Antigenos A y B en salivaINTRODUCCIONLa saliva es un lquido de la cavidad bucal, producido por las glndulas salivales, transparente, de viscosidad variable, compuesto principalmente por agua, sales minerales y algunas protenas. Se estima que la boca est humedecida por la produccin de entre uno y dos litros de saliva al da, durante la vida de una persona se generan unos 38.000. Esta cantidad de saliva es variable ya que va disminuyendo conforme avanzan los aos y debido a diferentes tratamientos. La produccin de saliva est relacionada con el ciclo circadiano, de tal manera que por la noche se segrega una mnima cantidad de saliva; adems, su composicin vara en funcin de los estmulos (como el olor o la visin de la comida) aumentando -por ejemplo- el pH ante estos estmulos (cuando en condiciones normales es de 6 a 7). Es segregada por las glndulas salivares mayores (partida, sublingual y submaxilar) y menores. La composicin es similar a la del plasma. Est compuesta por : Agua, Iones cloruro, Bicarbonato y fosfato, Moco, Lisozima, Enzimas, Estaterina e INMUNOGLOBULINAS. La saliva se produce en varias glndulas especializadas que se sitan bajo la lengua y en el interior de la boca; son las glndulas partidas y las submaxilarsublingual Ya que las mucinas estn compuestas de glicoprotenas, no es de extraar que los antgenos de los grupos sanguneos ABO sean producidos en abundancia por las glndulas salivares submaxilar-sublingual y ampliamente distribuidos en la saliva humana. Si una persona es secretora de grandes cantidades de antgenos de su grupo sanguneo se encuentran presentes en su saliva, por lo que la capacidad de adhesin de ciertas bacterias a los dientes se ve inhibe o limita en gran medida, con lo que el riesgo de caries se reduce. Los no-secretores apenas segregan el antgeno de su grupo sanguneo en sus fluidos corporales, por lo que el riesgo que tienen de sufrir caries es bastante mayor. Asimismo tienen unos niveles inferiores de los anticuerpos IgA en su saliva, lo que tambin compromete su capacidad de protegerse contra esas bacterias. Las personas con poca higiene bucal mantienen una dentadura libre de caries, mientras que otros que se cepillan los dientes despus de cada comida parecen condenados a visitar al dentista cada dos o tres veces por mes. Los estudios muestran que el grupo O especialmente los no-secretores-parece tener el mayor riesgo de caries, mientras que el grupo con menor incidencia es el grupo A, especialmente los secretores.

MATERIAL

Mechero Bunsen Frasco de boca ancha Centrifuga clinica Tripie 1 tubo de 13 x 100 mm Solucion salina isotonica 3 pipetas Pasteur con Bulbo Sueros tipificadores anti-A y Anti-B previamente diluidos a la maxima dilucion aglutinante. Eritrocitos Humanos A y B conocidos, en suspensin al 5 % en solucion salina isotonica. 4 Tubos de 10 x 75 mm.

METODO 1.-Colectar 5 a 10 ml desaliva en un tubo. No estimular la secrecion con chicle o con algun materal azucarado.2.-Diluir la saliva con igual volumen de solucion salina y mantener en bao Maria a ebullicin durante 10 minutos, para inactivar las enzimas presentes.

3.-Centrifugar a 3,000 r.p.m. durante 10 minutos y transferir el sobrenadante a otro tubo.

6.- A los tubos A y A testigo agregar una gota de suero anti-A diluido. Al tubo B y B testigo, agregar una gota de suero anti-B diluido. Incubar todos los tubos a tempertura ambiente durante 10 minutos

5.- A los tubos marcados A y B agregarles 1 gota de saliva. A los testigos, agregar una gota de solucin salina

4.-Marcar 4 tubos de la siguiente manera: A, A testigo, B y B testigo.

7.-A cada tubo de la serie A agregar una copa de eritrocitos A al 5%. Cada tubo de la serie B, agregar na gota de eritrocitos B al 5%.

8.-Mezclar el contenido de cada tubo y centrifugar a 1000 r.p.m. durante 60 segundos

9.-Observar la presencia o ausencia de aglutinacin.

Sistema RhINTRODUCCIONEl Antigeno Rh es otro antigeno eritrocitico importante que puede dar lugar a reacciones transfuncionales. Anunque no existe anticuerpos naturales frente los antigenos Rh, las personas que no expresan el antgeno Rhesus D (Rh) (alrededor del 15% de la poblacin) pueden resultar sensibilizadas frente a este antigeno y producir anticuerpos Rh cuando reciben transfusiones de sangre procedentes de donantes que expresan RhD. Los grupos sanguineos Rh (descubierto por Landsteiner y Wiener en 1940) tiene un inters clnico similar a los grupos ABO dada su relacin con la enfermedad hemoltica del recin nacido (EHRN) y su importancia en la transfusin. Qu es el Rh? En 1940, el Dr. Landsteiner descubri otro grupo de antgenos que se denominaron factores Rhesus (factores Rh), porque fueron descubiertos durantes unos experimentos con monos Rhesus. Las personas con factores Rhesus en su sangre se clasifican como Rh positivas; mientras que aquellas sin los factores se clasifican RH negativas. Las personas Rh negativas forman anticuerpos contra el factor Rh, si estn expuestas a sangre Rh positiva. Por qu es importante saber qu Rh tiene una persona? La presencia de anticuerpos contra los antgenos de la sangre determina las compatibilidades e incompatibilidades de los grupos sanguneos. La transfusin de sangre entre grupos compatibles generalmente no causa ningn problema. La transfusin de sangre entre grupos incompatibles origina una respuesta inmune contra las clulas que portan el antgeno y produce una reaccin a la transfusin. El sistema inmune ataca las clulas de la sangre donada, causando su fragmentacin (hemolizacin). Esto puede causar serios problemas, incluyendo temperatura alta, presin arterial elevada, taquicardia, insuficiencia renal y shock. Los antgenos tambin estn presentes en otros componentes de la sangre, como los glbulos blancos, las plaquetas y las protenas del plasma. Estos componentes tambin causan un tipo de reaccin similar a la transfusin como shock anafilctico grave, hipotensin, bronco espasmo, urticaria, prpura-post-transfusional, diarrea, hepatitis. Hoy en da, toda la sangre para transfusin es verificada cuidadosamente. La enfermedad del Rh es provocada por una madre Rh- que concibe un hijo Rh+. Los anticuerpos de la sangre materna destruyen los Rh+ del beb. Si la madre piensa tener un segundo hijo debe aplicarse una vacuna que elimina los anti-Rh, llamada la gammainmunoglobulina. sta debe ser aplicada dentro de las 72 horas despus del primer parto, ya que si se tiene un segundo bebe con Rh+ la madre producir anti-Rh en exceso que destruir la sangre del hijo, produciendo una enfermedad llamada Eritoblastosis fetal (anemia severa), si el hijo nace, por que por la produccin en exceso de los anti-Rh el hijo puede morir intrauterinamente.

MATERIAL Centrifuga clinica 1 bao Maria a 370C. 2 tubos de 10 x75 mm Suero tipificador anti-D comercial Solucion de albumina bovina al 22% Suero de Coombs Solucion salina isotonica.

METODO 1.-Tomar una muestra de sangre de manera similar como se describio en el inciso para determinar en el inciso 1 para determinar sistema ABO 6.-Buscar la presencia de aglutinacin, primero en el autotestigo y despus en el otro tubo 2.-Marcar dos tubos, uno con Rh y otro como autotestigo. Colocar en cada uno una gota de eritrocitos 3.-Al primer tubo (Rh) agregar una gota de suero antiD y agitar suavemente

5.- Centrifugar ambos tubos durante 60 segundos a 1000

4.-Al segundo (autotestigo) agrgar una gota de albumina al 22% y agitar suavemente.

7.-Si el resultado es NO aglutinacin, entonces se procede a la fase con antiglobulina.

8.-Incubar ambos tubos a 370C durante 30 minutos y lavar 3 veces con solucion salina isotonica centrifugando a 3,400 r.p.m durante dos minutos. Despus de la ultima centrifugacion desechar el sobrenadante y agregar al paquete celular una gota de suero de Coombs (anti-globulina humana)

9.-Resuspender suavemente el paquete celular y centrifugar ambos tubos a 1000 r.p.m. durante 60 segundos.

10.-Buscar la presencia de aglutinacin

CUESTIONARIO 1. Qu causa la intolerancia de Rh? La mayora de la gente tiene sangre de factor Rh-positivo. Esto significa que producen el factor Rh, una protena hereditaria que se encuentra en la superficie de sus glbulos rojos. Alrededor del 15 por ciento de los individuos de raza blanca y el 7 por ciento de los de raza afroamericana carecen del factor Rh y son considerados Rh-negativos. La condicin negativa de su factor Rh no afecta la salud de estas personas en absoluto. La intolerancia de Rh de los neonatos ocurre cuando existe una falta de compatibilidad entre la sangre de la madre y la de su feto 2. Qu consecuencias puede tener una madre que contenga Rh negativo y el hijo Rh positivo y que se realiza en esos casos? Cuando la madre de un beb es Rh-negativa y el padre es Rh-positivo, es posible que el beb herede la sangre Rh-positiva de su padre. En este caso existe el peligro de que algunos de los glbulos rojos de la sangre Rh-positiva del beb penetren en el flujo sanguneo de la madre durante el embarazo y, especialmente, durante el parto y el nacimiento. Como los glbulos rojos que contienen el factor Rh son extraos para el sistema orgnico de la madre, su cuerpo trata de eliminarlos mediante la produccin de anticuerpos. Esta activacin de la respuesta inmune de la madre se denomina sensibilizacin 3. Cmo funciona la RhIg? La RhIg contiene anticuerpos contra el factor Rh. Estos anticuerpos se adhieren rpidamente a las clulas Rh-positivas del feto que se encuentran en el flujo sanguneo de la madre y ayudan a destruirlas. Como consecuencia de esto, el cuerpo de la madre no produce anticuerpos contra las clulas Rh-positivas del feto. La proteccin que brinda la RhIg slo perdura durante unas 12 semanas, por lo que es necesario repetir el tratamiento durante cada embarazo y ante las situaciones descritas ms arriba en que las clulas sanguneas del feto pueden mezclarse con la sangre de la madre.

PRUEBA COOMBS DIRECTA INTRODUCCION La prueba de la antiglobulina humana permite detectar e identificar inmunoglobulinas y/o componentes del complemento unidos a hemates, ya que, aadido a hemates sensibilizados producir su aglutinacin a condicin de que dichos hemates hayan sido lavados a fondo con suero salino fisiolgico para eliminar las protenas plasmticas que no estn unidas especficamente a los mismos. PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA Detecta loa anticuerpos o componentes del complemento fijados in vivo en los hemates de un paciente. Por ello, podemos aplicar dicha prueba al estudio de la enfermedad hemoltica del recin nacido y de las anemias hemolticas, ya sean autoinmunes o inducidas por frmacos y de las reacciones transfusionales.

PRUEBA DIRECTA Enfermedad hemoltica del recin nacido Anemia hemoltica por autoanticuerpos Anemia hemoltica debido a frmacos Investigacin de reacciones transfusionales

DUDAS RESUELTAS 1.- Cules son los valores normales?Coombs directo negativo para eritrocitos y Coombs indirecto negativo para el suero

2.- En que padecimientos la prueba de Coombs directa da resultados anormales? Anemia hemoltica autoinmunitaria sin otra causa subyacente Anemia hemoltica inducida por medicamentos (muchos medicamentos han sido asociados con esta complicacin) Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica del recin nacido) Mononucleosis infecciosa Infeccin por micoplasma Sfilis Leucemia linfoctica crnica u otro trastorno linfoproliferativo Lupus eritematoso sistmico u otra afeccin reumatolgica Reaccin a transfusin como la ocasionada por unidades de sangre de compatibilidad impropia.

3.-Cundo es negativo el Coombs directo? En anemias hemolticas por defecto intrnseco de los hemates (hemoglobinopatas, enzimopatas, membranopatas). 4.-Qu otro nombre se le da a la prueba de Coombs directo? Prueba de antiglobulina directa

MATERIAL Centrifuga clnica Bao Maria a 37 grados C. Suspensiones de eritrocitos problema y eritrocitos normales previamente lavados y al 2%. Solucin salina isotnica. Suero de Coombs. 2 tubos de ensaye de 13x100 mm.

DIAGRAMA DE FLUJO

Colocar en un tubo de ensaye 2 gotas de la suspensin al 2% de los GR problema.

Aadir 2 gotas del suero de Coombs

Centrifugar los tubos a 1000 r.p.m durante 60 seg.

Preparar de la misma forma en un tubo que contenga una suspensin de GR normales y suero de Coombs (testigo negativo de suero de Coombs).

Desprender el botn suavemente y buscar la presencia de aglutinacin.

NOTA; la integracin de los eritrocitos problema con el suero de Coombs indica que dichos eritrocitos estn recubiertos con anticuerpos especficos. El tubo testigo no debe presentar aglutinacin.

PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA PRUEBA DE ANTIGLOBULINA INDIRECTADetecta los anticuerpos o los componentes del complemento fijados in vitro a los hemates durante un tiempo de incubacin en el laboratorio. Tiene aplicacin en el estudio de anticuerpos en un suero problema a travs de hemates de composicin antignica conocida (hemates de escrutinio, paneles de hemates, etc.), determinacin de antgenos eritrocitarios a travs de antisueros especficos y, por ltimo, en las pruebas de compatibilidad pretransfusional. El reactivo antiglobulina que se utiliza bsicamente en todas las aplicaciones indicadas es un suero poliespecfico que contiene principalmente anti-IgG y anti-componente C3d del complemento, pudiendo contener adems anticuerpos de otras especificidades: anti IgM, anti-IgA, anti-C3b, etc., pero no es conveniente que contenga anti-C4, ya que dicha especificidad no slo carece de significado para el diagnstico, sino que los resultados positivos debidos a la misma pueden confundir por tratarse de positivos falsos. En una prueba de antiglobulina directa positiva con el suero poliespecfico, puede tener inters investigar, mediante los sueros antiglobulina monoespecficos, el tipo de anticuerpo unido a los hemates. Siempre que en los hemates se detecte algn anticuerpo fijado, se puede separar mediante un proceso de elucin y proceder a su estudio. Si nicamente estn fijados componentes del complemento, no se puede efectuar ninguna elucin pero ello constituye un dato til para el diagnstico PRUEBAS INDIRECTA Investigacin de anticuerpos Pruebas cruzadas Fenotipos eritrocitarios Reactivo antiglobulina Los diversos sueros antiglobulina inmunoespecficos se obtienen de modo anlogo a los poliespecficos, pero se utilizan las distintas fracciones separadas y purificadas para inyectar a los animales destinados a producir el reactivo, aunque en la actualidad se obtienen reactivos de calidad excelente gracias a los mtodos de obtencin de anticuerpos monoclonales. Para los estudios de anticuerpos irregulares en sueros problema y las pruebas cruzadas, se ha cuestionado la utilidad de la presencia de anticomplemento en los reactivos antiglobulina humana.

DUDAS RESUELTAS 1.- Para qu se realiza el Coombs indirecto? En pruebas cruzadas (transfusiones), deteccin de anticuerpos, anemia hemoltica del recin nacido en la madre. 2.- Qu es la enfermedad hemoltica del recin nacido? Es una enfermedad que se debe a la destruccin de los hemates fetales por anticuerpos (IgG) maternos, que se produce cuando la madre es Rh negativa y el feto Rh positivo. Al nacer se debe determinar la hemoglobina y bilirrubina en la sangre de cordn umbilical y realizar un test de Coombs directo en los hemates del recin nacido. 3.- Se puede prevenir la enfermedad hemoltica del recin nacido? SI, con el fenotipaje de parejas, en aquellas parejas que la mujer sea Rh negativa deben ser tipadas con relacin al Rh. Si el compaero de una mujer sensibilizada es Rh positivo homocigoto, todos los fetos estarn afectados con la enfermedad hemoltica del recin nacido; si es heterocigoto existe un 50 % de probabilidades de que cada feto sea Rh negativo y en consecuencia no presente dicha enfermedad. 4.-Qu otro nombre se le da a la prueba de Coombs indirecto? Prueba de antiglobulina indirecta

MATERIAL Centrifuga clnica Bao Maria a 37C. Suspensin de eritrocitos de grupo O Rh positivo al 5 %. Suero problema Suero de Coombs Solucin salina isotnica 3 tubos de ensaye de 13x100mm Suero anti-D diluido a titulo subaglutinante. DIAGRAMA DE FLUJO Colocar en un tubo de ensaye etiquetado como problema 2 gotas de suero problema y aadir 2 gotas de la suspensin de GR al 5% de GR O Rh positivos. Colocar en un segundo tubo etiquetado como testigo negativo 2 gotas de soln. Salina isotonica y 2 gotas de la suspensin al 5% de GR O Rh positivos.

Centrifugar todos los tubos a 1000 r.p.m. durante 60 segundos

Desprender suavemente los GR sedimentados y buscar aglutinacin. En caso de ser negativa o dbilmente positiva los GR se resuspenden y se incuban a 37C durante 20 min.

Colocar un tercer tubo etiquetado como testigo positivo 2 gotas de suero antiD comercial diluido a titulo subaglutinante y 2 gotas de la suspensin al 5% de GR O Rh positivos. Lavar los GR por centrifugacin con soln. Salina una sola vez, y despus de decantar resuspender en la soln. Salina remanente, aadir 2 gotas de Coombs.

Desprender el botn suavemente y buscar aglutinacin.

Mezclar y centrifugar a 1000 r.p.m durante 60 seg.

GRUPO SANGUINEOS

INTRODUCCION

Un grupo sanguneo es una forma de agrupar ciertas caractersticas de la sangre que dependen de los antgenos presentes en la superficie de los glbulos rojos y en el suero de la sangre. Las dos clasificaciones ms importantes para describir grupos sanguneos en humanos son los antgenos y el factor RH. Las transfusiones de sangre entre grupos incompatibles pueden provocar una reaccin inmunolgica que puede desembocar en hemlisis, anemia, fallo renal, shock, o muerte. Los antgenos Las personas con sangre del tipo A tienen glbulos rojos que expresan antgenos de tipo A en su superficie y anticuerpos contra los antgenos B en el suero de su sangre. Las personas con sangre del tipo B tiene la combinacin contraria, glbulos rojos con antgenos de tipo B en su superficie y anticuerpos contra los antgenos A en el suero de su sangre. Los individuos con sangre del tipo O no expresan ninguna de los dos antgenos (A o B) en la superficie de sus glbulos rojos (de ah que se denomine "O" y no "cero", pues procede de la palabra alemana Ohne que significa Sin) pero pueden fabricar anticuerpos contra ambos tipos, mientras que las personas con tipo AB expresan ambos antgenos en su superficie y no fabrican ninguno de los dos anticuerpos. A causa de estas combinaciones, el tipo O puede ser transfundido sin ningn problema a cualquier persona con cualquier tipo ABO y el tipo AB puede recibir de cualquier tipo ABO. Herencia del tipo A,B,O. Para tener una vison ms amplia de como se produce la herencia gentica se puede ver el artculo Gregor Mendel. Son controlados por un solo gen con tres alelos: O (SIN, por no poseer los antigenos ni del grupo A ni del grupo B), A, B. Los eptopos responsables son carbohidratos que aparecen en glicoesfingolpidos de membrana y tambin en glucoprotenas. El gen H codifica la enzima fucosil transferasa, que adiciona fucosa a una cadena oligosacardica precursora. Los tres ltimos azcares de la cadena se denominan antgeno H (Figura 1). En un locus aparte est el sistema ABO, con tres alelos. El alelo A codifica una transferasa que une N-acetil

galactosamina a la cadena H, mientras que el alelo B codifica una transferasa que une una galactosa. El alelo O no produce transferasa y por tanto no modifica la sustancia H. El azcar unido al carbono 3 de la galactosa determina la actividad antignica. La galactosa no acepta azcar en el carbono 3 a no ser que haya fucosa unida al carbono 2. El alelo A da tipos A, el B tipos B y el alelo i tipos O siendo A y B alelos dominantes sobre i. As, las personas que heredan dos alelos ii tienen tipo O; AA o Ai dan lugar a tipos A; y BB o Bi dan lugar a tipos B. Las personas AB tienen ambos fenotipos debido a que la relacin entre los alelos A y B es de codominancia. Por tanto, es prcticamente imposible para unos progenitores AB el tener un hijo con tipo O.

Fenotipo Bombay Una posible explicacin a este hecho es que el hijo o los progenitores clasificados como tipo O tengan en realidad el, muy raro, fenotipo Bombay; ambos han heredado dos alelos recesivos del gen H, (su grupo sanguneo es Oh y su genotipo es "hh"), y por tanto no producen la protena "H" que es la precursora de los antgenos A y B. De esta forma no supone ningn problema la presencia de anticuerpos A o B en el suero pues los antgenos respectivos no son producidos al no existir su precursor. Las escasas personas con este fenotipo no expresan el antgeno "H" en sus glbulos rojos y, por tanto, tampoco producen antgenos A o B. Sin embargo s producen anticuerpos para H (que est presente en todos las glbulos rojos excepto en aquellos con fenotipo hh) as como para A y B y por tanto slo son compatibles con donantes del mismo tipo hh, es decir, las personas con el grupo sanguneo con el fenotipo Bombay pueden ser nicamente transfundidas con personas del mismo grupo sanguneo. Herencia del factor Rh El factor Rh es heredado de la misma forma, con la diferencia de que hay dos alelos y el Rh es dominante. La enfermedad del Rh es provocada por una madre Rh- que concibe un hijo Rh+. Los anticuerpos de la sangre materna destruyen los Rh+ del beb. Si la madre piensa tener un segundo hijo debe aplicarse una vacuna que elimina los anti-Rh, llamada la gammainmunoglobulina. sta debe ser aplicada dentro de las 72 horas despus del primer parto, ya que si se tiene un segundo bebe con Rh+ la madre producir anti-Rh en exceso que destruir la sangre del hijo, produciendo una enfermedad llamada Eritoblastosis fetal (anemia severa), si el hijo nace, por que por la produccin en exceso de los anti-Rh el hijo puede morir intrauterinamente.

Compatibilidad Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O- es compatible con todos, por lo que quien tiene dicho grupo se dice que es un donante universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+ podr recibir sangre de cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal. La tabla que sigue indica las compatibilidades entre grupos sanguneos. Por ejemplo, una persona de grupo A- podr recibir sangre O- o A- y donar a AB+, AB-, A+ o A-. Donante O- O+ B- B+ A- A+ AB- AB+ X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X

Receptor AB+ ABA+ AB+ BO+ OFrecuencia

La distribucin de los grupos sanguneos en la poblacin humana no es uniforme. El ms comn es O+, mientras que el ms infrecuente es AB-. Adems, hay variaciones en la distribucin en las distintas subpoblaciones humanas. Tipo Frecuencia O+ A+ B+ OAB39% 33% 9% 7% 6% 2%

AB+ 3% AB- 1%

MATERIAL Centrifuga clnica. Torundas con alcohol 6 tubos de ensaye de 12x75 mm. 3 pipetas Pasteur. Jeringa desechable de 5 ml con aguja de 12x32 mm. 2 tubos de 13x100 mm. 5 aplicadores desechables. Sueros tipificadotes anti-A, anti-B y anti-AB. Solucin de albmina bovina al 22%. Eritrocitos humanos tipo A, B y O previa y correctamente

tipificados, en suspensin al 15% (solucin salina isotnica).

DIAGRAMA DE FLUJO

Obtener suero mediante la extraccin de 5 ml de SP en un tubo 13x100

Centrifugar a las siguientes condiciones: 3,400 r.p.m. 15 o 1000 r.p.m. 1 min.

Rotular 3 tubos con las siguientes leyendas: Anti-A, Anti-B, Anti-AB y autotestigo. Tres mas con A, B, O.

Desprender con agitacin suave el botn de las clulas, e inclinarlo hasta la posicin horizontal para apreciar la aglutinacin.

Del tubo de SP. Extraer eritrocitos del fondo del tubo que no estn atrapados en el coagulo y realizar un lavado con sol. NaCl isotnica.

En los tubos marcados con A, B y O, Colocar una gota de del suero del individuo y agregar 2 gotas de la suspensin al 5% de GB previamente tipificados. Mezclar suavemente.

Eliminar el sobrenadante y resuspender con NaCl al 5%. Aadir una gota de esta suspensin en los primeros tres

Centrifugar a las siguientes condiciones: 3,400 r.p.m. 15 o 1000

Agregar una gota de suero comercial anti-A, B y AB segn corresponda a los primeros 3 tubos marcados. Aadir al tubo de autotestigo una gota de albmina al 22%, mezclar suavemente.

Observar los sobrenadantes contra un fondo blanco, para detectar hemlisis

RESULTADOS

Caractersticas y reacciones de los cuatro tipos sanguneos ABO

DUDAS RESUELTAS

1. Que es una antgeno? Un antgeno es una molcula (generalmente una protena o un polisacrido) de superficie celular, que puede inducir la formacin de anticuerpos. Hay muchos tipos de molculas diferentes que pueden actuar de antgenos, como las protenas, los polisacridos y, ms raramente, otras molculas como los cidos nucleicos. Cada antgeno est definido por su anticuerpo, los cuales interactan por complementariedad espacial. La zona donde el antgeno se une al anticuerpo recibe el nombre de eptopo o determinante antignico, mientras que el rea correspondiente de la molcula del anticuerpo es el paratopo. 2. Que pasa si la madre es Rh- y el feto es Rh + y no se detecta? Estos nios nacen, si sobreviven, con una especie de ictericia, la eritroblastosis, y podrn sobrevivir, solamente si se les practica inmediatamente una transfusin total de sangre, con lo que se eliminara la presencia de los anticuerpos a los antgenos D del cuerpo del nio. Ms nios no podran sobrevivir, ya que la produccin de anticuerpos se estimul por el nuevo contacto. Para evitar esas complicaciones, se inyecta actualmente a las madres Rh-negativas, que han dado a luz a un nio Rh-positivo, un suero con anticuerpos al antgeno D, inmediatamente despus del nacimiento del nio. Ellos ocupan los antgenos en los glbulos que han penetrado y evitan as que el sistema inmunolgico materno tenga contacto con el antgeno D y de esa manera no produzca anticuerpos al antgeno D.

PRUEBA DE COMPATIBILIDAD SANGUINEA

INTRODUCCIONTodos los procedimientos de estudio pre-transfusionales deben proporcionar la siguiente informacin acerca de ambos, el paciente y las unidades de sangre:

Grupo ABO y anticuerpos Tipo Rh D Presencia de otros anticuerpos contra los glbulos rojos que podran causar hemlisis en el paciente.

El banco de sangre juega una parte central en asegurar que los pacientes reciban sangre compatible. Brevemente, es responsable de las siguientes tareas. 1. Asegurar que solo unidades de sangre que han sido estudiadas y encontradas negativas para infecciones transmisibles por transfusin sean aceptadas para pruebas de compatibilidad. 2. Estudiar cada componente sanguneo para determinar el grupo ABO y Rh y etiquetarlo claramente y correctamente con el grupo. 3. Chequear que cada formulario de solicitud de sangre ha sido completado totalmente por el mdico que indic la sangre al paciente y que la informacin coincide con aquella en el tubo con la muestra de sangre del paciente. 4. Estudiar la muestra de sangre del paciente para determinar el grupo ABO y Rh y efectuar la deteccin de anticuerpos. 5. Seleccionar el producto sanguneo ms apropiado para el paciente. 6. Efectuar una prueba de compatibilidad (prueba cruzada) para estudiar los glbulos rojos del donante contra el suero del paciente y asegurar que sangre de un grupo ABO y Rh segura es proporcionada para el paciente. 7. Etiquetar las unidades de sangre compatibles especficamente para el paciente y despacharlas o guardarlas disponibles para entrega inmediata. Tpicamente, el banco de sangre reservar estas unidades por un mximo de 48 horas despus del momento en que estas fueron solicitadas. Si se ha despachado sangre sin pruebas de compatibilidad en una emergencia, esto debe ser claramente indicado en la etiqueta de compatibilidad. 8. Asegurar que todos los otros chequeos y estudios han sido completados y registrados cuidadosamente. 9. Despachar los productos correctos en concordancia con los procedimientos locales.

Los donantes de sangre y los receptores deben tener grupos compatibles. El grupo O- es compatible con todos, por lo que quien tiene dicho grupo se dice que es un donante universal. Por otro lado, una persona cuyo grupo sea AB+ podr recibir sangre de cualquier grupo, y se dice que es un receptor universal. La tabla que sigue indica las compatibilidades entre grupos sanguneos. Por ejemplo, una persona de grupo A- podr recibir sangre Oo A- y podr donar a AB+, AB-, A+ o A-. entre grupos sanguneosTabla de compatibilidad

MATERIAL Centrifuga clnica. Bao Maria a 37 grados. 2 jeringas desechables de 5 ml con aguja de 21x32mm. Tubos de 10x75 mm. Pipetas Pasteur. Suero de Coombs. Solucin salina isotnica. Solucin de albmina al 22%. Suspensin de eritrocitos (lavados) al 5% en solucin salina isotnica tanto del donador como del receptor. Suero del donador y del receptor.

DIAGRAMA DE FLUJOFase I. salina rpida: En un tubo marcado como PM (prueba mayor), colocar 2 gotas de la suspensin de GB del donador y dos gotas del suero receptor.

En un segundo tubo marcado pm (prueba menor), colocar 2 gotas de la suspensin de GB del donador y dos gotas del suero receptor.

Centrifugar ambos tubos a 1000 r.p.m. por 1 min.

.

Observar el sobrenadante en busca de hemlisis. Resuspender suavemente el botn de los eritrocitos en busca de aglutinacin

Fase II. Albumina:

No aglutinacin

En los tubos de la fase 1 agregar dos gotas de la solucin de albumina al Incubar a 37 grados durante 15 min . Centrifugar a 1000 r.p.m. durante 1 min. Resuspender suavemente el botn de GR y buscar la presencia de aglutinacin.

Fase III. Prueba indirecta de Coombs:

No aglutinacin Centrifugar a 3400 r.p.m. por 2 min.

Lavar 3 veces los eritrocitos de ambos tubos con sol. Salina Despus del ltima lavado agregar dos gotas de suero de Coombs y mezclar. . Resuspender nuevamente el botn de eritrocitos y buscar la presencia de aglutinacin

DUDAS RESUELTASQue tipos de transfusin se hacen? El fraccionamiento de la sangre permite administrar de forma adecuada a cada paciente el componente de la sangre que realmente le hace falta. As, se pueden realizar los siguientes tipos de transfusiones:

Transfusin de Hemates (Glbulos Rojos). Su objetivo es mejorar durante un tiempo la capacidad de transporte de oxgeno de la sangre, intentando corregir las manifestaciones ocasionadas por la falta de oxgeno Transfusin de Plaquetas Su objetivo puede ser doble: a) teraputico, en caso de hemorragia; b) profilctico: para evitar una hemorragia espontnea o quirrgica. + Concentrado de Plaquetas + Concentrado de Plaquetas de un Donante nico Transfusin de Plasma o Componentes del plasma. Indicado en los procesos de dficil de factores de coagulacin presentes en las deficiencias adquiridas o congnitas. + Plasma Congelado en Fresco + Crioprecipitado Transfusin de Granulocitos: En los pacientes con leucopenia (descenso del contenido de leucocitos en la sangre) intensa e infecciones graves y resistentes al tratamiento convencional puede recurrirse a la transfusin de granulocitos (un tipo de clula presente en la sangre). Este tipo de transfusin, de moda hace unos aos casi no se utiliza en la actualidad. Alternativas a la Transfusin de Sangre Homloga Su bsqueda se ha visto incrementada en los ltimos aos, debido a los riesgos que conlleva la transfusin homloga (de un individuo a otro). + Autotransfusin: Consiste en la transfusin de sangre o componentes que fueron extrados con anterioridad. Es decir, la sangre se le extrae al propio individuo que se le va a transfundir . + Alternativas Farmacolgicas a la Transfusin: Consiste en la administracin de sustancias que estimulan la produccin de los elementos sanguneos como es el caso de la eritropoyetina, que potencia la formacin de hemates (glbulos rojos) + Transfusin Dirigida: Consiste en la seleccin de donantes de sangre para un paciente concreto, se realiza con fundamento cientfico en la preparacin para el trasplante renal, prpura neonatal isoinmune, etc. Recambio Plasmtico Masivo Consiste en la sustitucin de plasma del paciente por soluciones de albmina o plasma congelado en fresco. Citoafresis Teraputica Consiste en la extraccin de clulas sanguneas anmalas. Al igual que el

recambio plasmtico, se realiza mediante procedimientos automatizados de afresis.

Transfusin Masiva Se denomina as a la transfusin de un volumen similar a la cantidad de sangre que tiene el receptor en un tiempo inferior a 24 horas.