UNIVERSIDAD TCNICA PARTICULAR DE LOJA

TITULACIN DE BIOQUMICA Y FARMACIA CULTIVOS CELULARES

Alumna: Olga Fabiola Bravo Arias

CONSULTA MEDIO DE CULTIVO

En trminos generales lasclulas cultivadas requieren un ambiente estril y un suministro de nutrientes para su crecimiento. Adems, el ambiente de cultivo debe ser estable en trminos de pH y temperatura. En los ltimos 30 aos se han desarrollado diversos tipos de medios basales definidos y ahora estn disponibles en el mercado. Algunos ejemplos de medios de cultivos para tenemos:

Octomed: Medio libre de suero y protena con 2.1g de NaHCO3 y sin L-

glutamina, diseado para el crecimiento de clulas de ovario de hmster chino.

Los componentes de alta pureza que se utilizan para la

fabricacin de este medio proporcionan resultados

consistentes y fiables. La formulacin hace que sea una

excelente opcin para la produccin y purificacin de

protenas recombinantes. Las densidades celulares

obtenidos en octomed son comparables a los de los

medios que contiene suero. [2]

RPMI-1640: fue desarrollado por Moore et. al. en el Roswell Park Memorial Institute, de ah el acrnimo RPMI. La formulacin se basa en la serie de medio RPMI-1630 de los medios de cultivo que utiliza un sistema de amortiguacin de bicarbonato y alteraciones en las cantidades de aminocidos y vitaminas. Medio RPMI-1640 ha sido utilizado para el cultivo de leucocitos normales y neoplsicas humanas. RPMI-1640, cuando se suplementa adecuadamente, ha demostrado una amplia aplicabilidad para apoyar el crecimiento de muchos tipos de clulas cultivadas, incluyendo linfocitos humanos frescos en fitohemaglutinina (PHA) por 72 horas en ensayo de

estimulacin. Entre las diferentes formulaciones de este medio y sus aplicaciones podemos dar por ejemplo el cuadro siguiente [3]:

R0883 Medio RPMI-1640 Lquido Con bicarbonato de sodio Sin L-glutamina; complementar con 0,3 g / L de L-glutamina Igual que el R8758, excepto que la L-glutamina hay que aadir por el

investigador.

R8758 Medio RPMI-1640

Lquido Con bicarbonato de sodio y L-glutamina Versin lquida completa de la RPMI-1640 formulacin original publicado por

Moore et. al. en el ao 1967. Desarrollado para el crecimiento de los leucocitos normales y neoplsicas humanas (linfocitos de sangre perifrica). Generalmente, suplementado con suero.

R1145 Medio RPMI-1640 (10x) Lquido Sin L-glutamina, cido flico y bicarbonato de sodio.

Suplemento con 0,3 g / l de L-glutamina, cido flico 0.001gm / L y 2,0 bicarbonato / L de sodio GM en 1x

pH 1.8-2.2 Esta es la versin concentrada (10x) de R8758. La L-glutamina y bicarbonato de

sodio se aaden al medio despus de la dilucin a 1X y el ajuste del pH.

R1383 Medio RPMI-1640 Polvo Con L-glutamina Sin glucosa y bicarbonato de sodio; complementar con 2,0 g / L de bicarbonato

de sodio. Sin glucosa, permite que el investigador para agregar la fuente de energa

propia.

CMRL-1066: con L-glutamina, sin bicarbonato de sodio , es un medio qumicamente

definido desarrollado en la dcada de 1950 por el Connaught Medical Research

Laboratories. Una versin menos compleja y ampliamente modificada del Medio 199,

CMRL-1066 fue diseado inicialmente para el crecimiento de las clulas de "L" de Earle

en condiciones libres de suero. Se ha utilizado para mantener el crecimiento en

monocapa de lneas celulares permanentes durante aos sin la administracin de

suplementos de protena. Aunque desarrollado para el uso en cultivo celular libre de

suero, CMRL-1066 puede ser complementado con suero y se utiliza para apoyar el

crecimiento de muchos tipos de clulas.[4] Los componentes del medio se observan en

el cuadro siguiente:

Originalmente, se utilizaron soluciones salinas equilibradas para mantener la

contractilidad del tejido del corazn de los mamferos y la solucin de sal de Tyrode fue

diseada para uso en el trabajo con clulas de mamferos primarias. Estos ya se han

modificado y enriquecido con aminocidos, vitaminas, cidos grasos y lpidos de manera

que las concentraciones de estos compuestos o la ausencia de los mismos est

determinada por las necesidades que posean el tipo de clula a cultivar. En

consecuencia los medios adecuados para apoyar el crecimiento de una amplia gama de

tipos de clulas estn ahora disponibles. Las formulaciones de medios apropiados a

menudo se han obtenido mediante la optimizacin de las concentraciones de cada

constituyente.

BIBLIOGRAFA

1. SIGMA- ALDRICH., European Collection of Cell Cultures.(s.f). Cell Culture Laboratory Handbook. Recuperado de: http://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigma-aldrich/docs/Sigma-Aldrich/Instructions/1/ecacc_handbook.pdf

2. Biochrom. (s.f). Octomed. Recuperado de http://www.biochrom.de/es/produkte/medien/octomed/

3. SIGMA- ALDRICH. (s.f.). RPMI Media. Recuperado de: http://www.sigmaaldrich.com/life-science/cell-culture/classical-media-salts/rpmi-media.html

4. SIGMA- ALDRICH. (s.f.). CMRL-1066. Recuperado de: https://www.sigmaaldrich.com/content/dam/sigmaaldrich/docs/Sigma/Datasheet/c0422dat.pdf