Para la obtención del ADN podemos coger cualquier célula de un cuerpo, se rompe la célula y se extrae el material genético.

Hay varios métodos de conseguir el ADN:

Las mas usuales son por vía sangre y saliva

¿Cómo se obtiene el ADN? Busca información sobre los métodos más comunes para la extracción de ADN. Realiza un cuadro con las ventajas e inconvenientes para cada uno de los métodos

Se saca la sangre para extraer el ADN

Métodos mas usuales de obtención del ADN: Se toma muestra

de saliva

¿Qué son las enzimas de restricción? Busca información sobre ellas y comenta con tu profesor sus funciones.

Es aquella que puede reconocer una secuencia

característica de nucleótidos dentro de una molécula de

ADN y cortar el ADN en ese punto en concreto, llamado diana de restricción, o en

un sitio no muy lejano a éste, dependiendo de la

enzima. Los sitios de restricción cuentan con

entre 4 y 12 pares de bases, con las que son reconocidos.

FUNCIONES DE LAS ENZIMAS DE RESTRICCIÓN

Una de las funciones que tienen las enzimas de restricción es la de proteger el organismo de ADN extraño.

Otras aplicaciones es la producción de microorganismos transgénicos para procesos de bioremediación de hidrocarburos

VNTRs son “numero variable de repeticiones en tándem”

Una repetición en tándem es una secuencia corta de ADN que se repite consecutivamente, cabeza con cola, en un locus cromosómico específico. Se encuentran repartidas por todo el genoma humano.

¿Qué es el VNTRs?

RFLPs son "polimorfismo en la longitud de los fragmentos de restricción“

Se refiere a secuencias específicas de nucleótidos en el ADN que son reconocidas y cortadas por las enzima de restricción (también llamadas endonucleasas de restricción) y que varían entre individuos.

¿Qué es el RFLPs?

Electroforesis es una técnica para la separación de moléculas (proteínas o ácidos nucleícos) según la movilidad de estas en un campo eléctrico a través de una matriz porosa, la cual finalmente las separa por tamaños moleculares y carga eléctrica, dependiendo de la técnica que se use.

¿Para qué se utiliza una electroforesis?

Los ácidos nucleícos ya disponen de una carga eléctrica negativa, que los dirigirá al polo positivo, mientras que las proteínas se cargan con sustancias como el SDS (detergente) que incorpora cargas negativas de una manera dependiente del peso molecular. Para la separación se usa un gel de agarosa o poliacrilamida (fibras cruzadas, como una malla). Al poner la mezcla de moléculas y aplicar un campo eléctrico, éstas se moverán y deberán ir pasando por la malla, por la que las pequeñas se moverán mejor, más rápidamente. Así, las más pequeñas avanzarán más y las más grandes quedarán cerca del lugar de partida

Electroforesis

Electroforesis Capilar (CE)Aplicación en las ciencias biológicas.La electroforesis se emplea como una técnica de separación de moléculas que se basa en la migración diferencial de las partículas biológicas cargadas, dispuestas en un soporte inerte, bajo la acción de un campo eléctrico aplicado.

Usos de la electroforesis

Es un método de biología molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN en una mezcla compleja de este acido nucleíco. Para ello se emplea la tecnica de electroforesis en gel de agarosa. Consiste en separar en base a la longitud de los fragmentos de ADN y una transferencia a una membrana en la cual se efectúa la hibridación de la sonda.

Busca en qué consiste un Southern blot.

Es un fragmento de ADN (o raramente ARN) de pequeño tamaño (normalmente entre 100 y 1000 bases) usado en biología molecular como herramienta para detectar la presencia de ADN o ARN de secuencia complementaria parecida o igual.

¿Qué es una sonda?

Para visualizar las moléculas diana se utiliza una sonda marcada, bien radiactivamente, bien mediante marcaje inmunológico. Para el uso de ADN de doble cadena primeramente es necesario desnaturalizarlo mediante calor o en condiciones de alta alcalinidad. Esta sonda de cadena simple marcada se une a la diana; y los lugares de unión se detectan porque los métodos de marcaje dejan una señal detectable mediante fotografía. En los métodos más avanzados se utilizan marcajes mediante fluorescencia que emiten señales detectadas mediante láser, como el utilizado en la PCR a tiempo real.

¿Qué métodos se utilizan para marcar las sondas?

es el proceso más común para detectar un gen particular o un segmento de un ácido nucléico. Existen muchas variaciones del método básico, el que mas se utiliza es el uso de fragmentos de ADN o ARN marcados radioactivamente conocidos como sondas. De hecho esta metodología es la base de la amplificación controlada de ADN conocida como PCR.

¿En qué consiste la hibridación?

Del inglés (Polymerase Chain Reaction) Reacción en Cadena de la Polimerasa, es una técnica de biología molecular desarrollada en 1986 por Kary Mullis, cuyo objetivo es obtener un gran número de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mínimo; en teoría basta partir de una única copia de ese fragmento original, o molde.

Busca información sobre la PCR, realiza un esquema de los pasos a seguir para su aplicación y un cuadro con las ventajas e inconvenientes que proporciona.

Pasos a seguir para aplicación del PCR

Ventajas Inconvenientes

Sus aplicaciones son múltiples: medicina forense, diagnósticos, análisis prenatales, etc.

Se puede reproducir solamente partes del genoma en donde se conoce por lo menos una mínima secuencia de 20 – 40 pb.

Se puede amplificar ADN de cualquier organismo vivo o muerto. Llegar a conseguir muchas copias de ese fragmento de ADN partiendo de un mínimo.

La polimerización puede tener errores al sintetizar el ADN. Se necesitan “primers” específicos que sean complementarios al fragmento que se desea sintetizar.

El producto se puede utilizar para clonar, secuenciar y análisis.

Puede contaminarse con otro ADN (puede ser del mismo investigador o de cualquier otro)

1º Se extrae las células del cuerpo al que se le quiere hacer la prueba de ADN, ya sea por saliva, sangre, semen, etc.

2º Se rompe la célula para que previamente obtener el código genético.

3º Se le implanta las enzimas de restricción, que ayudara a sacar mas muestras de la misma.

4º

Finalmente, realiza un resumen de todos los pasos que deberías seguir para realizar una prueba de ADN