para la limpieza de los pezones.
También, existen diversos tipos de microorganismos que puede ser transmitido por
material o equipo contaminado de una glándula mamaria enferma a otra durante la
práctica de ordeño (Rivera ,2014).
3.2.5.1 Rutina de ordeño. Una buena rutina de ordeño involucra una serie de
medidas higiénicas y de manejo desde que el animal entra a la sala de ordeño hasta
que sale una vez finalizada la ordeña. Estas medidas permiten reducir
considerablemente la contaminación microbiana de la leche, aumentar la
producción, acortar el tiempo de la ordeña y reducir la transmisión de organismos
patógenos contagiosos y ambientales que pueden causar mastitis (Kruze, 1998).
El ordeño debe llevarse a cabo en condiciones que garanticen la sanidad de la ubre,
permitan obtener y conservar un producto con las características de calidad, para
realizar un buen ordeño se deben seguir unos pasos muy importantes (Tabla 3).
Tabla 3. Rutina de ordeño
Pre – Ordeño Ordeño Pos - Ordeño
-Ambiente limpio y tranquilo para
las vacas
- Alistamiento de utensilios e
indumentaria
- Asegurar la vaca
- Lavar pezones e la vaca
- Despunte
- Amamantar la cría (si la vaca
está en etapa de lactancia)
- Asegurar la cría
- Desinfectar pezones de la vaca
- Secar pezones
- Extraer leche
- Sellado de pezones
- Liberar vaca de la sala de ordeño
-Pesar y registrar producción de la
vaca
Fuente: Rincon, 2019
39
3.2.6 Pruebas y métodos de detección.
El diagnóstico de Mastitis Bovina debe estar orientado al conocimiento de la
prevalencia de la enfermedad en el hato, presentación de la enfermedad y
microorganismos involucrados, teniendo en cuenta elementos básicos de un
proceso inflamatorio de origen infeccioso, presencia de células polimorfonucleares
y aislamiento del agente etiológico que coloniza la glándula mamaria.
3.2.6.1 Prueba de California para Mastitis (CMT). El test de California (CMT)
Consiste básicamente en tomar una muestra de cada cuarto de la vaca y añadir el
reactivo Lauril Sulfato de Sodio para reaccionar con el DNA celular produciendo una
viscosidad que es directamente proporcional al número de células somáticas
presentes en la muestra de leche. La interpretación de esta prueba es subjetiva, ya
que no proporciona un resultado numérico, esta indica si el recuento de células
somáticas es elevado o bajo, por lo que todo resultado por encima de una reacción
vestigial se considera sospechoso de mastitis (Acuña, 2008; Bedolla et al., 2007).
3.2.6.1 Prueba de Wisconsin para Mastitis (WMT). La Prueba de Wisconsin para
Mastitis (WMT), está diseñada para estimar el contenido de células somáticas de
muestras de leche fresca mezclada o leche de tanques de enfriamiento, así como
para muestreo de vacas individuales. Se utiliza una solución similar a la que se
emplea con la prueba de California (CMT), pero en contraste con esta última, los
resultados se miden cuantitativamente dependiendo de la viscosidad, no
cualitativamente o de estimarla a ojo de buen cubero como en la CMT (Bedolla et
al., 2007).
40
3.2.6.2 Método Fluoro-Opto-Electrónico Fossomatic. El método Fluoro-opto-
electrónico Fossomatic es el más utilizado en la industria lechera para medir el
recuento de células somáticas (RCS), está basado en la tinción fluorométrica del
material nuclear y posee alta correlación con la microscopía óptica, por lo que
proporciona una medida segura en el recuento de células somáticas, utilizando un
equipo denominado fossomatic (Echeverri et al., 2010).
Durante el proceso de medición se tiñen las células somáticas con un colorante
fluorescente para obtener una reacción sólo con el DNA de las células,
generalmente bromuro de etidio. Por esta razón las partículas sucias y los glóbulos
de los lípidos no se suman al número de las células somáticas. La muestra pasa por
una membrana de poros finos frente a una luz especial y un detector registra cada
célula somática. Entre cada muestra el aparato limpia su sistema de flujo para evitar
que se contamine una muestra a otra, gracias a esta tecnología el fossomatic ofrece
unos resultados con un alto grado de precisión y exactitud en el RCS, además
brinda da la posibilidad de registrar los datos automáticamente (Echeverri et al.,
2010).
3.2.6.3 DeLaval Cell Counter. El DeLaval Cell Counter (DCC) es un equipo portátil,
funciona con batería y posee un medidor óptico de células somáticas de la leche.
Esto permite estudiar el estado de salud de la ubre de la vaca, también posibilita el
estudio de los estándares higiénicos en la leche del tanque. El equipo utiliza
casettes los cuales succionan cantidades pequeñas de leche, ya dentro de estos la
leche se mezcla con reactivos que llegan al núcleo de las células somáticas, lo cual
permite su conteo, mediante un sensor de fluorescencia (Bedolla et al., 2007).
3.2.6.4 Prueba de Whiteside. Esta prueba consiste en mezclar las muestras de
leche con una solución de Hidróxido de Sodio (NaOH) al 4%; ocasionando que la
41
leche se gelifique formando así grumos indicativos de mastitis. Los grumos serán
más grandes conforme la leche contenga mayor número de células somáticas. Para
hacer más visible la reacción es conveniente usar una placa de acrílica negra que
puede tener dibujada 4 cuadros de 3cm x 3cm, uno por cada cuarto (Bedolla et al.,
2007).
3.2 Bases legales
La realización de este proyecto está sujeto a la Resolución 017 de 2012, Decreto
616 de 2006 del Ministerio de Agricultura, ISO 13366-2:2006 y la Resolución 3585
de 2008.
La Resolución 017 de 2012 establece el sistema de pago de la Leche Cruda al
Proveedor, resuelve las bonificaciones y/o descuentos por concepto de la calidad
higiénica de la leche (artículo 5), calidad sanitaria (artículo 6), calidad composicional
(artículo7).
El Decreto 616 de 2006 Por el cual se expide el Reglamento Técnico sobre los
requisitos que debe cumplir la leche para el consumo humano que se obtenga,
procese, envase, transporte, comercializa, expenda, importe o exporte en el país,
establece los requisitos para la obtención de leche en producción, requisitos que
deben cumplir los hatos productores de leche (artículo 5), rutinas de ordeño (artículo
6), salud e higiene del personal de ordeño (artículo 8), requisitos microbiológicos
de la leche líquida (artículo 19).
La ISO 13366-2: 2006 proporciona orientación sobre las condiciones de análisis
para el recuento de células somáticas, usando contadores de células somáticas
fluoro - opto – electrónicos, por técnica de disco giratorio o citometría de flujo
42
aplicada en la sección de conteo. La orientación es aplicable al recuento de células
somáticas en la leche de vaca cruda y de otras especies, tales como cabra, oveja y
búfalo, si se cumplen los requisitos especificados.
La Resolución 3585 de 2008 establece el sistema de inspección, evaluación y
certificación oficial de la producción primaria de leche, de conformidad con lo
dispuesto en el Capítulo II del Título I del Decreto 616 de 2006. Establece los
estándares de ejecución sanitaria en predios de producción primaria en el capítulo
IV donde especifica los requisitos sanitarios para las instalaciones y áreas de
ordeño.
43
4. MATERIALES Y MÉTODOS
4.1 CLASIFICACIÓN DE LA INVESTIGACIÓN
Esta investigación es de tipo descriptiva.
4.2 POBLACIÓN DE ESTUDIO, MUESTRA, TIPO DE MUESTREO, CRITERIOS
DE INCLUSIÓN Y EXCLUSIÓN
La población de estudio, estuvo enmarcada en 352 vacas, en hatos medianos del
sur del departamento de La Guajira, se muestreo el 30% de la totalidad de la
población, obteniendo 104 muestras por muestreo no probabilístico por
conveniencia.
4.2.1 Criterios de inclusión.
- Hatos lecheros ubicados en el departamento de La Guajira
- Bovinos hembras en edad reproductiva y en periodo de lactancia
- Ganado que no presente tratamientos con antibióticos
-Vacas sin lesiones en ubre y pezón
44
4.2.2 Criterios de exclusión.
-Hatos lecheros no ubicados en el departamento de La Guajira
-Vacas en tratamiento con antibióticos
-Vacas con lesiones en ubre y pezón
4.3 SISTEMA DE VARIABLES
Tabla 4. Operacionalización de las variables
Variable Definición Nivel de
medición
Criterio de clasificación
Mastitis
La mastitis es una reacción inflamatoria en
los tejidos secretores o conductores de la
leche en la glándula mamaria, como
respuesta a una lesión traumática o
infección bacteriana.
Cualitativa
ordinal
Ausencia o Presencia
Etapa de
lactancia
Período que comienza con el parto de la
vaca.
Cuantitativa
discreta
Meses (1,2,3)
Buenas
prácticas de
ordeño
(BPO)
Involucra la planificación y realización de
una serie de actividades necesarias para
el cumplimiento de los requisitos mínimos
en la producción de leche apta para el
consumo humano y para su adecuado
procesamiento en la elaboración de
productos lácteos.
Cualitativa
ordinal
Aplica o No aplica
45
Tabla 4. (Continuación)
Número de
partos de la
vaca
El parto es el proceso fisiológico por el cual
el útero gestante expulsa de la madre, en
el momento apropiado al feto y su
placenta.
Cuantitativa
discreta
1,2 y 3
Recuento
de células
somáticas
(RCS)
Indica el estado de salud de la glándula
mamaria de la hembra lactante, el cual es
ampliamente utilizado para el control de la
calidad higiénica en producción lechera
Cuantitativa
discreta
Rango aceptado:
≤ 200.000 células/ml
Mastitis subclínica:
200.000-500.000 células/ml
Mastitis clínica:
500.000-1.000.000 células/ml
Fuente: Rincon, 2019
4.4 Diseño metodológico
Etapa 1. Aplicación de encuesta
Basado en el manual de Buenas Prácticas de Ordeño (BPO) de Olancho (2010), y
el trabajo de grado desarrollado por Ávila Eduardo, Quintero Erika y Nobles Luis
Eduardo (2017) se diseñó una encuesta encaminada a determinar los factores
influyentes en la calidad sanitaria y la aplican las BPO (Ver Anexo 1).
Etapa 2. Toma y transporte de las muestras.
Durante esta etapa se recolectaron las muestras de leche cruda en los hatos
participantes en el estudio, mediante un muestreo por conveniencia se eligieron los
bovinos que cumplían con los criterios de inclusión, se tomaran 60 mL de leche por
vaca a vaca, de los cuatro cuartos de la ubre.
46
Las muestras de leche cruda se recolectaron durante el primer ordeño que se realiza
en horas de la mañana y bajo la eliminación de los primeros chorros. Estas se
tomaron en recolectores tipo click con capacidad de 70 mL. Las muestras se
rotularon externamente según el sistema de identificación del animal en un formato
de toma de muestras (Ver anexo 2) y se llevaron a conservación en neveras con
geles refrigerantes para garantizar la temperatura de las muestras entre 1-10 °C y
se conservaron con bronopol (bactericida) para estabilizar las muestras.
Las muestras tomadas, conservadas y empacadas se trasportaron en cavas de
forma inmediata al Laboratorio Calidad e Inocuidad de la Leche Universidad de
Antioquia, el tiempo entre la toma y recepción de las muestras no excedieron las 48
horas con el fin de ser procesadas a nivel de laboratorio. El seguimiento de las
muestras se testeó a través de un formato de cadena de custodia de la muestra.
(Ver anexo 3).
Etapa 3. Análisis de laboratorio.
FASE 1: Recuento de Células Somáticas
Una vez entregadas las muestras al laboratorio de Calidad e Inocuidad de la Leche
Universidad de Antioquia, se analizaron bajo el conteo de células somáticas
contenidas por mL mediante el método normalizado ISO-13366-2, IDF 148-2; 2006,
por Citometría de flujo.
FASE 2: Cultivo bacteriológico y tipificación bacteriana
Las muestras de leche con recuentos mayores o iguales a 300.000 células/mL,
fueron sembradas en agar sangre, se incubaron entre 18 y 24 h. Posteriormente se
realizó la coloración de Gram para determinar morfología y tinción clasificándolas
como cocos o bacilos Gram positivos y Gram negativos. A los cocos Gram positivos
47
se les realizo la prueba de la catalasa, y la prueba de la Coagulasa, clasificando los
cocos como Coagulasa positivos o negativos. Posteriormente, se confirmó género
y especie; de tal manera que se pudo discriminar entre Staphylococcus aureus de
otros estafilococos Coagulasa positivos. Los cocos Gram positivos catalasa
negativos se identificaron como Streptococcus sp. a los cuales se les efectuó la
prueba de CAMP, hidrólisis de la esculina. (Los registros se generaron en el formato
de seguimiento y resultados primarios. (Ver anexo 4)
Etapa 4. Análisis e interpretación de resultados
1. Análisis de los datos
Recolección de la información: fuente primaria a través de una encuesta se
recolectaron datos de cada vaca y descripción del ordeño por observación.
Plan de análisis (análisis estadísticos) Una vez obtenidos y tabulados los datos
utilizando el programa Excel, se desarrolló un análisis estadístico mediante tablas
de contingencia y una prueba chi cuadrado (χ2) para determinar el grado de
asociación entre las variables estudiadas y la presencia de mastitis subclínica en
los predios, mediante el software estadístico SPSS versión 25.0.
48
5. RESULTADOS
Los siguientes resultados se presentan con base en la encuesta aplicada y el
análisis de muestras a nivel de laboratorio. Se pudo evidenciar que no se aplican
las BPO, se identificaron variables que influyen a nivel de hato y aquellas de mayor
importancia en los RCS para la presencia de mastitis.
Tabla 5. Variables Buenas Practicas de Ordeño (BPO)
VARIABLES CUMPLE NO CUMPLE
1. INSTALACIONES
Local de ordeño con piso de cemento 100%
Local de ordeño con techo (teja o zinc) 100%
Reservorio de agua 100%
2. MANEJO ANIMAL
Limpieza y desinfección de la ubre antes del ordeño 41,7% 58,3%
Inmovilización y estimulación de las vacas 43,5% 56,5%
Sellado 73,1% 26,9%
Arreado del animal con tranquilidad y buen trato 100%
3. CONDICIÓN DEL ORDEÑADOR
Lavado de mano antes, durante y después de cada ordeño 71,3% 28,7%
Adecuado atuendo para realizar el ordeño 28,7% 71,3%
Capacitaciones 100%
4. CONDICIÓN HIGIÉNICO SANITARIA
Certificación de sanidad animal ICA 100%
Limpieza y desinfección adecuada de los utensilios de trabajo
(Yogos, Filtros de aluminio, Baldes plásticos)
100%
Fuente: Rincon, 2019.
La Tabla 5, presenta los factores que hacen referencia a las instalaciones, los
resultados muestran que el 100% no cumplen estos requisitos a nivel de hato. En
relación con las actividades que se realizan en el manejo del animal durante el
ordeño se observó que en la práctica limpieza de ubre, el 58,3%, no realiza esta
49
práctica para realizar el ordeño, mientras que el 41,7%, si la realiza, sobre la
Inmovilización y estimulación del animal, la respuestas fue de un 43,5% que Si,
frente a un 56,5% respondieron que No, con la observación que el 43% que
respondió Si, indico que la técnica que utiliza para la inmovilización de las vacas es
la de “maneado”. Para la actividad de sellado la respuesta fue que el 26,9% no lo
realiza, mientras que el 73,1 si lo realiza, con la observación que este se hace con
el ternero. En relación con el lavado de manos durante y después de cada ordeño,
el 28,7% de los encuestados No realiza esta actividad durante este proceso. Con
respecto al atuendo y a las capacitaciones se observa un incumplimiento del 71,3%
y un 100%, respectivamente.
Los resultados obtenidos en la fase de procesamiento de muestras a nivel de
laboratorio, están enfocado al recuento de células somáticas (RCS), se presentan
los datos de los diferentes hatos lecheros, con valores mínimos entre 10 000 y 196
000 cel/mL y máximos entre 1 000.000 y 10 000.000 cel/mL. El 63% del total de las
muestras estuvo entre 10 000 y 200 000, y solo el 7% presentaron infección severa
(Figura 1).
Figura 1. Resultados en el recuento de células somáticas RCS
Fuente: Rincon, 2019
63%18%
1…
7%
RECUENTO CELULAS SOMATICAS
Cuarto sano < 200 000 cel/mL M subclinica 200 000 - 500 000 cel/mL
M clinica 500 000 - 1 000 000 cel/mL Infeccion severa > 1 000 000 cel/mL
50
Tabla 6. Periodo de lactancia
Número de vacas
muestreadas
Periodo de lactancia
(meses)
Número de vacas Porcentaje
104
1-3 14 12,0%
4-6 46 45,4%
7-9 44 42,6%
Suma 104 100%
Fuente: Rincón, 2019.
En la Tabla 6 se muestra que el 45,4% se encuentran en un periodo de lactancia
que va de 4 – 6 meses, que un 42,6% están entre los 7 – 9 meses, y solo el 12,0%
se encuentra entre 1 – 3 meses.
Tabla 7. Número de partos
Número vacas muestreadas Número de partos Número de vacas Porcentaje
104
1 35 35,2%
2 61 57,4%
3 8 7,4%
Suma 37 100%
Fuente: Rincón, 2019.
En la tabla 7 se observa que los resultados de las encuestas sobre el número de
partos en las vacas, se encontró que el 57,4 son vacas con 2 partos, el 35,2 a vacas
con un solo parto y el 7,4 a tres o más partos.
Se analizaron un total de 13 variables, de las cuales 4 están estadísticamente
asociada con la presencia de mastitis por la prueba de chi cuadrado (χ2); la totalidad
de estos factores adversos se encuentran relacionados con la no aplicación de las
medidas de buenas prácticas de ordeño (Tabla 8).
51
Staphylococcus aureus73,6%
Streptococcus agalactiae 26,4 %
AGENTES ETIOLOGICOS
Tabla 8. variables asociadas estadísticamente a Mastitis
Variables P < 0,05
1. Limpieza de la ubre ,010
2. Lavado de manos ,004
2. Número de partos ,003
3. RCS ,001
Fuente: Rincón, 2019.
Los análisis microbiológicos permitieron determinar 19 aislamientos, identificándose
en un 100% como Gram positivas, estas fueron cultivadas en agar sangre
encontrándose que el 73,6% correspondiente a 14 cepas, fueron catalasa y
Coagulasa positivos clasificándose como Staphylococcus aureus. Adicionalmente,
se encontró que 5 cepas correspondientes al 26,4 % mostraron actividad beta
hemolítica en agar sangre, presentando actividad negativa para la prueba de la
catalasa, y morfología de cocos en cadenas cortas, posteriormente a estos aislados
se les realizo la prueba de CAMP y bilis esculina, clasificándose estas cepas como
Streptococcus agalactiae (Figura 2).
Figura 2. Resultados en la Identificación del agente etiológico
Fuente: Rincon, 2019.
52
6. DISCUSIÓN
Es importante destacar que los sistemas de producción de la zona estudiada,
corresponden a economías familiares que están formadas por explotaciones con un
bajo número de animales el cual oscila entre 5 y 30 animales máximo (datos no
mostrados) y con un sistema de ordeño manual en todos los hatos estudiados y
niveles de tecnificación muy bajos; en la mayoría de los predios no se implementan
BPO y ni siquiera conocen su significado. El ordeño manual, propio de los países
en vías de desarrollo, es la manera común de extraer la leche de las vacas; es un
proceso lento que, junto a las formas de ordeño que utiliza el ordeñador,
probablemente provocan daños de diversa magnitud en el tejido glandular secretor
de leche; es decir, guardan relación con la habilidad del ordeñador y sus formas de
ordeño (Huaynacho & Alexis, 2017),).
Inicialmente, con el fin de caracterizar los factores higiénico-sanitarios durante el
ordeño se aplicaron encuestas en las que se, evidencian la falta de reservorio con
agua clorada o pila de cemento para el lavado previo y posterior de los utensilios de
ordeño, la higiene en las manos de los ordeñadores, la limpieza y desinfección de
la ubre del animal, el incumplimiento de estas variables, repercute en la
contaminación microbiológica de las glándulas mamarias del bovino causando
pérdidas en el volumen de la producción lechera. Demostrando que, aunque se
cumplan con algunos, si no se aplican todos los requisitos en los hatos estos pueden
incidir en casos de mastitis (Tabla 5).
Lo descrito anteriormente concuerda con lo señalado por Kingwill et al., (2009) el
cual realizó una investigación con rebaños comerciales observando incumplimiento
en factores como, alojamiento inadecuado “Instalaciones físicas” 45.5% y algunas
medidas higiénicas para el proceso de ordeño, básicamente limpieza y desinfección
53
de utensilios de ordeño con soluciones cloradas 38%, observando que el
cumplimiento de estos criterios puede reducir la frecuencia de mastitis hasta en un
50% en un año. Cuhigen (2007), afirma que el uso de agua clorada es uno de los
factores de mayor importancia dentro de la higiene y el cuidado animal, por lo que
es necesario verificar la calidad de la misma con una frecuencia de al menos dos
veces al año.
Los aspectos evaluados en la variable condiciones del ordeñador, se observa que
el 100% de los hatos analizados, incumplen en el lavado de manos antes, durante
y después de cada ordeño, no poseen un adecuado atuendo o ropa para realizar tal
actividad y no reciben formación o capacitaciones orientadas a las BPO, lo cual,
convierte al recurso humano como la principal falla dentro de la rutina de ordeño en
todos los hatos. Las Buenas prácticas de ordeño deben reducir la introducción de
gérmenes patógenos provenientes de cualquier fuente, es claro que el
incumplimiento de estas, está dado con mayor influencia en el no lavado de manos
antes, durante y después de cada ordeño, esto debido a que se propicia la
diseminación de agentes patógenos de una vaca a otra, evidenciado por un
aumento en el RCS, conllevando a no garantizar la sanidad de la ubre y adecuados
parámetros de calidad de la leche. Saran, (2000), indica que las manos del operario
son un medio para transmitir los microorganismos de la mastitis, su contaminación
puede ocurrir cuando se extrae el primer chorro de leche, en el manejo de
pezoneras, o tocando cualquier objeto contaminado en el hato.
El ordeñador influye sobre muchos de los factores y en consecuencia sobre la
calidad higiénica de la leche, de esta forma, debe ser obligatorio para el productor
tener programas de capacitación que permitan al ordeñador u operario tener
habilidades en temas como salud y manejo animal, proceso de ordeño, practicas
higiénicas en la manipulación de la leche e higiene personal. La producción de la
leche se relaciona directamente con la sanidad de la ubre al mantener unas
condiciones de ordeño apropiadas; sin embargo, el bajo nivel tecnológico y de
54
asistencia técnica van en contravía de estas medidas y por esta razón la gran
mayoría de patógenos en la zona del estudio está representada por patógenos
contagiosos, más que por ambientales, lo cual indica que las infecciones mantienen
su ciclo epidemiológico dentro de los hatos. Solo en la medida que se ofrezca una
capacitación adecuada para el conocimiento de las medidas sanitarias apropiadas,
y su aceptación e implementación, se logrará que los ganaderos puedan mejorar
las producciones; la asociatividad ha sido un punto clave en el proceso de
mejoramiento de las condiciones higiénico sanitarias de la producción de leche.
Las malas prácticas ganaderas en la implementación de las medidas profilácticas,
hace que algunos de estos microorganismos puedan llegar a desarrollar signos
sistémicos en la vaca e incluso, provocar la muerte. Los hallazgos etiológicos
descritos están en directa relación con lo encontrado al diligenciar la encuesta, ya
que los patógenos medioambientales y contagiosos proliferaban en aquellos hatos
donde se determinaron fallas en las prácticas de prevención y control de la mastitis,
así como en la implementación de la higiene de la ubre antes, durante y después
del ordeño, o la presencia de un ambiente contaminado por la presencia de heces,
aguas encharcadas y lodazales (Olivares-Pérez et al. 2015).
En cuanto a los análisis de laboratorio se logra evidenciar altos RCS clasificados
según el estado de la ubre como mastitis subclínica, clínica e infección severa. Debido
a que en cada país la normativa varía y a criterios dispersos para establecer un
rango adecuado, se han presentado datos como RSC <400 000 cel./mL para
productos de buena calidad (Jánosi & Baltay, 2004) y para muestras asociadas con
mastitis bovina mayores a 500 000 cel./mL (Fell et al., 2003); mientras que varias
investigaciones con conteos <100 000 cel./mL definen que los animales se
encuentran sanos y con leche de mejores características (Pavel & Gavan, 2011;
Bytyqi et al., 2010; Hamann, 2002), y a valores superiores pueden presentar mastitis
subclínica o clínica, ya que las infecciones bacterianas hacen que estos valores
55
asciendan hasta 1 000 000 cel./mL clasificándolas como infecciones severas (Bytyqi
et al., 2010).
Los valores medios de células somáticas RCS/mL hallados fueron de 537.520,
687.380 y 923.818 CS/mL, respectivamente, presentando valores mínimos entre
24.000 y 147.000 CS/mL y máximos entre 1.583.000 y >10 000 000 cel/mL. Estos
hallazgos se correlacionan con los resultados obtenidos en las variables
relacionadas con BPO, donde se observan falencias en todos los hatos incluidos en
el estudio; éstos presentaron incumplimiento tanto en factores ambientales como
contagiosos, visto desde un enfoque que las bacterias que invaden el canal del
pezón de forma infecciosa, se diseminan entre una o diferentes vacas de un hato
como resultado de prácticas de manejo inadecuadas y ambientales, debido a que
están presentes en el medio del animal y penetran en la ubre cuando se dan
determinadas condiciones tales como: clima, época del año, higiénico sanitaria, etc.
Recuentos altos indican que hay más del 10% de pérdidas en la producción por mastitis
subclínica y que no hacen unas buenas prácticas de manejo, lo que llevaría a los
animales a una infección más avanzada como es la mastitis clínica. De acuerdo con
García (2004), recuentos de 500.000 células/ml pueden implicar que se presente una
disminución de hasta un 18% en la producción del animal, disminución que puede llegar
hasta un 30% para recuentos de 1´500.0000 células/mL.
Actualmente la norma colombiana no establece un rango en RSC/mL. El 63% del
total de las muestras estuvo entre 24.000 y 200.000 CS/mL, consideradas como
leches buenas (CALDERON et al., 2006). Estos autores también indicaron que
leches regulares y malas son las que tienen un RCS/mL entre 200.000 y 400.000, y
mayor a 400.000, respectivamente; los valores hallados en este trabajo indican que
el 18% de las leches muestreadas aplican para leches regulares en RCS/mL y el
21% restante para leches de mala calidad. RCS/mL menores o igual a 200.000
pueden ser considerados como buenos, pero con casos de mastitis subclínica. Los
resultados obtenidos en este trabajo nos indican que en más del 90% de las
56
empresas ganaderas evaluadas se presentan casos de mastitis subclínica y clínica,
factor que acrecienta la necesidad de implementar programas de prevención y
control de la mastitis en los hatos ganaderos del departamento de La Guajira. Para
obtener bajos RCS, los ordeños se deben incluir en la rutina de ordeño la vigilancia
de mastitis mediante pruebas o métodos de detección, vigilar el material con el que
se realiza el secado de las manos del ordeñador, incluir el despunte, usar filtro en
los tanques, garantizar la permanencia del ternero con la vaca no más de 6 horas y
realizar el tratamiento de secado.
En cuanto a los microorganismos relacionados con la presencia de mastitis en los
hatos (Figura 2), se pudo determinar que en 75% de los cultivos bacteriológicos de
las muestras analizadas de cuartos mamarios positivos se aisló el microorganismo
Staphylococcus aureus, y en un 25% Streptococcus agalactiae. Estos agentes se
consideran microorganismos contagiosos y están relacionados directamente con
malas prácticas de ordeño.
Estos hallazgos coinciden con los encontrados por Calderón y Rodríguez (2008)
quienes determinaron que del 49% de los cultivos bacteriológicos de muestras de
leche procedentes de cuartos mamarios positivos al CMT se aislaron
microorganismos contagiosos incluyendo Staphylococcus aureus, otros
Staphylococcus coagulasa positivos (SCP) (Staphylococcus intermedius y
Staphylococcus hyicus), Streptococcus agalactiae y Corynebacterium bovis. De otra
parte, se ha reportado a los microorganismos contagiosos como la causa más
importante en otras regiones lechera como el altiplano cundiboyacense, con una
prevalencia del 68,9%, el 93% en la región de Duitama y en el Valle de Ubaté, en
donde el 67,9% de las mastitis subclínicas correspondieron a este mismo grupo de
microorganismos contagiosos (Calderón y Rodríguez 2008).
De igual manera (Calderón et al. 2011), reporto prevalencias del 87,6% de
Staphylococcus, en sistemas doble propósito como el utilizado en este estudio, que
57
permiten afirmar que la mastitis por microorganismos contagiosos continúa siendo
una problemática en la producción de leche bajo sistemas especializados y no
especializados como se encontró en la provincia de Pamplona.
El Staphylococcus aureus, fue el microorganismo con mayor prevalencia
encontrado con un 75% en el presente estudio, siendo este el principal aislamiento
en diferentes estudios a lo largo del país (Contreras y Ordoñez 1994; Ramírez et al.
2001; Calderón y Rodríguez 2012; Calderón et al. 2011) así como en otras partes
del mundo (Gianneechini et al. 2002; Persson 2011). Sin embargo, en algunos
sistemas de producción en nuestro medio, el Streptococcus agalactiae sigue siendo
el principal microorganismo involucrado.
Así, Ramírez et al. (2011) encontraron una prevalencia de 34% para los
Streptococcus y de 10,2% para los Staphylococcus; La presencia de
Staphylococcus aureus, como el mayor patógeno encontrado, pone de relevancia
la incidencia de patógenos contagiosos como causantes de mastitis, toda vez que,
al ser el ordeño manual el sistema utilizado en las explotaciones estudiadas, este
microorganismo puede ser fácilmente contagiado debido a que se ha aislado de
piel, así como de heridas en proceso de cicatrización, cavidad nasal de novillas,
piso del establo, manos de los ordeñadores, de animales diferentes a los bovinos,
de los equipos de ordeño y de las camas de los establos(Keefe 2012).
Igualmente, Ramírez et al., 2016 resaltan la alta frecuencia del Streptococcus
agalactiae, el cual se transmite principalmente durante el ordeño, este
microorganismo se puede encontrar en superficies que hayan tenido contacto con
leche contaminada, como el equipo de ordeño y las manos del ordeñador, las malas
condiciones de higiene durante la rutina de ordeño favorecen su presentación. Las
buenas prácticas de ordeño de los hatos del estudio fueron descritas previamente;
en estas se identificó que el lavado de manos del ordeñador antes del ordeño, el
sellado y el lavado de los pezones (Tabla 5), era efectuado en un 72% y 13.3%,
58
respectivamente. Por lo tanto, la presencia de la bacteria Streptococcus agalactiae
podría estar asociada a las deficiencias en la higiene descritas anteriormente. Así
mismo (Rodríguez 2006), determino que el Streptococcus agalactiae fue más
prevalente en el ordeño manual y presentó el mayor porcentaje de infección con
respecto al mecánico con 61,7 y 50%, respectivamente.
La presencia de Staphylococcus aureus, como el mayor patógeno encontrado en
el presente estudio, pone de relevancia la incidencia de patógenos contagiosos
como causantes de mastitis, toda vez que, al ser el ordeño manual el sistema
utilizado en los hatos estudiados, este microorganismo puede ser fácilmente
contagiado debido a que se ha aislado de piel, así como de heridas en proceso de
cicatrización, de la cavidad nasal de novillas, del piso del establo, del alimento, de
las manos de los trabajadores, de animales diferentes a los bovinos, de los equipos
de ordeño y de las camas de los establos. Adicionalmente, puede ser diseminado
por las manos de los ordeñadores, por toallas no desechables y por las moscas de
establo; su importancia radica en la presencia de diversos factores de virulencia
(leucocidinas, coagulasas, proteinasas, cápsula y resistencia a antibióticos) que,
junto a algunas prácticas, como la falta de detección y segregación de los animales
enfermos, ayudan a su persistencia debido a las malas prácticas de ordeño, las
cuales fueron predominantes en los hatos estudiadas.
La producción de la leche se relaciona directamente con la sanidad de la ubre al
mantener unas condiciones de ordeño apropiadas; sin embargo, el bajo nivel
tecnológico y de asistencia técnica van en contravía de estas medidas y por esta
razón la gran mayoría de patógenos en la zona del estudio está representada por
patógenos contagiosos, más que por ambientales, lo cual indica que las infecciones
mantienen su ciclo epidemiológico dentro de los hatos. De otra parte, solo en la
medida que se ofrezca una capacitación adecuada para el conocimiento de las
medidas sanitarias apropiadas, y su aceptación e implementación en los hatos, se
logrará que los ganaderos puedan mejorar sus producciones.
59
7. CONCLUSIONES
Según los objetivos planteados y los resultados obtenidos en la investigación, se
llegan a las siguientes conclusiones:
Se puede señalar que la calidad higiénica de la leche depende del entorno y las
condiciones en el momento del ordeño, en consecuencia, la contaminación de la
leche es debida a las malas prácticas de higiene en la rutina de ordeño tales como
limpieza de la ubre, lavado de manos del ordeñador antes durante y después del
ordeño que favorecen el aumento de los recuentos de células somáticas,
incrementando de esta manera los casos de mastitis y disminuyendo la calidad del
producto.
Basados en la encuesta y los resultados obtenidos se identificaron factores que
influyen de forma directa en los altos recuentos de células somáticas en los hatos
lecheros participantes en el estudio, entre los cuales, se encuentran número de
partos de la vaca, periodo de lactancia, como también la deficiente higiene personal
del ordeñador durante el desarrollo de dicha práctica, de igual manera la falta de
formación o capacitaciones orientadas a BPO para el personal de ordeño.
De acuerdo a los resultados de laboratorio, se detectó mastitis subclínica en el 18%
de las vacas lactantes incluidos en el estudio en el parámetro de Conteo de Células
Somáticas realizado por recuento automatizado, basado en estos resultados y las
características del hato es necesario realizar periódicamente análisis de leche total
y de vaca a vaca en producción, debido a que este comportamiento se presenta al
tener vacas con mastitis clínica.
Por último, el principal microorganismo asociado a mastitis subclínica en los hatos
estudiados fue Staphylococcus aureus el cual se asocia con la ocurrencia de
60
mastitis de tipo contagioso; esto parece derivarse de los altos recuentos de células
somáticas asociados a las malas prácticas de ordeño, las cuales fueron evidentes
en los predios estudiados, y están relacionadas de manera significativa con la
presencia de mastitis subclínicas; por su parte, las mastitis contagiosas se asocian
con la presencia de un número importante de vacas con pocos cuartos infectados,
por lo que se requiere implementar medidas básicas de control que apunten
fundamentalmente a la prevención; la capacitación constante del personal
involucrado directamente con el proceso es esencial; estas medidas tradicionales
podrían reducir el riesgo de incidencia de la enfermedad.
61
8. RECOMENDACIONES
• Implementar programas de prevención y control a nivel de hatos de producción
lechera.
• Continuar con la detección y control de mastitis subclínica en hatos lecheros.
• Realizar estudios de prevalencia de mastitis subclínica y factores de riesgo en
otros hatos lecheras del sur de la Guajira utilizando diversos métodos de
diagnóstico.
• Realizar seguimiento a los hatos con conteos altos de Células Somáticas,
relacionados con mastitis subclínica y clínica.
• Continuar evaluando las Buenas Practicas de Ordeño en los diferentes hatos,
debido a que esta es una de las principales fuentes de contaminación y entrada
de microorganismos a la ubre.
62
9. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
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ANEXOS
Anexo 1. Encuesta
74
Anexo 2. Toma de muestras
75
Anexo 3. Cadena de custodia
76
Anexo 4. Sabana de registros de laboratorio para el aislamiento e identificación de
microorganismos.
77
Anexo 5. Informes de Resultados Laboratorio Calidad e inocuidad de la Leche
78
Anexo 6. Pruebas bacteriológicas a muestras de leche
Cultivo Staphylococcus aureus en
agar sangre
cultivo Streptococcus agalactiae en
agar sangre
Cocos gram positivos, agrupados
en racimos
Prueba Bilis Esculina positiva
Prueba de Catalasa positiva
(Izquierda), negativa (Derecha)
Prueba de Coagulasa
positiva
Fuente: Rincon E, 2019.
79
Anexo 7. Registro fotográfico
