5/25/2018 ADN de Las Levaduras

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INFORME PRACTICO

NOMBRE:Yomara Bautista Camacho FECHA:16/05/14

MATRICULA:10647

DOCENTE:Andrea Schnorr Vargas

NOTA:MATERIA:Enzimologa y T. de las Fermentaciones

NOMBRE DE LA PRACTICA:ADN de las levaduras

N PRACTICA:7

OBJETIVOS:

OBJETIVO GENERAL:

Realizar en laboratorio la extraccin del ADN de levaduras.OBJETIVOS ESPECIFICOS:

Realizar el rompimiento de la pared celular de la levadura. Disolver el ADN y realizar la desnaturalizacin de la levadura. Observar la precipitacin del ADN al fondo del vaso.

INTRODUCCION:

La informacin que permite vivir a los seres vivos est contenida en los cidos nuclecos. Estos

son macromolculas compuestas por nucletidos, que tienen en su estructura un azcar (ribosa o

desoxirribosa), una base nitrogenada (adenina, guanina, citosina, timina, uracilo) y un grupo fosfato. En

principio, segn el azcar que forma su esqueleto se distinguen dos tipos de cidos nuclecos: el ADN,

con desoxirribosa y el ARN, con ribosa. El ADN contiene la informacin gentica necesaria para la

sntesis de las protenas que forman los seres vivos y llevan a cabo todos los procesos fisiolgicos de los

seres vivos. El ARN tiene diversas funciones siendo una de las principales el transporte de la

informacin desde el ADN hasta la maquinaria donde se producen las protenas. A nivel estructural

encontramos que mientras el ADN se encuentra mayoritariamente formado por por una doble hlice con

dos hebras complementarias, el ARN est formado por molculas de una sola hebra que se pliegan sobre

s mismas adquiriendo estructuras internas.

En su estructura secundaria, y de acuerdo a los diversos estudios fisicoqumicos, el ADN en solucin

acuosa ha demostrado que se trata de un polmero de elevado peso molecular (5 x 106) y que ofrece una

configuracin ms bien rgida y distendida. Entre las consecuencias de su elevado peso molecular y de la

rigidez de sus molculas se destaca la elevada viscosidad de las soluciones acuosas de ADN. Una

solucin de ADN tiene una densidad mucho mayor que la del agua. Otra consecuencia de las citadas

propiedades de la molcula de ADN es la gran facilidad con que las fuerzas de friccin reducen su peso

molecular por rotura de su cadena. Es prcticamente imposible obtener a partir de material biolgicoADN sin que tenga cierto grado de friccin, por lo que es muy probable que los pesos moleculares del

ADN aislado tengan poco que ver con el tamao de la molcula del ADN in vivo.

Debido a que el ADN es la molcula que almacena la informacin precisa para que un ser vivo pueda

llevar a cabo todas las funciones que necesita, su aislamiento de clulas y tejidos es el primer paso en

muchas investigaciones en biologa.

El aislamiento del ADN tambin es empleado en diversos campos como la medicina, la biotecnologa o

la criminologa para obtener mejores terapias, mejorar cosechas o identificar individuos. Cuando se

habla del ADN hay que diferenciar el ADN genmico, que se encuentra en el ncleo y contiene la

mayora de los genes, de los ADNs extranucleares, que seencuentran en la mitocondria y el cloroplastoy contienen la informacin de ciertas protenas necesarias para el funcionamiento de esos orgnulos

celulares.

En el presente informe se muestra un mtodo de extraccin del ADN de levadura en cuatro fases:

1. Rotura de las clulas de levadura.2. Homogeneizacin del extracto en presencia de detergente.3. Desnaturalizacin de las protenas ligadas al ADN.4. Precipitacin del ADN con etanol.

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PROCEDIMIENTO DE ANALISIS

ADN de las Levaduras:Pesar 120 gr de

levadura

Aadir 150ml de aguafria a la levadura

Aadir una cucharadade sal

Aadir dos chorros delimon

Agitarsuavemente

Colar

Repetir filtrado(conservar la

pulpa)

Preparar 150ml de agua fria + 1cucharada de sal+ 3 cucharadas de

alcohol + 2 gotas de detergente

Agregar a lapulpa y mezclar

Revolversuavemente por

20 minutos

Agregar 3cucharadas desal y agitar 10

minutos

Dejar reposar

Conservar liquido

Diluir el liquido con 3veces su volumen de

alcohol

Observar el ADNprecipitado en el fondo

del vaso

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ANALISIS Y RESULTADOS

N NOMBRE DEL ANALISIS RESULTADOS ANALISIS DE RESULTADOS

1 ADN de las Levaduras

Se observo:

El ADN de las levadurasen forma de finas hebrasblancas.

El mtodo de extraccin delADN de levadura permiti laobtencin pequeas y finas

hebras blancas.

El primer paso de la extraccinpermiti la ruptura de las clulasde levadura por un medio de laadicin de sal y limn. El

detergente permiti ladegradacin de los componentescelulares para permitir laliberacin del ADN. Finalmentela adicin de etanol (undisolvente con polaridad media)

permite la precipitacin delADN.

Este extracto representa en sumayor parte ADN, sin embargo,

es muy probable que estamuestra no se encuentre

totalmente pura y que contengacantidades considerables deimpurezas como ARN.

Debido a esto el mtodopresentado en la presenteprctica podra ser utilizadocomo un mtodo de extraccin

inicial siendo necesarios otrosprocedimientos de purificacinpara obtener un ADN mucho

ms puro.

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CONCLUCIONES

Se realiz una prctica de extraccin y caracterizacin de ADN a partir de la levadura. El primer paso de la extraccin permiti la ruptura de las clulas de levadura por un medio de la adicin de

sal y limn. El detergente permiti la degradacin de los componentes celulares para permitir la liberacin

del ADN. Finalmente la adicin de etanol (un disolvente con polaridad media) permiti la precipitacin del

ADN mediante la desnaturalizacin de la levadura.

El ADN obtenido se presento en forma de finas hebras blancas.

CUESTIONARIO

1. Qu es ADN como est formado y qu funcin cumple?

El ADN es una molcula formada por unidades de nucletidos. Cada nucletido est formado por:

Un grupo fosfato Un azcar llamado desoxirribosa Una base nitrogenada que puede ser adenina, timina, guanina o citosina

Su funcin es guardar y trasmitir la herencia gentica de progenitores a descendientes.2. Cul es la importancia de ADN en las levaduras de uso alimentario?

Las levaduras transgnicas se usan principalmente en la industria alimentaria, en la produccin deaditivos alimentarios, aminocidos, pptidos, cidos orgnicos, polisacridos y vitaminas.

3. Cuntas molculas de ADN tienen las levaduras?

Las levaduras en estado haploide tienen 16 cromosomas y por tanto 16 molculas de DNA, perotambin existe un estado diploide que tiene 32 cromosomas y por tanto 32 molculas de DNA.

4. Qu utilidad prctica tiene sintetizar en laboratorio los cromosomas de la levadura de la cerveza?

Una de las utilidades practicas que tiene la sntesis de los cromosomas de la levadura de la cerveza,es incrementar la eficiencia de la levadura eliminando los genes no esenciales. Ya que muchos de sus

genes son prescindibles y suponen un consumo de energa innecesario.