Post on 08-Oct-2018
NUEVOS MARCADORES Y NO TAN NUEVOS EN INMUNOHISTOQUIMICA
DRA. ALEJANDRA ZARATE OSORNOHOSPITAL ESPAÑOL DE MEXICO
OCTUBRE 2017
INMUNOHISTOQUIMICA, REGLAS• La IHQ se integra, NO REEMPLAZA a la
morfología• NO HAY UN ANTICUERPO ESPECIFICO de una
entidad• Se deben de solicitar perfiles (varios
anticuerpos) deben INCLUIR AL MENOS UN ANTICUERPO NEGATIVO
• Sitio de reacción– Filamentos intermedios– Antígenos nucleares– Marcadores de organelos– Antígenos membranosos
FILAMENTOS INTERMEDIOS
• Citoqueratinas• Vimentina• Proteína ácida
fibrilar glial• Actina de músculo
liso• Desmina• H-caldesmon
CK
Desmina
ANTÍGENOS NUCLEARES
• Proteínas relacionadas con el ciclo celular (Ki-67)
• Factores de transcripción nuclear (TTF-1, CDX-2, PAX-8, SAT-B2)
• Productos de genes supresores de tumor (p53)
• Enzimas nucleares (TdT, MLH-1, PMS-2)
• Receptores de hormonas esteroides (RE, RP)
• Proteínas que se unen al Ca (S-100)• Virus (HSV, CMV, etc)
CDX2
TdT
MARCADORES ESPECÍFICOS DE ORGANELOS
• Gp100 (HMB-45): premelanosomas
• vWf: – cuerpos de Weibel-Palade
• CD68, lisozima: – lisosomas
• Proteína mitocondriales:– bcl-2
• Gránulos citotóxicos: – TIA-1, granzima B,
perforina• Gránulos de centro denso:
– cromogranina A– sinaptofisina
Bcl-2
Sinaptofisina
ANTÍGENOS MEMBRANOSOS
• Moléculas de adhesión celular (e-caderina) y al citoesqueleto (B-catenina)
• Receptores de transmembrana (HER-2, EGFR)
• Antígenos de los leucocitos
CD20
CD56
INTERPRETACION DE IHQ
Casisiempre
positivo
Usualmente positivo
No contributoria
Usualmente negativo
Casi siempre negativo
Dr. Allen GownPhenopath LaboratoriesSeattle, Washington
MARCADORES DE USO RECIENTE
• Tracto digestivo: CDX-2, Villina, SAT-B2 y HER-2– Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-2, MSH-6
y PMS-2• Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3• Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40• Células germinales: OCT-4, SALL4, Glipican 3• Varios: GATA-3, PAX-8• Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2• Sistema Nervioso Central: IDH1, IDH2, ATRX y 1p/19Q• Linfomas: c-myc
CK20
Villina
CDX-2
SAT-B2
• Proteína 2 especial rica en AT• Special AT-rich sequencial binding protein-2• Células epiteliales glandulares de TGI inferior• Preservada en neoplasias colorectales• Altamente sensible y específico (85%)• Con CK20: 95%
SAT-B2 CDX-2
HER-2 IN GASTRIC CANCER
Path Case Rev 2014;19:245-251
HER-2 EN ADENOCARCINOMA GASTRICOCRITERIOS PARA LA INTERPRETACION DEL c-erbB-2 EN CANCER GASTRICO
Calificación Especimen quirúrgico-patrón detinción
Biopsia-patrón de tinción Sobreexpresión
0 Sin reactividad o reactividadmembranosa en menos del 10%de las células
Sin reactividad en ninguna de lascélulas
Negativo
1+ Reactividad membranosaincompleta débilmenteperceptible en >10% de las células
Un grupo de células neoplásicas conreactividad membranosa incompleta,débilmente perceptible, independientedel porcentaje
Negativo
2+ Reactividad membranosacompleta débil a moderada,basolateral o lateral en >10% delas células
Un grupo de células neoplásicas conreactividad membranosa completa,débil a moderada, lateral o basolateral,independiente del porcentaje
Equívoco
3+ Reactividad membranosacompleta, fuerte, basolateral olateral en >10% de las células
Un grupo de células neoplásicas conreactividad membranosa completa yfuerte, lateral o basolateral,independiente del porcentaje
Positivo
Rüschoff J, Hanna W, Bilous M y cols. HER2 testing in gastric cancer: a practical approach. Modern Pathology 2012;25:637-650.
HER-2
CK 7
CK 20
MMR INESTABILIDAD DE MICROSATELITES
• Detección por IHQ de MMR: – MLH-1, MSH-2, MSH-6 y PMS-2
• Todas se expresan en todos los tejidos• MSH2-MLH1 son los constituyentes
dominantes de sus pares respectivos (MSH6 y PMS2)
• 90% de casos de síndrome de Lynch por IHQ
MLH1
PMS2
MSH2
MSH6
CARCINOMA HEPATOCELULARMEJORES MARCADORES
• Hep-Par1• Arginasa-1• CEA+, CD10+ en
canalículos biliares• CK 7 y 20 negativos• MOC 31 negativo
(Am J Surg Pathol 2010;34:1147–1154)
ARGINASA-1
• Antígeno específico de los hepatocitos
• Sintetasa fosfato-carbamoil del ciclo de la urea
• Expresión citoplásmica difusa – normal y neoplásico
• Sensibilidad y especificidad > 90%
Arginasa-1 HepPar-1
CEA pc CD10
GLIPICAN 3Proteoglicanos heparan-sulfato• Embrión:
– Crecimiento celular– Diferenciación– Migración
• TEJIDOS ADULTOS: CELULAS NEOPLASICAS– Hepatocarcinoma– Melanoma– Tumor de senos endodérmicos– Carcinoma ovárico
endometrioide y células claras– Ca de células de Merkel
• Focal a difuso, débil a fuerte
• Expresión en hepatocitos: evolución a procesos malignos
MARCADORES DE CANCER PULMONARNAPSIN-A
• CK 7 y TTF-1• NAPSIN-A
– Novel AsparticProteinases of thePepsin Family
– Más sensible y específico que TTF-1
– Tinción citoplásmicagranular
– Positivo en:• Tumores renales• Ca células claras ovario• Macrófagos
(Adv Anat Pathol 2012;19:66–73)
NAPSIN-A
• Pulmón y riñones• Expresión
regulada por TTF-1• Neumocitos
alveolares tipo II• Negativos:
– Neuroendocrinos– Mmucinoso– Células pequeñas – Escamoso
CK 5/6
P40
ALK Y CARCINOMA DE PULMON DE CELULAS NO PEQUEÑAS
PDL-1 EN CARCINOMA DE PULMON
PDL-1 IHQ
PhenopathLaboratories, Seattle WA
PDL-1
Ca Imm Res 2016
MARCADORES DE USO RECIENTE
• Tracto digestivo: CDX-2 y Villina, HER-2• Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40,
PDL-1• Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3• Células germinales: OCT-4, SALL4, Glipican 3• Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2• Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2• Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-
2, MSH-6 y PMS-2
MARCADORES DE USO RECIENTE
• Tracto digestivo: CDX-2, SAT-B2 y Villina, HER-2
• Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40• Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3• Células germinales: OCT-3/4, SALL4, Glipican
3• Varios: PAX-8• Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2• Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2• Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-
2 MSH-6 y PMS-2
MARCADORES DE USO RECIENTE
• Tracto digestivo: CDX-2 y Villina, HER-2• Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40• Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3• Células germinales: OCT-4, SALL4, Glipican 3• Varios: PAX-8• Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2• Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2• Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-
2, MSH-6 y PMS-2
TUMORES DE CELULAS GERMINALESOCT-4, SALL4 y GLIPICAN 3
• OCT-4 – FT expresado en células madre y germinales– Muy sensible y específico
• SALL 4– FT, cromosoma 20– Circuito regulatorio con OCT3-4– pluripotencia de células primitivas embrionarias– Todos los tumores de células germinales
• Glipican 3– Tumor de senos endodérmicos– Hepatocarcinomas
SALL-4 CK AE1/3 CD30
CKAE1/3Glipican 3 AFT
TUMORES DE CELULAS GERMINALES
OCT-3/4 SALL 4 CD30 CK AE1/3 Glipican 3 CD117 PLAP
Disgerminoma/Seminoma
+ + - -/+ - +/- +/-
Ca Embrionario + + + + - - +Saco Vitelino - + - + + - -Coriocarcinoma - + - + - - -Teratoma - + - + - - -Neoplasia Intratubular
-/+ + - - - +/- +/-
GATA-3• Factor de transcripción• Familia G-A-T-A
– Urotelio– Ductos mamarios– Mucosa escamosa– Linfocitos T– Ca renal cromófobo– Mesoteliomas– Epitelio escamoso– Páncreas
GATA 3
MARCADORES DE USO RECIENTE
• Tracto digestivo: CDX-2 y Villina, HER-2• Pulmón: TTF-1 y Napsin-A, proteína p40• Hígado: HepPar-1, Arginasa 1 y Glipican 3• Células germinales: OCT-1, SALL3, Glipican 3• Varios: PAX-8• Sarcomas: MUC4, DOG-1, INI1, IDH-1 Y IDH-2• Sistema Nervioso Central: IDH1 y IDH2• Inestabilidad de microsatélites: MLH-1, MSH-
2, MSH-6 y PMS-2
INI-1• INI1: miembro del complejo remodelante multi-
subunidad de cromatina SWI/SNF• Brazo largo del cromosoma 22• Expresión nuclear en todos los tejidos y células
normales (control interno positivo)• Inactivación:
– Tumores rabdoides malignos de la infancia (renal y SNC) – Sarcoma epitelioide– Tumor fibromixoide osificante de partes blandas – Ca mioepitelial de partes blandas– Propensión a citomorfología rabdoide
(Am J Surg Pathol 2011;35:e47–e63)
TUMOR RABDOIDE MALIGNO
SARCOMA EPITELIOIDEINI1
Modern Pathology (2005) 18, 951–958.
Beta-catenina• Adhesión y signalización• Fibromatosis:
– Mutación en la vía APC/beta catenina
• Acumulación nuclear anormal – Fibromatosis mesentérica– GIST– Mesenteritis
esclerosante
B-catenina nuclearTUMORES POSITIVOS
• Fibromatosis de tipo desmoide
• Tumor fibroso solitario• Sarcoma del estroma
endometrial• Sarcoma sinovial• Tumores epiteliales
– Adenocarcinoma colorrectal– Adenocarcinoma
endometrial– Carcinoma pancréatico sólido
pseudopapilar
CK 7 TLE-1
SARCOMA SINOVIAL: FISH t(X;18)
MUC-4 SARCOMA FIBROMIXOIDE DE BAJO GRADO
MUC4
AEM CD34
AML
TUMOR MIOFIBROBLASTICO INFLAMATORIO
AML
AEM ALK
SISTEMA NERVIOSO CENTRAL
• IDH• ATR-X• Deleción 1p/19q• Proteína p53• Ki-67
IDH-1 Mutación gen isocitrato
deshidrgenasa-1 dependientede NADP+ Citoplasma y núcleo (débil) 70-80% OMS II-III 50-80% GBM secundarios 5% GBM primarios
Rara/ausente en niños Oligodendrogliomas:
asociación con codeleción(1p/19q)
Mejor pronóstico Ausencia no excluye glioma Adv Anat
Pathol2012;19:239-49
Adv AnatPathol2015;22:50-58
ATR-X
• Proteína mutada en algunos gliomas• Alfa talasemia/síndrome de retraso mental
ligada a X• Deficiencia/pérdida/mutación
– Crecimiento rápido– Inestabilidad genética– Más susceptibles a tratamiento (Rx y CHO)
• Mutuamente excluyentes con la deleción1p/19q
OLIGODENDROGLIOMA DELECION 1p/19q
C-myc y linfomas
FISH PARA C-MYC
FISH PARA C-MYC
MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION
MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCION