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Construcción y operación de un sistema para el cultivo experimental de la paralarva del pulpo manchado Octopus bimaculatus Mónica Hernández Rodríguez, Luis Fernando Bückle Ramirez, Beatriz Cordero Esquivel, Benjamín Barón Sevilla, Diana Judith López Peraza, Marisol Simón Díaz, José Espinoza Ibarría, Luis Alberto Murillo Valenzuela, Adrian Celaya Ortega y Francisco Valenzuela Buriel Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada

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Construcción y operación de un sistema para el

cultivo experimental de la paralarva del pulpo

manchado Octopus bimaculatus

Mónica Hernández Rodríguez, Luis Fernando Bückle Ramirez, Beatriz Cordero Esquivel, Benjamín Barón Sevilla, Diana Judith López Peraza, Marisol Simón Díaz, José Espinoza Ibarría, Luis Alberto Murillo Valenzuela, Adrian Celaya

Ortega y Francisco Valenzuela Buriel

Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de

Ensenada

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Índice

Página

Presentación

4

Introducción

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Antecedentes

5

Diseño del sistema de cultivo

7

Obtención y mantenimiento de reproductores del pulpo manchado Octopus bimaculatus

8

Eclosión de paralarvas de O. bimaculatus

10

Cultivo experimental de la paralarva de O. bimaculatus

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Literatura citada

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Índice de Figuras

Figura Página

1. 2. 3. 4. 5. 6.

Sistema para el cultivo experimental de la paralarva del pulpo manchado Octopus bimaculatus. B, biofiltro; C, cono con tubo de nivel; FE, fraccionador de espuma; OZ, generador de Ozono; UE, unidades experimentales; UV, lámpara de radiación ultravioleta; TC, tanque de compensación; BC, bomba de calor. Pulpos capturados con trampas (A) y tanques de 500L donde permanecen los hembras de Octopus bimaculatus con sus puestas (B). Desarrollo embrionario de O. bimaculatus desde el día 1 (A) hasta dos semanas antes de la eclosión (B). Paralarvas del pulpo Octopus bimaculatus recién eclosionada. Cultivo experimental de la paralarva de Octopus bimaculatus alimentada con adultos de Artemia enriquecida. Comportamiento de alimentación de la paralarva.

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Índice de Tablas

Tabla Página

1

Parámetros fisicoquímicos del agua de los tanques donde se colocan a los reproductores. El asterisco indica hembras con puesta.

10

2 Futuras líneas de investigación en octopus que presentan estadio de paralarva encaminadas a resolver su cultivo

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Presentación

El presente manual es resultado del proyecto “Cultivo de la paralarva del pulpo manchado Octopus

bimaculatus” financiado por Fundación PRODUCE Baja California.

El pulpo manchado O. bimaculatus es una especie que se distribuye desde Santa Bárbara,

California, E.U.A. hasta San Felipe, B.C.; contribuye a la pesquería del país la cual se realiza de

noviembre a julio del siguiente año; con base en las observaciones in situ del personal de la

Cooperativa de Buzos de Bahía, el pulpo manchado es la especie que predomina en la pesquería

ribereña en Bahía de los Ángeles.

En el cultivo de las paralarvas se presentan grandes mortalidades; las investigaciones que se

realizan en diferentes partes del mundo han identificado varios factores que la explican tales como la

falta de una dieta viva adecuada en tamaño, cantidad y composición nutritiva y la estandarización de

las técnicas de cultivo, entre otras.

En este documento se explican los requerimientos del tipo de sistema para el cultivo experimental de

la paralarva del pulpo manchado. El diseño y construcción del sistema surge de las investigaciones

que se han venido realizando en los últimos cinco años en el Departamento de Acuicultura del

Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California, México.

Este manual está dirigido a estudiantes, investigadores y sector productivo interesados en el cultivo

de la etapa temprana de los pulpos, específicamente en aquellas especies que tienen etapa larvaria

(paralarva) como O. bimaculatus.

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Introducción

En México, la pesquería del pulpo ocupa el cuarto lugar a nivel nacional por su valor

comercial (CONAPESCA, 2011), su actividad se concentra principalmente en las costas del Golfo de

México y Mar Caribe, con las especies Octopus vulgaris y Octopus maya, esta última, endémica de

la Península de Yucatán (SEMARNAT, 1999, CONAPESCA, 2011). En el océano Pacífico se

capturan Octopus hubbsorum, O. macropus y O. bimaculatus (SEMARNAT, 1999, 2004).

En el estado de Baja California existen alrededor de 20 cooperativas que se dedican a la

captura de pulpo, donde las localidades de El Rosario, San Quintín, San Felipe y Bahía de los

Ángeles son las que aportan la mayor producción (Castellanos-Martínez, 2008). De acuerdo a la

distribución geográfica (Hochberg y Field, 1980) y a las observaciones in situ del personal de la

Cooperativa de Buzos de Bahía, O. bimaculatus es la especie que predomina en la pesquería

ribereña en Bahía de los Ángeles.

En España y Perú, el cultivo de pulpo (Octopus vulgaris y Octopus mimus) a nivel comercial

se ha limitado a la captura de los juveniles del medio natural para su engorde y comercialización. En

México, en el Golfo de México, se ha logrado cultivar a juveniles de Octopus maya y se pretende

instalar una granja para su cultivo comercial (Duhne, 2010). Recientemente, con la intención de

desarrollar el cultivo del pulpo O. bimaculatus en Baja California, se ha iniciado el estudio del cultivo

de las paralarvas.

En el cultivo larvario de los octópodos, cuyas paralarvas son de tamaño pequeño al nacer y

tienen una fase de vida planctónica, se presentan altas mortalidades, debido principalmente, al

escaso conocimiento de la biología de sus estadios tempranos de desarrollo, al desconocimiento de

sus necesidades nutritivas, a la falta de una dieta viva adecuada en tamaño, cantidad y composición

nutritiva y finalmente, a la falta de estandarización de las técnicas de cultivo (Moxica et al., 2002,

Iglesias et al., 2004, Iglesias y Sánchez, 2007).

Los pulpos son organismos semelparos (presentan un solo evento reproductivo durante toda

su vida), que presenta un ciclo de vida corto, que varía de 6 a 38 meses (Boyle y Rodhouse, 2005).

En el Golfo de California, O. bimaculatus se reproduce durante todo el año, registrando picos de

apareamiento entre los meses de mayo y junio, y con desoves entre abril y agosto (Ambrose, 1988;

Buzos de Bahía, com. pers).

Antecedentes

La especie más estudiada por su amplia distribución geográfica es O. vulgaris, diversos

autores han realizado cultivos experimentales con la paralarva de esta especie, donde han

suministrado como alimento nauplios de Artemia enriquecidos, dentro de los cuales destacan los

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realizados por Imamura (1990), quien registró supervivencias del 67.1 % al día 22 y Hamazaki et al.

(1991), reportaron una supervivencia del 28.9 % al día 25. Las investigaciones en torno al tema han

utilizado una diversidad de alimento vivo, como zoeas de centolla de Maja squinado, mysis de

camarón, copépodo Acartia tonsa, centollas de M. squinado y hojuelas congeladas de Agapornis

personautus, así como la combinación de diferentes estadios de Artemia con alimento balanceado

(Villanueva, 1995; Moxica et al., 2002; Roo et al., 2003; Vidal et al., 2002, Carrasco et al., 2003 y

Okumura et al., 2005). Los resultados en relación a la mayor supervivencia en el periodo más largo

de cultivo, fue de 3.4 % al día 60 (Carrasco et al., 2003).

Tomando en cuenta las características de los cultivos de paralarvas de O. vulgaris, es

destacable los diversos aspectos que han sido considerados para mejorar su desarrollo y

supervivencia, tales como color, forma y volumen del tanque, si el sistema es cerrado, semi-abierto,

abierto o estático, si no hay aireación o es intermedia y suave, con luz natural, fotoperiodo artificial o

luz fluorescente, la temperatura del agua y si ésta es clara o verde (por presencia de microalgas),

densidad de paralarvas, tipo y densidad de presa, tamaño de la presa, con o sin limpieza diaria o

después de 30 días y con Artemia enriquecida, entre otros (Okumura et al., 2005; Iglesias et al.,

2007). Sin embargo, los resultados han sido poco alentadores.

Se han realizado diversos estudios acerca de la biología de estos organismos, con el fin de

conocer las condiciones adecuadas que permitan un buen desarrollo y mayor supervivencia para

poder cultivarlos en cautiverio. Se ha avanzado principalmente en aspectos de la fisiología y

nutrición, tanto en estadios juveniles como en adultos, sin embargo, aún se requiere conocer más

sobre la biología básica de estos organismos, por lo que a la fecha, el cultivo comercial se ha

limitado a la captura de juveniles del medio natural para su engorda y comercialización, como es el

caso de países como España y Perú.

Con base en los resultados sobre el cultivo de las paralarvas de los pulpos, se asume que

existen varios aspectos fundamentales a considerar, uno de ellos es el desarrollo de la tecnología

del cultivo y mejorar la calidad del alimento que satisfaga los requerimientos nutricionales de las

paralarvas y que promueva un desempeño óptimo, el cual se vea reflejado en una mayor

supervivencia y crecimiento.

En México la pesquería del recurso pulpo en los últimos años ha disminuido, los esfuerzos

por desarrollar la tecnología de cultivo en sus diferentes etapas del ciclo de vida para aquellas

especies que tienen paralarva como O. bimaculatus, no se han abordado en nuestro país. Existen

avances con el pulpo O. maya, sin embargo, esta especie no tiene etapa de paralarva, ya que

eclosiona un juvenil bentónico. Como se mencionó anteriormente hay varios aspectos que se deben

considerar para desarrollar la tecnología del cultivo de las paralarvas, tomando como base estos

elementos fue que se diseñó y validó un sistema de cultivo experimental de la paralarva del pulpo O.

bimaculatus alimentada con adultos de Artemia.

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Diseño del sistema de cultivo

Los diversos trabajos realizados en el tema del cultivo de la paralarva, enfatizan en la

importancia de estandarizar las técnicas de cultivo, lo que motivo el diseñar y construir un sistema

para el cultivo experimental de este estadio del ciclo de vida de los pulpos, el cual considera un flujo

de agua ascendente para eliminar el aire ya que ocasiona turbulencia dentro de los tanques, una

tasa de recambio mayor al 500 % diario y el tratamiento del agua para mantener su calidad. El

sistema consta de 12 tanques de 60 L de capacidad, un tanque de compensación de 100 L, un filtro

mecánico-biológico, un fraccionador de espuma, un generador de ozono, radiación ultravioleta,

bombas sumergibles y una bomba de calor.

En una mesa de madera de 3.05m (largo) x 0.96m (ancho) x 0.75m (altura) se realizan 12

perforaciones cuyo diámetro es de 20.2 cm para sostener la parte cónica del tanque (Fig. 1, C). El

agua que llega a los tanques proviene del reservorio de compensación de 100L, de donde es

succionada por una bomba sumergible de 115 volts y 700 GPH a un filtro mecánico-biológico de

cuentas plásticas (Fig. 1, B); la salida del filtro es por tubería de ¾”, el flujo de agua se distribuye en

dos direcciones, una va a un filtro de radiación ultravioleta SMART HO UV modelo 025050 de 115

volts (Fig. 1, UV) y otra a un fraccionador de espuma (Fig. 1, FE) para eliminar los compuestos

orgánicos del agua antes de su descomposición en desechos nitrogenados de tal manera que

aligera la carga en el filtro biológico y mejorar el potencial redox del agua. El flujo de agua que sale

del filtro UV a través de una tubería de ¾”, la cual está conectada a un venturi, por donde se inyecta

el ozono producido con un generador de ozono de 110 volts, modelo ECLIPSE2 (Fig. 1, OZ), pasa a

un tubo de 4" que la distribuye a un cabezal de tubería de ¾” que está localizada en la base de la

mesa. Esta tubería que va por el centro se bifurca con una T de ¾” para regresar a los extremos de

la mesa de donde el flujo de agua se reparte y regula a cada tanque por las válvulas de ¾”. El flujo

de agua entra al tanque por la base del cono de forma ascendente y mantiene a la paralarva en la

columna de agua. El tanque tiene un tubo de nivel de ¾” por donde se elimina el excedente de agua

que se capta en un tubo de ABS de 3" para retornar al tanque de compensación (Fig. 1, TC) de

donde es tomada por la bomba sumergible para entrar nuevamente al filtro mecánico-bilógico. Al

tubo de nivel se le adapta un cono de malla de 125 µ para evitar que las paralarvas sean arrastradas

y queden atrapadas en el sistema de filtración. En la base del tanque hay un coplee de 2” el cual se

une a una T de la misma medida, en un extremo se coloca una reducción de 2 a ¾” donde se coloca

la válvula de ¾” que abastece de agua al tanque y en el extremo opuesto se coloca una reducción

de 2 a ½” para instalar una llave de PVC de la misma medida a la cual se le coloca una manguera

transparente de ¾”que se conecta a una tubería de PVC de 2” por donde se realiza el vaciado del

agua del tanque al desagüe. La ventaja de este sistema es que al colocar las válvulas a cada tanque

permite trabajar con cada unidad independiente.

Para mantener la temperatura constante del sistema, la cual depende de la condición

térmica a la que son incubados los huevos, se utiliza una bomba de calor Delta Star de 1/2 HP y 115

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volts (Fig. 1, BC). El agua es succionada desde el tanque de compensación (TC) por una bomba

sumergible modelo 183 de 115 volts y 350 GPH que pasa a través de una tubería de 1" para entrar a

la bomba de calor de donde sale al TC para ser distribuida a los tanques.

Figura 1. Sistema para el cultivo experimental de la paralarva del pulpo manchado Octopus bimaculatus. B, filtro mecánico-biológico; C, cono con tubo de nivel; FE, fraccionador de espuma; OZ, generador de Ozono; UE, unidades experimentales; V, válvula; UV, lámpara de radiación ultravioleta; TC, tanque de compensación; BC, bomba de calor.

Obtención y mantenimiento de reproductores del pulpo manchado

Octopus bimaculatus

Las hembras de pulpo O. bimaculatus se recolectan en Bahía de los Ángeles, B.C.

localizada entre 28° 90’ y 29° 10’ N y entre los 113 ° 30’ y 113° 60’ W (INEGI, 2013). El arte de

pesca que se utiliza son trampas de 20x30x50 cm (Fig. 2A). Los organismos se trasportan en un

contenedor de plástico con capacidad de 1 m3; la concentración de oxígeno disuelto se mantiene

sobresaturada (> 8 mg·L-1) mediante la inyección de oxígeno puro. Para evitar la agresión entre los

organismos durante el transporte, los pulpos se colocan en refugios individuales hechos con tubos

de ABS cubiertos por malla sardinera y amarrada con cabo en un extremo. Una vez en el laboratorio

C

V

TC

UE

OZ

UV FE

B

BC

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los pulpos se colocan individualmente en tanques de 500L de capacidad conectados a un sistema de

biofiltración (Fig. 2 B).

Al iniciar la hembra con la puesta de huevos, se lleva un control de los parámetros

fisicoquímicos del agua tales como temperatura, salinidad y concentración de oxígeno (Tabla 1). La

concentración de nitrógeno amoniacal total (NAT), nitritos (NO2¯) y nitratos (NO3

¯) en el sistema se

mantiene en promedio en 0.05 ± 0.02 mg/L, 0.18 ± 0.06mg/L y 6.12 ± 1.62 mg/L respectivamente.

Además se realizan observaciones del desarrollo de los huevos para estimar el tiempo de eclosión

(Fig. 3).

Figura 2. Pulpos capturados con trampas (A) y tanques de 500L donde permanecen los hembras de

Octopus bimaculatus con sus puestas (B).

Figura 3. Desarrollo embrionario de O. bimaculatus desde el día 1 (A) hasta dos semanas antes de

la eclosión (B).

A

A

A

B

A

A

A

A

A

B

A

A

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Tabla 1. Parámetros fisicoquímicos del agua de los tanques donde se colocan a los reproductores de

Octopus bimaculatus. El asterisco indica hembras con puesta.

No. Tanque Temperatura °C

Salinidad ups

Concentración de oxígeno

mg·L-1

1 21.9 ± 1.99 35.0 ± 0.54 6.61 ± 0.37 2 20.5 ± 0.51 35.5 ± 0.16 6.72 ± 0.13 3* 20.8 ± 0.79 35.0 ± 0.41 6.60 ± 0.19 4* 20.5 ± 0.82 35.3 ± 0.43 6.68 ± 0.18 5 21.6 ± 1.85 35.1 ± 0.47 6.46 ± 0.34 6* 20.5 ± 0.54 35.5 ± 0.16 6.69 ± 0.17 7 21.9 ± 1.71 35.2 ± 0.48 6.53 ± 0.31 8* 18.7 ± 0.82 35.9 ± 0.82 7.03 ± 0.16 9* 21.7 ± 1.65 35.2 ± 0.46 6.54 ± 0.28 10 21.7 ± 1.68 35.2 ± 0.47 6.36 ± 0.48 11* 20.8 ± 0.77 35.0 ± 0.45 6.68 ± 0.18 12* 21.8 ±1.67 35.2 ± 0.45 6.45 ± 0.24 13* 20.8 ± 0.79 35.0 ± 0.19 6.60 ± 0.19 14* 20.5 ± 0.83 35.3 ± 0.43 6.68 ± 0.43

Eclosión de paralarvas de O. bimaculatus

El tiempo de incubación de la puesta hasta que eclosiona la paralarva depende de la

temperatura del agua, el cual puede ser de 28 días a 23 °C hasta 90 días a 16.1 °C (Fig. 4). Estos

organismos al eclosionar pesan en promedio 2.7 mg, miden 4 mm y en cada brazo tienen cuatro

ventosas.

Figura 4. Paralarvas del pulpo Octopus bimaculatus recién eclosionada.

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Cultivo experimental de la paralarva de O. bimaculatus

El cultivo experimental de la paralarva se puede realizar con 10 o 15 organismos por litro,

con un volumen útil del tanque de 15 litros, esto se debe a los requerimientos del alimento vivo, es

decir, si se tienen 150 paralarvas por tanque, entonces se deben agregar 30000 artemias, si se

considera una proporción de 200 artemias por paralarva (Fig. 5). El sistema permite que el recambio

de agua en cada tanque sea de 3.6 L/min y la concentración de oxígeno a una temperatura de 17.7

°C es de 7.05 ± 0.14 mg/L; sin embargo, este valor cambia dependiendo de la temperatura a la cual

se incuben los huevos.

Figura 5. Cultivo experimental de la paralarva de Octopus bimaculatus alimentada con adultos de

Artemia enriquecida.

Las investigaciones en torno al cultivo de las paralarvas de las especies que presentan este

estadio y donde se proporciona una variedad de alimento vivo, denotan que la supervivencia puede

ser desde un 3.4% al día 60 hasta un 67.1% en 22 días. Sin embargo, cuando se repiten estas

experiencias aún con la misma especie, no se obtienen los mismos resultados, lo cual indica que la

condición de la hembra es fundamental para obtener una puesta de calidad. Por ello las futuras

investigaciones consideran que hay varios temas a tratar tanto en los aspectos de reproducción

como en el cultivo de las paralarvas (Tabla 2).

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Tabla 2. Futuras líneas de investigación en especies de pulpo que presentan estadio de paralarva

encaminadas a resolver su cultivo.

Reproducción Control de la maduración Selección genética Calidad de la paralarva Patología

Cultivo de Paralarva Requerimientos de alimentación Sistema de tanques (turbulencia) Calidad del agua Ambiente de cultivo del alimento Comportamiento de la paralarva Desarrollo de la paralarva Patología

El sistema para desarrollar el cultivo de la paralarva considera tres aspectos: a) se elimina la

turbulencia prescindiendo de la aireación en el tanque, b) la inclusión de radiación ultravioleta y un

generador de ozono para mejorar la calidad del agua y por último c) el comportamiento de los

organismos; este último caracterizado por la actividad de la paralarva para buscar el alimento (Fig.

6).

Figura 6. Comportamiento de alimentación de la paralarva.

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Literatura citada

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