DETERMINACIN DE ANTOCIANINAS

DETERMINACIN DE ANTOCIANINAS

EXTRACCIN DE ANTOCIANINAS DE LAS CORONTAS DE Zeamays L. MAZ MORADO

RESUMENEn el presente trabajo se investigaron lascondiciones ptimas de extraccin de antocianinasde las corontas del maz morado mediante elempleo de un diseo completo al azar con arreglofactorial 2A3B4C4D. Los factores estudiados fueronpH, solvente, tiempo y temperatura.

MATERIALES Y METODOSPreparacin del extracto y determinacin de antocianinas segn el mtodode pH diferencialSe pes 2,5 g de coronta de maz morado molida y tamizada a de 1 mmextrados con 200 mL de agua destilada y solucin etanlica al 20 y 40%, pH 2y 4 ajustados con HCl concentrado, durante tiempos de extraccin de 30, 60,120 y 240 minutos, a temperaturas de 25, 60, 75 y 90 C segn diseos factoriales en arreglo completamente al azar.Los extractos obtenidos fueron filtrados utilizando papel filtro Whatman N1con la ayuda de un equipo de vaco. Una alcuota del extracto se diluy enuna fiola de 25 mL con soluciones buffer de cloruro de potasio (pH 1) yacetato de sodio (pH 4,5). En las soluciones preparadas se determin elcontenido de antocianinas segn el mtodo de pH diferencial, de acuerdo aGiusti & Wrosltad (2001) utilizando espectrofotmetro UV-VIS y su contenidose expres como cianidina-3-glucsido.

CONCLUSINLa extraccin del colorante (antocianina) del maz morado se da principalmente por los siguientes mtodos: Por maceracin, en la cual evaluaron los factores que influyen en la extraccin como: tamao de partcula, tiempo de maceracin, relacin materia prima (m)/solvente(s), evaluacin de solventes (cidos y su concentracin) y temperatura de maceracin. Por calentamiento, donde evaluaron el nmero de etapas de extraccin, el tiempo y la temperatura de extraccin. Por maceracin con de uso de enzimas, donde evaluaron la influencia de la concentracin de la enzima en la extraccin de la antocianina del maz morado. - El mejor mtodo para extraer antocianina a partir del maz morado es el mtodo de maceracin, ya que se obtiene un rendimiento de 85% - El mejor resultado que obtiene es cuando la coronta molida de menor tamao de partcula (El anlisis individual de los factores y sus interac- ciones corroboran que la extraccin de antocianinas de las corontas del maz morado depende de la tempera- tura y el tiempo de extraccin, siendo favorecidas por el medio etanlico al 20% y pH entre 2 y 4, alcanzando valores de 46,534 mg de antocianina/g muestra.

VARIACIN DEL CONTENIDO DE VITAMINA C Y ANTOCIANINAS EN Myrciaria dubia CAMU CAMURESUMENMyrciaria dubia es un arbusto amaznico que produce varioscompuestos nutritivos y bioactivos. Esta investigacin se realiz paraampliar el conocimiento relacionado a la vitamina C y antocianinas. Lasmuestras fueron obtenidas de la Coleccin de Germoplasma del INIA. Lavitamina C y las antocianinas se analizaron con tcnicas estndares. Elcontenido de vitamina C mostr una amplia variacin y gradientes deconcentracin con diferencias significativas en frutos verdes y maduros.Tambin, las antocianinas totales presentaron una amplia variacin ygradientes de concentracin muy marcadas en los frutos maduros.Estas diferencias se debieron primariamente entre el contenido de vitamina Cy antocianinas de la cscara y las dems partes del fruto. Asimismo, se registr correlaciones positivas en el contenido de vitamina C y antocianinas. METODOSDeterminacin de antocianinas totales.Un mililitro del sobrenadante obtenido en el proceso de extraccin de vitamina C se emple para medir su absorbancia a 530 y 657 nm empleando un espectrofotmetro UV/Vis (Genesys 6, Thermospectronic) y laconcentracin de la muestra se determin con la siguiente ecuacin:

METODOSAnlisis cromatogrfico de antocianinas por HPLC-DADSe realiz de acuerdo a Figueras et al.17 7on modificaciones menores. Para ello se tritur en un mortero1 g de la muestra (cscara, plmula, raz o semilla sin testa) y 20 mL de solucin extractora (alcoholetlico 99% y cido frmico 1%). El homogenizado se filtr a travs de tres capas de Miracloth(Calbiochem) y el filtrado se transfiri a vasos de precipitado de 100 mL. El alcohol etlico se evapor a40C por 24 h. El residuo seco se disolvi con 2 mL de una solucin de alcohol metlico al 50% y cidofrmico al 1%. La solucin homogenizada fue transferida a microtubos de 1,5 mL y centrifug a 20000 xg por 5 minutos; el sobrenadante obtenido se filtr con filtros para jeringa de 0,45 m; 100 L de lasmuestras filtradas se analizaron en el HPLC-DAD (Elite La Chrome, modelo HP 1100). El anlisiscromatogrfico se hizo empleando una columna PurospherSTAR LiChroCART RP-18e (5 m, 250 x 4,6mm). La temperatura de la columna fue mantenida a 40C. El volumen de inyeccin de la muestra fue100 L. Se emple una fase mbil binaria: la solucin A compuesta de cido frmico:agua (10:90) y lasolucin B compuesta de metanol:agua:cido frmico (45:45:10). Se us una gradiente lineal de 80:20 a60:40 en 15 minutos con un flujo de 1,5 mL/min y de 60:40 a 20:80 en 10 minutos con un flujo de 2mL/min y un tiempo adicional de 5 min en la proporcin 20:80. La deteccin se program de 450 a 550nm. La longitud de onda analtica para detectar las antocianinas fue programada a 535 nm.

CONCLUSIONESMyrciaria dubia presenta una amplia variacinen el contenido de vitamina C y antocianinas ensus frutos, principalmente por la influencia defactores genticos.Adems, en los frutos maduros existe correlacinpositiva entre el contenido de vitamina C y antocianinasde la cscara y la pulpa en contacto con sta.Adicionalmente, la vitamina C y las antocianinas,particularmente la cianidina-3-glucsido, son sintetizadasen el proceso de germinacin y crecimiento inicial.