UNIVERSIDAD NACIONAL DE CHIMBORAZOFACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUDCARRERA DE MEDICINA

FARMACOLOGA PRCTICAPRACTICA DE LABORATORIOSEXTO SEMESTRE BALEXANDRA ASADOVAYTAMARA BARRETOJOSE BUSTAMANTEDIEGO GUARCOWALTER GUACHOADRIANA HERRERAKARINA IBARRAESPECIES DE PLANTAS USADAS EN ENFERMEDADES DENTALESMateriales Planta a investigar. Molino analtico AKI Para la filtracin al vacio con embudo Bchner Soporte Pinza metlica Embudo de Bchner Papel de filtro circular (de un tamao que cubra la base del embudo sin sobrepasarla) matraz de Kitasato Adaptador de goma o de caucho Varilla de vidrio Conexin a un sistema de vaco (bomba de succin, trompa de agua). Para maceracin en frio Botella de vidrio vacia Rotavapor Etanol 70% Metanol Agua Solucin salina estril

MtodosPreparacin de las muestras Las cortezas de schinusterebinthifolius fueron obtenidas en Araguainatocantinis , Brasil y las hojas de pnica granatum, psidiumguanjava y chenopodiumambrosoides fueron recolectadas en el jardn de medicna natural de "Berta Langes de Morretes" en la universidad federal de maranhao Brasil. Una vez obtenas las muestras ,el material de la planta es secado por separado en un invernadero con aire acondicionado a una temperatura de 38C por 48 horas, para luego ser trituradas en un molino de corte, el agua restante fue evaporada por un freezedrying (secado por congelacin), los materiales secados y triturados del material de la planta,psidiumguajava (8220g), pnica granatum (248g) chenopodiumambrosoides (200g) y schinusterebinthifolus (200g) fueron extrados a travs de maceracin con etanol al 70 % por 24 horas a temperatura ambiente Este procedimiento fue repetido cuatro veces con una salida de del 12.5%. 14.6%, 11.8%, 26.6% (p/p) para el extracto de psidiumguajava, pnica granatum ,chenopodiumambrosoides , y schinusterebinthifolus respectivamente El extractohidroalcoholico fue filtrado y luego concentrado bajo presin reducida en un evaporador giratorio, los residuos secados de cada planta fueron cuidadosamente diluidos en solucin salina estril con una concentracin final de 5, 10, 50, 75 y 100 mg/dl, esterilizados a travs de procesos de filtracin en membranas de 0.22um, en una cabina de flujo laminada para luego ser conservadas en botellas estriles a 4C, para propsitos de prueba

Molino analtico AKIIndicaciones de seguridadEl funcionamiento correcto y seguro del aparato presupone que todos los usuarios han ledo atentamente las instrucciones de uso y observarn las indicaciones de seguridad contenidas en el mismo. Guarde estas instrucciones de uso en un lugar seguro, pero al que pueda tener acceso todo aquel que las necesite.Recuerde que slo podrn manipular este aparato personas debidamente cualificadas que conozcan su funcionamiento a la perfeccin y tengan la acreditacin y autorizacin necesarias para realizar operaciones en este mbito.El aparato debe ser abierto tambin en caso de reparacin slo por una persona cualificada. Antes de la apertura, se debe sacar el enchufe de la red. Las piezas conductoras de tensin en el interior del aparato pueden an estar bajo tensin tambin un tiempo prolongado tras sacar el enchufe de la red.El aparato slo puede desconectarse de la red elctrica si se desenchufa el cable correspondiente. La toma de corriente de la pared debe encontrarse en un lugar para el usuario. Siga siempre las advertencias de seguridad y las directivas que estn en vigor, as como las disposiciones de seguridad y prevencin de accidentes que puedan aplicarse al trabajo en el laboratorio. Lleve asimismo su equipo de proteccin personal. Recuerde que si el equipo de proteccin no es el adecuado o est defectuoso, el usuario puede verse expuesto a los peligros que entraen los lquidos que salpiquen.Atencin: a que el molino en funcionamiento este situado plano y se sujete con ambas manos. Asegrese de que ninguna parte del cuerpo quede entre las partes mviles de la carcasa.El molino de anlisis A 11 Basic no puede utilizarse en atmsferas con peligro de explosin ni en lugares en los que deba trabajarse debajo del agua. No triture nunca materiales explosivos, txicos o perjudiciales para la salud. Adems, observe siempre las advertencias de seguridad y las directivas que se encuentren en vigor en relacin con las explosiones de polvo.Si el material que va a molerse se fragiliza con refrigerantes (como es el nitrgeno lquido o el hielo seco), ser preciso llevar el equipo protector adecuado (consulte las directivas sobre prcticas de laboratorio y las normativas de prevencin de accidentes que se aplican en estos laboratorios).Asegrese de que no se forme presin en el rea de molienda (sobre todo si utiliza refrigerantes).Atencion: Si utiliza nitrgeno lquido, deber esperar a que ste se evapore por completo antes de atornillar el recipiente de molienda y comenzar el proceso de molienda.Atencin: Los componentes del aparato pueden permanecer fros bastante tiempo despus de refrigerarse con nitrgeno lquido, por lo que slo pueden manipularse si se lleva el equipo de proteccin puesto.Use conforme al previstoEl molino de anlisis A 11 Basic es un aparato de carga con el que se pueden realizar dos mtodos diferentes de molino. La copa de trituracin cierra hermticamente, por lo que es prcticamente nula la prdida de material molido.Molido de reboteAplicacin para materiales duros para moler, quebradizos o secos o materiales para moler quebradizos por el fro (p.ej. cereales, caf...). En esto caso, el material es desmenuzado por medio del rotor batidor. El material queda roto. La finura final es determina- da por la duracin del molido y la altura de llenado, as como por la composicin del material a cargar.Molido de corteAplicacin para materiales a moler blandos y fibrosos (p.ej. heno, papel.).En esto caso, el material es cortado por medio de una cuchilla rotativa. Tambin en esto caso, la duracin del molido, la cantidad y la composicin del material a moler determinan la finura final que se puede conseguir. Por medio del esfuerzo de corte, se aplica menos energa en el material para moler, lo que conduce a un reducido calentamiento. La prdida del material molido es tambin prcticamente nula en este caso, gracias al tipo cerrado de construccin.

Puesta en servicioControlar si la tensin indicada en la placa de caractersticas concuerda con la tensin de la red disponible. Si se cumplen estas condiciones, el aparato est apto para el servicio tras enchufar el conector de la red. En caso contrario, no est garantizado el servicio seguro o el aparato se puede daar.Tienen que cumplirse las condiciones del entorno indicadas en los datos tcnicos.La copa de trituracin, se destornilla y extrae girndola en el sentido de las agujas del reloj. La parte de accionamiento puede colocarse sobre el aro de proteccin. La copa de trituracin se llena con el material adecuado para moler. Es imprescindible tener en cuenta la altura de llenado mxima hasta el borde inferior de la copa de trituraci. Una cantidad de llenado superior conduce a una perturbacin en su funcionamiento y el molino queda sobrecargado. La cantidad de llenado puede desmenuzarse hasta el anlisis de entrada, es decir, tambin son posibles unas cantidades mnimas.IndicacinLas cantidades mnimas de llenado (p.ej. slo el 50 - 80% de la cantidad de llenado mxima) se pueden desmenuzar con ms rapidez, la finura final es superior, el espectro del tamao de granos es inferior y el calentamiento del material molido inferior. Una cantidad de material superior para moler debera desmenuzarse mejor en dos o tres porciones.El tiempo de desmenuzado efectivo apenas es ms largo, pero el resultado del molido es considerablemente mejor. El material voluminoso para moler, puede llenarse tambin a travs del borde inferior de la copa de trituracin, pero, como mximo, hasta aprox. 10 mm por debajo del borde de la copa de trituracin. Montando el accionamiento, el material suelto para moler es desplazado hacia la zona del molido.La copa de trituracin llena se atornilla en el accionamiento hasta el tope (justo delante del tope se puede or un suave clic). Una vez establecido el suministro de la tensin, se podr iniciar la operacin del molido.La campana se coge con una mano y con el dedo pulgar se pulsa la tecla On/Off y se pone en marcha el molino. Presionando ligera y lentamente hacia abajo el accionamiento en direccin de la presin axial, se lleva la herramienta de desmenuzar al material para moler (presionando por un solo lado, puede quedar ladeado el accionamiento, lo que tendra como consecuencia un desgaste prematuro de la junta del rbol). Una vez el material para moler haya sido cogido por la herramienta de des- menuzar, se reducir el nmero de revolucione.Esto se puede or por la reduccin del nmero de revoluciones. Cuando la misma es muy fuerte, ser necesario acelerar el accionamiento para poder volver a sumergirse de nuevo en el material para moler con el nmero nominal de revoluciones. Segn el material para moler, esto ha de repetirse eventualmente varias veces. Si el nmero de revoluciones permanece relativamente constante durante la desaceleracin y aceleracin, que- dar concluida la operacin del molido.No debera sobrepasarse una duracin del molido de 30 segundos, ya que el desmenuzado del material no se mejora con ello, pero aumentar considerablemente el calentamiento.El equipo est diseado para un funcionamiento a corto plazo (KB) La duracin mxima de encendido es de 1 minuto, mientras que la duracin mnima de apagado es de 20 minutos. Si se alarga el tiempo de encendido o se acorta el tiempo de apagado, esto puede producir un sobrecalentamiento del motor y, en consecuencia, una desconexin del apartado (consulte el apartado dedicado a la deteccin y solucin de averas) El aparato se encuentra asegurado de tal modo, que la no observacin del funcionamiento KB no provoca una destruccin del aparato.Antes de concluir la operacin del molido, el accionamiento debera subirse del todo hacia arriba y slo entonces ha de soltarse la tecla On/Off. Esto tiene la ventaja de que la herramienta de desmenuzar se limpia automticamente ella misma.Destornille la copa de trituracin slo con la parada del motor. El material molido eventualmente adherido al aro de proteccin puede extraerse con un pincel para limpiar o un cepillo del aro de proteccin y dejarse en la copa de trituracin (no emplear cepillo metlico). Si entra polvo de molienda en la cmara intermedia, ste deber retirarse antes de una nueva puesta en marcha (consulte el captulo dedicado a las operaciones de mantenimiento y limpieza).Atencin: Las herramientas de moler, la copa de trituracin y el rbol del tubo pueden estar calientes. Tenga presente las instrucciones de seguridad.Rotavapor o Evaporador rotatorioIndicaciones Verificar que el rotavapor est conectado Verificar el funcionamiento de la motobomba, utilizada para generar el vaco en el sistema del rotavapor. Verificar los niveles del agua del bao termostatado. Este bao debe ser llenado con agua destilada. Verificar que la llave de nivelacin de presin este correctamente lubricada. Verificar las conexiones de entrada y salida del agua de refrigeracin. Verificar que la muestra est en un baln de vidrio con boca esmerilada de tamao adecuado con respecto al volumen de la muestra. Adicionalmente hay que verificar que la boca esmerilada del baln acopl correctamente con el rotavapor o que exista la adaptacin que permita el acople del baln al rotavapor.PRECAUCION: Para estos equipos solo se utiliza material de vidrio con bocas esmeriladas que resistan el vaco, no todo el material de vidrio del laboratorio es apto para trabajar bajo vaco. No hacer adaptaciones de corchos.Procedimiento para el secado de muestras1. Encender la bomba de vaco y verificar la recirculacin del agua en la bomba.2. Abrir la llave del agua verificando que esta circule correctamente en el espiral del refrigerante. El agua que sale del refrigerante DEBE caer en el balde de recirculacin del agua, con el fin de refrigerar la motobomba.3. Encender el rotavapor (sistema de rotacin y bao termostatado).4. Precalentar a la temperatura necesaria el bao termostatado. La temperatura deber ajustarse de acuerdo al tipo de solvente a evaporar, buscando la menor temperatura necesaria para evaporar el solvente de la muestra y obtener el mximo de recuperacin posible.Como ejemplo se presentan las temperaturas necesarias para retirar agua, etanol y metanol en las condiciones de trabajo de la Subdireccin Cientfica (vacio mximo producido por la motobomba)5. Con la llave de nivelacin de presin abierta, colocar el baln con la muestra y sujetarlo con las pinzas.6. Se sumerge el baln girando en el bao termostatdo7. Poner a girar la muestra con el control de rotacin8. Cerrar la llave de nivelacin de presin.9. Esperar hasta que el solvente haya sido completamente removido por evaporacin a presin reducida.Una vez se ha secado la muestra, para desmontar el baln del sistema10. Se para la rotacin del sistema.11. Se eleva el sistema para retirar el baln del calentamiento12. Se libera la presin abriendo la llave de nivelacin.13. Una vez se han nivelado las presiones se puede apagar la motobomba.14. Se retiran las pinzas y el baln de la muestra15. Si no se va a utilizar ms, se cierra el agua, se apaga el bao termostatado y el sistema de rotacin.16. Si se va a continuar utilizando se realiza el montaje de la nueva muestra siguiendo las instrucciones de este documento desde el numeral 5 hasta finalizar de concentrar la muestra.17. Una vez terminado el trabajo en este equipo se desconecta de la toma de corriente.ATENCINSI SE APAGA LA MOTOBOMBA ANTES DE NIVELAR LAS PRESIONES, EL VACIO DEL SISTEMA HAR QUE EL AGUA DEL BALDE DE RECIRCULACIN PASE AL BALON DE MUESTRAS Y DE ESTA MANERA PERDER EL TIEMPO INVERTIDO EN LA CONCENTRACIN Y POSIBLEMENTE LA MUESTRA

Mtodo de MaceracinLa maceracin es un proceso de extraccin slido-lquido. El producto slido (materia prima) posee una serie de compuestos solubles en el lquido extractante que son los que se pretende extraer. En general en la industria qumica se suele hablar de extracciones, mientras que cuando se trata de alimentos, hierbas y otros productos para consumo humano se emplea el trmino maceracin. En este caso el agente extractante (la fase lquida) suele ser agua, pero tambin se emplean otros lquidos como vinagre, jugos, alcoholes o aceites aderezados con diversos ingredientes que modificarn las propiedades de extraccin del medio lquido.A veces el producto obtenido es el extracto propiamente dicho y otras el slido sin los citados compuestos o incluso ambas partes, por ejemplo si extraemos cafena del caf, podemos emplear el caf descafeinado para hacer una infusin tradicional y la cafena para la confeccin de refrescos u otros usos.La naturaleza de los compuestos extrados depende de la materia prima empleada as como del lquido de maceracin. En los casos en que se utilice el producto extrado se suele emplear una etapa de secado bien al sol, con calor o incluso una liofilizacin.En herboristera, es decir el arte en el cual se utilizan las plantas medicinales y hierbas para curar o preparar diversos productos, se utiliza mucho este mtodo.Tipos de maceracinExisten, bsicamente, dos tipos de maceracin: Maceracin en froConsiste en sumergir el producto a macerar en un lquido y dejarlo una determinada cantidad de tiempo, para transmitir al lquido caractersticas del producto macerado. Los productos a macerar son varios, y en la gastronoma se puede destacar la infusin de especies varias en aceite de oliva virgen extra, concediendo a estos ltimos aromas y paladares propios de las especies maceradas. Son especialmente recomendados para ensaladas y platos fros.Tambin se podr aadir a un recipiente con la menor cantidad de agua posible, slo lo suficiente como para cubrir totalmente lo que se desea macerar. Esto se hace por un lapso ms o menos largo, dependiendo de lo que se vaya a macerar.La ventaja de la maceracin en fro consiste en que al ser slo con agua se logran extraer todas las propiedades de lo que se macera, es decir, toda su esencia sin alterarla en lo ms mnimo. Maceracin con calorEl proceso a ejecutar en este tipo de maceracin es el mismo que en la maceracin en fro, slo que en este caso puede variar el medio por el cual se logra la maceracin. El tiempo que se desea macerar vara mucho de la maceracin en fro ya que al utilizar calor se acelera el proceso tomando como referencia que 3 meses de maceracin en fro, es igual a 2 semanas en maceracin con calor, esto es en el caso de las plantas y hierbas medicinales.La desventaja de la maceracin en calor es que no logra extraer totalmente pura la esencia del producto a macerar, ya que siempre quema o destruye alguna pequea parte de esta (muchas veces se trata de compuestos termolbiles).Pero muchas veces, para acortar ms los tiempos de extraccin y que las substancias pasen el menor tiempo posible a elevadas temperaturas, se hacen extracciones con corriente de vapor.CATEGORA MDICAAblandamiento de un slido por imbibicin. Ablandamiento de un tejido anormal por traumatismos repetidos o por imbibicin en agua o en otros lquidos como el feto muerto retenido en el tero.

Filtracin al vaco con embudo bchner

Fundamento: la fuerza impulsora para que el lquido atraviese el filtro es la que ejerce la presin atmosfrica cuando aplicamos el vaco al sistema. Es el mtodo ms rpido y a veces permite la filtracin de aquellas suspensiones en las que la fuerza de gravedad no es suficiente para el proceso.Utilidad: separar un slido de un lquido, cuando lo que se quiere recuperar es el slido. Ofrece una menor superficie de filtracin para recoger mejor el slido. El hecho de aplicar la succin con vaco permite acelerar la velocidad de filtracin.Un ejemplo de aplicacin de este proceso es la separacin del agente desecante de una disolucin orgnica. En este caso, es necesario tener cuidado de que el sistema de vaco no succione parte del lquido filtrado o facilite la evaporacin del disolvente durante el proceso.