Bioquimica

CONTROL DE CALIDAD INTERNO En el Laboratorio Clnico

DAYAN CRCAMO

JACQUELINE FERNANDES

CAMILA VARGAS

Inmunologa Clnica

Docente: Gloria Arismendi

10 / 06 / 2015

1

INDICE

Introduccin __________________________________________________________________________ Pgina 2

Marco Terico

Control de Calidad Interno_______________________________________________________ Pginas 36

Marco Prctico

Metodologa de Trabajo __________________________________________________________ Pgina 7

Protocolo de Trabajo _____________________________________________________________ Pgina 7-8

Determinacin de Suero control

cido rico _________________________________________________________________________ Pginas 9-11

Albumina ___________________________________________________________________________ Pginas 12-14

Colesterol __________________________________________________________________________ Pgina 15-17

Protena total ______________________________________________________________________ Pginas 18-20

Triglicridos _______________________________________________________________________ Pginas 21-23

Conclusin _____________________________________________________________________________ Pgina 24

Bibliografa ____________________________________________________________________________ Pgina 25

2

INTRODUCCIN

El objetivo del laboratorio clnico es proporcionar informacin til para el cribado,

diagnstico, tratamiento y seguimiento de las enfermedades. Con este objetivo en el

laboratorio se realizan una serie de mediciones, aplicando procedimientos de medida

diferentes, que mediante estrategias bien definidas, deberan permitir obtener

informacin fiable y segura.

Por lo tanto en la prctica diaria del laboratorio clnico es esencial y es prioridad

otorgar prestaciones que cumplan con los requisitos de calidad, y realizar cambios,

para establecer una mejora continua de sus procesos.

La implementacin de un sistema de gestin de calidad, es importante, porque

permite el desarrollo de estrategias que pueden conducir a, la identificacin de

problemas analticos, con lo cual pueden dirigirse esfuerzos para la resolucin,

limitacin, eliminacin, o prevencin, de errores en beneficio del laboratorio, y de la

comunidad que solicita el servicio.

Segn lo anterior los laboratorios nacionales, se han adjuntado a un sistema de

gestin de calidad, implementado por el Instituto de Salud Pblica de Chile, con la

finalidad de mejorar la calidad del servicio, otorgado por estos centros hacia a sus

usuarios, entregndoles a estos, la confianza de que los resultados entregados de sus

respectivos anlisis biolgicos, sean certeros y fidedignos.

Para ello, se han desarrollado herramientas tecnolgicas, como informticas, que

permiten, planear y controlar la calidad analtica de los exmenes, asegurando la

liberacin de resultados tiles, para el diagnstico clnico. Para cumplir tales

objetivos, se establece tanto un Control de Calidad Externo y un Control de Calidad Interno en el laboratorio que tienen como objetivo, el seguimiento de los procesos pre analtico, analtico, y post analticos, para el aseguramiento de la calidad del

laboratorio.

En el siguiente trabajo se abordara especficamente el control interno del laboratorio

de la seccin de bioqumica clnica, aplicado en un marco prctico, el cual se bas en el

uso de un material de control (hecho en el laboratorio) para la revisin de diferentes

analitos, utilizados en el laboratorio de docencia de la Universidad Santo Toms, y

mediante los resultados de estos controles estableces mtodos para su evaluacin.

3

MARCO TERICO

Control de calidad Interno

El propsito de control de calidad interno es evaluar el desempeo del sistema de

medicin para liberar los resultados de las muestras de pacientes procesadas bajo las

mimas condiciones de trabajo, permiten detectar desvos y variabilidad del sistema

analtico para tomar acciones preventivas y apoyar en la mejora del desempeo.

EL proceso ms importante que es evaluado dentro del control interno de calidad del

laboratorio es la etapa analtica y una forma de poder evaluar el desempeo analtico

de los procesos de medicin de analitos es el uso de materiales de control.

Se define como material de control como un lquido o sustancia liofilizada de origen

humano, animal o qumico que se usan para monitorear la calidad y consistencia del

proceso analtico. El profesional debe seleccionar el material de control basado en las

siguientes premisas:

Que se parezcan lo ms posible a muestras de pacientes en cuanto a su

reactividad con el sistema de medicin utilizado.

Se pueden elegir de primera opinin o de tercera opinin siendo los ltimos

ms recomendables como alternativa.

Los controles pueden ser preparados por el propio laboratorio (pool de sueros

normales), este debe realizarse con las precauciones de estabilidad y

seguridad para el personal de laboratorio.

Se debe seleccionar considerando su estabilidad disponibilidad en cantidad

para mantener un stock por al menos de 6 meses.

El nivel de concentracin del control en lo posible debe estar comprendido en

el intervalo de referencia comprendido en el intervalo de referencia biolgica

normal, bajo o sobre este.

4

Cuadro 1: Flujograma para el aseguramiento de la calidad analtica en el laboratorio clnico.

Para evaluar los resultados obtenidos desde los controles y analizarlos se cre un

mtodo llamado carta control de Levey Jenning.

Este es un mtodo grafico que muestra los resultados de los controles y como estos se

comportan en un periodo de tiempo determinado.

Los resultados se grafican secuencialmente en el tiempo (eje X), y el resultado de la

medicin (eje Y).

Para realizar la carta control de Levey Jennigs debemos:

Obtener con cada uno de los controles como mnimo 20 resultados en a

lo menos 20 das distintos. Si se dispone de menos tiempo se pueden

hacer dos determinaciones diarias por 10 das consecutivos y

establecer una media y desviacin standard provisoria, hasta tener un

mes de resultados.

Eliminar los valores extremos por la prueba de Dixon o Grubbs u otro

que cumpla con el mismo objetivo.

5

Los resultados obtenidos durante la valoracin de material control

permite calcular la media aritmtica y desviacin estndar para poder

construir la carta control.

o Media

o Desviacin estndar

o Coeficiente de

variacin

Se sugiere calcular el coeficiente de variacin del mtodo al menos

mensualmente para conocer su imprecisin y posterior anlisis de su

desempeo.

Es la suma de los alores de todas las

observaciones dividida por el nmero de

observaciones

Se define como la raz cuadrada de la

varianza. Permite obtener una medida de la

variabilidad de los datos expresados en la

misma unidad de medida de la variable.

Expresa la desviacin estndar como

porcentaje de la media.

6

En la carta control de Levey Jenning se deben aplicar las reglas de

Westgard que son una serie de pautas de control usadas en el

procedimiento de control de calidad para analizar la medicin del control

(ver cuadro 2).-

Cuadro 2: Reglas de Westgard y el tipo de error al que se asocian

7

MARCO PRCTICO

Se realiz en el laboratorio de docencia de la universidad Santo Tomas, el control de

calidad en bioqumica clnica a travs de material de control, con el objetivo de poder

aplicar los contenidos mencionados en este trabajo.

Metodologa de trabajo

Se realiz un control de calidad interno en una corrida analtica de varios analitos

utilizando un material de control realizado por el grupo de trabajo, se analiz los

datos obtenidos a travs de la carta de control de Levy Jenning, y esta a su vez se le aplicaron las reglas de Westgard para poder ver el comportamiento de nuestro

control en un periodo de tiempo.

Protocolo de trabajo

1. Obtencin de 10 muestras sanguneas de pacientes

sanos y que se encontraban en ayuno completo. La

obtencin de la muestra se realiza

en tubos sin anticoagulante (tapa

roja).

2. Posteriormente se procedi a centrifugar las

muestras sanguneas con el objetivo de separar los

elementos sanguneos y as obtener suero. La

centrifugacin se realiza a 3500 rpm por 5 minutos.

3. Luego de centrifugar y obtener los sueros de cada

muestra, se procedi a extraer el suero residual para colocarlo en un tubo

khan. Los sueros ya separados se centrifugaron nuevamente para evitar

el hallazgo de trazas de sangre total.

8

4. Ya obtenido los sueros, en un matraz estril se procedi a

colocar todos los sueros para as lograr mezclarlos de manera

homognea. Despus se dispuso a colocar de manera

equitativo el suero en diferentes tubos, para que puedan ser

utilizados como material de control.

5. Se utiliz este material de control para los siguientes analitos: Protenas totales, Albumina, cido rico, Colesterol y Triglicridos.

6. El anlisis bioqumico fue semi automatizado con la

medicin a travs de mtodos espectrofotomtricos.

A continuacin se presentarn los resultados de cada uno delos analitos mencionados

anteriormente, con sus respectivos factores de calibracin, absorbancia de cada

lectura y la concentracin que se obtuvo en cada una de ellas. Adems se adjunta el

Grfico de Levey Jennings para cada uno de los ndices medidos.

9

DETERMINACIN DE CIDO RICO PARA POOL DE SUERO CONTROL

Es el principal producto del catabolismo de las bases pricas, excretado por la orina.se

forma a partir de la xantina por accin de la xantino oxidasa se sintetiza

principalmente en el hgado y el intestino delgado. El adulto tiene un contenido de 1,2

gramos en el organismo.

Mtodo Uricasa Enzimtico

Fundamento del Mtodo:

El cido rico es oxidado por la accin de la uricasa, en alantoina y perxido de

hidrgeno. En presencia de peroxidasa (POD) la mezcla de diclorofenol sulfonato

(DCFS) y 4 aminoantipirina (4-AA) se condensan por accin del perxido de

hidrgeno, formando una quinonaimina coloreada proporcional a la concentracin de

cido rico en la muestra.

=Concentracin estandar

Absorbancia estandar

. =8 mg/dl

0,146

F.C = 54, 79 mg/dl

- Concentracin del estndar: 8 mg/dl

- Absorbancia del estndar: 0,146

- Longitud de onda: 546 nm

- Tipo de reaccin: Ascendente enzimtico

- Tiempo de incubacin: 5 minutos a 37C

- Rango de referencia: H: 3,5 7,2 mg/dl // M: 2,6 6 mg/dl

10

CIDO RICO

Lecturas Absorbancia Concentracin (FC x Abs)

L1 0,093 5,09 mg/dl L2 0,090 4,93 mg/dl L3 0,103 5,64 mg/dl L4 0,092 5,04 mg/dl L5 0,081 4,43 mg/dl L6 0,085 4,65 mg/dl L7 0,080 4,38 mg/dl L8 0,082 4,49 mg/dl L9 0,074 4,05 mg/dl

L10 0,073 3,99 mg/dl L11 0,082 4,49 mg/dl L12 0,087 4,76 mg/dl L13 0,088 4,82 mg/dl L14 0,089 4,89 mg/dl L15 0,093 5,09 mg/dl L16 0,074 4,05 mg/dl L17 0,076 4,16 mg/dl L18 0,071 3,89 mg/dl L19 0,079 4,32 mg/dl L20 0,086 4,71 mg/dl

Promedio

Desviacin estndar:

Coeficiente de variacin:

0,45252828

9,8514 %

4,593

5

11

Grfico de Levey Jennings

SIMBOLOGIA

Promedio

1era desviacin estndar

2da desviacin estndar

Concentracin del pool de muestras

CO

NC

ENTR

AC

ION

g/L

LECTURA

12



. =2,7 g/dl

2,57

F.C = 1,05 g/dl

DETERMINACIN DE ALBUMINA PARA POOL DE SUERO CONTROL

La albmina srica constituye ms de la mitad de las protenas sanguneas y en una

forma muy general representa aproximadamente el 50% de la actividad sinttica del

hgado. La albmina humana es una pequea protena relativamente simtrica y que

siendo la principal protena del plasma, es una molcula altamente soluble, que a

pesar de su elevada carga negativa puede ligarse reversiblemente tanto con cationes

como con aniones, lo que hace posible que su situacin plasmtica sea ptima para

poder transportar o inactivar una serie de sustancias como metales pesados, drogas,

tinturas, cidos grasos, hormonas y enzimas. Su principal indicacin se relaciona con

su accin onctica como un excelente expansor del volumen plasmtico. Los efectos

fisiolgicos de la propiedad de ligarse que tiene la albmina a otras sustancias, pueden

ser determinantes para la utilizacin futura de esta protena.

Mtodo Biuret Colorimtrico

Fundamento del mtodo

La albmina reacciona especficamente sin separacin previa con la forma aninica de

la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon ftalena (BCF), en presencia de un exceso de

colorante, en medio tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbanciaa 625 nm

respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en

la muestra.

- Concentracin del estndar: 2,7 g/dl

- Absorbancia del estndar:2,57



- Tiempo de incubacin: 10 minutos a T ambiente

- Rango de referencia: 3,5 4,8 g/dl

13

Promedio

Desviacin estndar:


Albumina Lectura Absorbancia (ABS) Concentracin (FC x ABS)

L1 3,31 3,47 L2 3,35 3,81 L3 3,32 3,48 L4 3,30 3,46 L5 3,33 3,49 L6 3,41 3,58 L7 3,44 3,61 L8 3,39 3,55 L9 3,36 3,52

L10 3,43 3,6 L11 3,38 3,9 L12 3,85 3,7 L13 3,44 4,62 L14 3,37 3,5 L15 3,42 3,59 L16 3,43 3,6 L17 3,36 3,52 L18 3,45 3,62 L19 3,50 3,67 L20 3,52 3,69

0,27955745

4,2264 %

6,6145

14


SIMBOLOGIA

Promedio




CO

NC

ENTR

AC

ION

g/L

LECTURA

15






- Rango de referencia:

16

Colesterol

Lectura Absorbancia (ABS) Concentracin (FC x ABS)

1 0,276 168 mg/dl

2 0,272 166 mg/dl

3 0,335 204 mg/dl

4 0,273 167 mg/dl

5 0,257 157 mg/dl

6 0,249 152 mg/dl

7 0,287 175 mg/dl

8 0,231 141 mg/dl

9 0,252 154 mg/dl

10 0,329 201 mg/dl

11 0,254 155 mg/dl

12 0,237 145 mg/dl

13 0,251 153 mg/dl

14 0,241 147 mg/dl

15 0,247 151 mg/dl

16 0,254 155 mg/dl

17 0,277 169 mg/dl

18 0,281 171 mg/dl

19 0,287 175 mg/dl

20 0,266 162 mg/dl

Promedio

Desviacin estndar:


16,59

163,4

10,15 %

17

CO

NC

ENTR

AC

ION

g/L

LECTURA

Grfica de Levey Jennings

SIMBOLOGIA

Promedio




18

DETERMINACIN DE PROTENAS TOTALES PARA POOL DE SUERO CONTROL

Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos

en el organismo y esenciales para la vida. Actan como elementos estructurales y de

transporte aparecen bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de

coagulacin, etc.

Mtodo Biuret Colorimtrico

Fundamento del Mtodo:

Los enlaces peptdicos de las protenas reacciones con el in cprico, en medio

alcalino, para dar un complejo color violeta, con mximo de absorcin a 540 nm, cuya

intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra.



. =4,7 g/dl

1,105

F.C = 4,25 g/dl

- Concentracin del estndar: 4,7 g/dl





- Rango de referencia: 6,1 7,9 g/dl

19

PROTENAS TOTALES

Lecturas Absorbancia Concentracin (FC x Abs)

L1 1,64 6,97 g/dl L2 1,57 6,6 g/dl L3 1,59 6,75 g/dl L4 1,57 6,7 g/dl L5 1,58 6,72 g/dl L6 1,63 6,92 g/dl

L7 1,62 6,88 g/dl L8 1,64 6,97 g/dl L9 1,54 6,54 g/dl

L10 1,48 6,2 g/dl L11 1,62 6,8 g/dl L12 1,55 6,5 g/dl L13 1,55 6,58 g/dl L14 1,65 7,0 g/dl L15 1,42 6,0 g/dl L16 1,45 6,16 g/dl L17 1,53 6,5 g/dl L18 1,51 6,4 g/dl L19 1,57 6,6 g/dl L20 1,53 6,5 g/dl

Promedio

Desviacin estndar:


0,27955745

4,2264 %

6,6145

20


SIMBOLOGIA

Promedio




CO

NC

ENTR

AC

ION

g/L

LECTURA

21






- Rango de referencia:

22

Promedio

Desviacin estndar:


Triglicridos

Lectura Absorbancia (ABS) Concentracin

(FC x ABS) 1 0,114 86 mg/dl 2 0,143 108 mg/dl

3 0,133 100 mg/dl

4 0,109 83 mg/dl

5 0,101 76 mg/dl 6 0,131 99 mg/dl

7 0,127 96 mg/dl

8 0,111 84 mg/dl

9 0,097 73 mg/dl

10 0,129 98 mg/dl

11 0,186 140 mg/dl

12 0,127 96 mg/dl

13 0,120 91 mg/dl

14 0,141 107 mg/dl

15 0,156 118 mg/dl

16 0,113 86 mg/dl

17 0,205 155 mg/dl

18 0,095 72 mg/dl

19 0,112 85 mg/dl

20 0,122 92 mg/dl

20,959

118,1

21,54 %

23

CO

NC

ENTR

AC

ION

g/L

LECTURA

Grafica de Levey Jennings

SIMBOLOGIA

Promedio




24

CONCLUSIN

En la actualidad en los laboratorios clnicos es indispensable contar con un sistema de

calidad que gestione todos los procesos pre analticos, analticos y post analticos de

las secciones propias de un laboratorios, con el objetivo de entregar a sus usuarios un

servicio confiable.

En base a lo anterior se establecen tanto controles internos como controles externos

siendo el primero el de mayor importancia en la prctica diaria. Y se define como

El conjunto de operaciones emprendidas por el personal de un laboratorio para la

evaluacin contina de la fiabilidad de su trabajo.

En este control interno podemos evaluar nuestros procesos analticos a travs de

materiales controles los cuales pueden ser comerciales o elaborados por el mismo

laboratorio, los cuales tienen como finalidad el verificar si los proceso realizados son

los correctos.

A travs del marco prctico se pudo comprobar la importancia de comprender cada

uno de los mtodos utilizados para evaluar el desempeo analtico de las pruebas

bioqumicas, siendo de gran ayuda en el aprendizaje continuo.

25

BIBLIOGRAFA

Educacin continuada en el laboratorio clnico/ Control de la calidad interno: una prctica muy actual; 2011-2012 Ed Cont Lab Cln; 15: 97-111.

Documentos tcnicos para el Laboratorio clnico; Gua tcnica para control de calidad de mediciones cuantitativas en el laboratorio clnico, / 2005.

Ricardo Guglielmone (col), Verificacin de mtodos en un laboratorio acreditado y planificacin del control de calidad interno; Acta Bioqum Cln

Latinoam 2011; 45 (2): 335-47

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