Post on 30-Sep-2018
OBJETIVOS
u Diferenciar entre ciertos tipos de medios
u Conocer actividades bioquímicas de las bacterias
u Conocer los procesos bioquímicos de fermentación
u Descibir los patrones de fermentación de carbohidratos de algunas bacterias y como algunos patrones resultan en producción de un ácido o de un ácido y un gas.
¿QUÉ CONTIENE UN MEDIO? Aquellos requerimientos nutricionales que los microorganismos necesitan
para crecer. Depende del ambiente en donde viven.
Algunos Requerimientos nutricionales: Carbono (C) Nitrógeno (N) Elementos no metálicos: § azufre (S) y fósforo (P)
Elementos metálicos: § Ca++, Na++, K+, Cu++, Mg++, Mn++, Fe+2,+3 y trazas de Zn++
Vitaminas H20
Factores físicos que afectan el crecimiento Temperatura pH § ** ambas afectan las actividades enzimáticas Disponibilidad de oxígeno § oxígeno atmosférico
§ Formación de ATP § fermentación anaerobia
MEDIOS DE CULTIVO
Clasificación:
1. Físicamente Medio %Agar Ejemplo
Líquido 0 Caldo Nutritivo Semisólido 0.5 a 1 Medio Movilidad Sólido 1.5 a 2 Agar Nutritivo
2. Químicamente Definido o Sintético: Composición quím. definida (Sales) Complejo o no Sintético: Composición quím. difícil de definir
(Peptona, Extracto de levadura,etc).
3. Uso § Líquido (caldo):
§ Crecimiento gran # microorganismos § Estudios fermentación
§ Semisólido: § Crecimiento anaerobio (fermentación) § Motilidad
§ Sólido: § Crecimiento superficial § Cultivo puro (transferencia)
3. Uso § Líquido (caldo):
§ Crecimiento gran # microorganismos § Estudios fermentación
§ Semisólido: § Crecimiento anaerobio (fermentación) § Motilidad
§ Sólido: § Crecimiento superficial § Cultivo puro (transferencia)
TIPOS DE MEDIOS
Selectivo: § Para aislar un grupo de bacteria específico.
Se incorporan sustancias químicas que ayudan al crecimiento de cierto organismo e inhiben el crecimiento de otros grupos de bacterias.
DIFERENCIAL
§ Distinguir entre grupos de organismos relacionados tanto morfológica como bioquímicamente.
Se le incorporan compuestos químicos que producen un cambio característico en el crecimiento de la bacteria y sus alrededores
ENRIQUECIDO
§ Posee características nutricionales específicas para estimular la producción de algún componente.
Staphylococcus spp.
Eosin Methylene Blue Agar
MacConkey Agar ( Selectivo y diferencial)
Bacilos entéricos Gram negativos
No fermentadores de lactosa (izq) fermentadores de lactosa (der)
Hemolisis Beta, Alfa y Gamma (observar propiedades hemolíticas)
Blood Agar
FERMENTACIÓN
Son reacciones bioquímicas que producen energía en la cual moléculas orgánicas sirven como aceptadores o donadores de electrones.
v La habilidad de un organismo fermentar carbohidratos ayuda a la caracterización .
v Un carbohidrato puede ser fermentado a numerosos productos dependiendo el organismo que este envuelto.
v Los productos finales son característicos para ciertos grupos de bacterias v Alcoholes v Acidos v Gases v Otras moléculas orgánicas
DSMINUCION DE PH Si bacterias fermentadoras crecen en un medio de cultivo líquido conteniendo
glucosa , pueden producir ácidos orgánicos como intermedarios de la fermentación.
v Estos ácidos son liberados en el medio y bajan el pH.
v Indicadores de pH como rojo fenol o azul de bromocresol pueden ser incluidos en el medio (Cambio de medio de su color original a amarillo)
PRODUCCIÓN DE GAS
Gases prodcidos durante un proceso pueden ser detectados usando pequeños tubos invertidos llamados tubos Durham( Edward Durham,bacteriólogo) dentro del medio de cultivo.
v Si gas es producido , el medio líquido dentro del tubo Durham será desplazado, entrando el gas en forma de una burbuja.
ENZIMA B- GALACTOSIDASA
Enzima para el metabolismo de la lactosa
Lactosa -----Galactosa y glucosa
E. COLI
• Es un anaerobio facultativo
• Bacilo Gran negativo
• Produce ácido y gas catabolizando glucosa y otros carbohidratos.
• β-galactosidasa positiva y puede usar lactosa como única fuente de carbono
PARTE EXPERIMENTAL
Seleccionar bacterias
Inocular en tubos con diferentes azúcares (glucosa, sucrosa y lactosa)
Observar bacteria a las 2 horas, 4 horas y 24 horas.
Anotar observaciones y comparar los resultados con la literatura.