Universidade Estadual do Ceará Faculdade de Veterinária Biotecnologia da Reprodução Animal

Avaliação Microscópica do Sêmen

Vicente José de F. Freitas

Laboratório de Fisiologia e Controle da Reprodução

www.uece.br/lfcr

Plano de Aula

�  Apresentar a importância da realização da técnica.

�  Discutir os diferentes parâmetros microscópicos

seminais.

�  Apresentar a técnica de avaliação computadorizada.

�  Apresentar considerações finais sobre o tema

Conceito

�  Etapa de avaliação de reprodutores onde são considerados os

parâmetros microscópicos seminais.

�  Faz parte da rotina de centrais de IA quando:

�  da escolha de doadores de sêmen e

�  da manipulação e processamento do sêmen para congelação.

Parâmetros a serem observados 1.  Macroscópicos:

a.  Volume b.  Cor

c.  Aspecto d.  Turbilhão

2.  Microscópicos: a.  Motilidade massal

b.  Concentração espermática c.  Motilidade espermática

I.  Motilidade individual progressiva

II.  Vigor

d.  Morfologia espermática

Motilidade massal •  Conceito: •  É o movimento em forma de ondas observado, sob

microscópio, em uma gota de sêmen puro.

•  Procedimento: •  Colocar 10 µl de sêmen puro em uma lâmina. •  Observar no microscópio na objetiva de menor

aumento (×4). •  Avaliar em uma escala de 0 a 5.

Concentração espermática •  Conceito: •  Representa o número de espermatozoides por mL

do ejaculado. •  Ao multiplicar pelo volume ejaculado têm-se o

número total de espermatozoides.

•  Procedimentos: •  em câmara de Neubauer, •  em fotocolorímetro.

Motilidade espermática 1.   Motilidade individual progressiva:

1.  Estimativa subjetiva da viabilidade e qualidade espermática.

2.  Análise realizada em microscópio óptico. 3.  Avaliação pode ser dificultada em amostras com elevada

concentração espermática. 4.  Colocar 10 a 20µL de sêmen entre lâmina e lamínula e

observar em microscópio óptico nas objetivas de ×10 e ×40. 5.  Células móveis são observadas e estimado o percentual.

2.  Vigor: 1.  Velocidade na qual as células atravessam o campo. 2.  Avaliar em uma escala de 0 a 5.

Morfologia espermática

1.  Conceito: 1.  Estimativa do percentual de células normais e patológicas.

2.   Procedimento: 1.  Amostra é diluída e conservada em solução formol salina. 2.  Avaliação através de esfregaço e coloração;

1.  Hematoxilina-eosina ou Giemsa, Rosa de Bengala. 2.  100 a 200 sptz devem ser avaliados.

3.  Espermatozoides morfologicamente normais: •  Bovino: 65 – 90% •  Ovino: 80 – 95% •  Caprino: 80 – 95% •  Suíno: 70 – 90% •  Equino: 60 – 90%

Classificação das anormalidades espermáticas: • Primárias: associadas a cabeça e acrossomo. • Secundárias: gotas citoplasmáticas. • Terciárias: defeitos de cauda.

Análise computadorizada

Sistema de Análise Espermática Computadorizado – CASA

Ø  Sistema automatizado (hardware e software) para visualizar e

digitalizar imagens sucessivas dos espermatozoides.

Ø  Processa, analisa e fornece informações da cinética individual das

células e valores estatísticos.

Ø  Proposto e aplicado na tentativa de minimizar os efeitos da

avaliação subjetiva do sêmen.

Considerações

�  A avaliação dos parâmetros seminais microscópicos é a última etapa da escolha de reprodutores antes de confirmar a fertilidade dos mesmos.

�  Técnicas modernas de avaliação (CASA) podem tornar mais “qualitativa” o exame dos espermatozoides ejaculados.