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4/21/2017
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College of Veterinary MedicinePoultry Research and Diagnostic Laboratory
Enfermedad de Gumboro en el Radar Sanitario
Alejandro Banda MVZ, MCV, PhD, Dipl. ACPV, Dipl. ACVM
Bolsa de Fabricio
• Organo linfoide primario
• Linfocitos B se diferencian a partir de células madre
• Linfocitos adquieren receptores
• Genera diversidad en células productoras de anticuerpos
• Por presión negativa diversosantígenos llegan al lumen bursal
Folículo linfoide sano Desarrollo de la bolsa
• Fase de crecimiento durante las primeras tres semanas
• Etapa de meseta “plateau” entre la cuarta y octava
• Alcanza maximo desarrollo entre las 8 to 10 semanas
• Inicia una involución y practicamente desaparecealrededor de la madurez sexual
El virus de Gumboro
El virus de la Enfermedad Infecciosa de la Bolsa o de Gumboro…
• Avibirnavirus
• Virus inmunodepresor
• Replicación en la bolsa de Fabricio
• Destrucción de linfocitos• Necrosis• Apoptosis
• Atrofia bursal
• Dos presentaciones clínicas
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Partícula Viral del Virus de Gumboro
VP2
VP3
VP1
dsRNA
Existen diferentes tipos de cepas
Serotipo 1ImportanciaClínica
Serotipo 2
Estandar o clásicasEstandar o clásicas
VariantesAntigénicasTipo Delaware
VariantesAntigénicasTipo Delaware
Patogenicidad• Leve• Intermedia• Virulentas• Muy virulentas•Immunodepresión
Enfermedad Subclínicacon inmunodepresión
Otros tipos deVariantesOtros tipos deVariantes
10
B69R63
8
D78Estándar
44A1
Del. EVariante
8
R63
44A1
BK9
67
RS593
8
67
GLSVariante
8
44A1
1057
Antígenos del Virus (Snyder) Organización del Genoma
VP1
VP2
VP5
VP4 VP3
Hypervariable Region
Forma subclínica de Gumboro
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Gumboro muy Virulento
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4
ven-6ven-9ven-8ven-7
DV-86 HolandaOKYM Japón89163 Francia
MYGA-97UPM9204 MalasiaHK-46 Hong KongUK-661 Reino UnidoHarbin-1 China
JRa EspañaIpumirim-BR
SM-BRJNeto-BR
BR-3BR-7BR-2BR-6BR-1
BR-4BR-5
DR-2DR-3
DR-1DR-5
N6 NigeriaBD3/99 Bangladesh
Uy-5Uy-3Uy-4Uy-6Uy-1Uy-2
LD9569849VB Bélgica
F52/70 Reino UnidoOhio EUA
VENEZUELA
BRASIL
REP. DOMINICANA
URUGUAY
CUBA
ARGENTINA
Relación Genética entre Cepas Muy Virulentas del Virus de GumboroVirus Latinoamericanos y de Referencia
Serotipo 2
Cepas de Gumboro presentes enColombia
Tipificación por RT-PCR/RFLPLatinoamérica
ColombiaSimilar Delaware E
EcuadorSimilar Delaware E
Sin clasif.
PerúDelaware ADelaware E
Similar Del EPBG‐98
Similar STC
Rep. DominicanaUK‐661Delaware E
VenezuelaGLSLukertEdgarSimilar Delaware E
BrasilUK‐661849 VBEdgar
MéxicoLukertEdgarSTC
CU‐1Sin clasif.
DR3
DR-1DR-5
N6 NigeriaBD/399 Bangladesh
Uy-5Uy-1
Uy-3
Uy-6LD9569
MYGA97
HK46 Hong Kongven-9
ven-6ven-7
UK661 Reino UnidoJRa España
Ipumirim-BRSM-BR
BR-3BR-1
JNeto-BRBR-5
849VB Bélgica52/70 Reino UnidoI241A33
ven-4ven-5
Edgar EUAS001MX7997Lukert EUA
MX7504MorMta
Ven-3GLS EUA
EC-3Var-A EUA
Col143-44
850 Var-E EUA
9865 LD305
Prezoto-BRS002
P30903Candioto-BR
Giacomini-BRMX7499
B4-3MXC-278
Ohio EUA
Rep. Dominicana
Uruguay
Cuba
Venezuela
Argentina
Brasil
Argentina
VenezuelaArgentina
México
Venezuela
Ecuador
Colombia
México
Argentina
Brasil
Clásicas o Estándar
Variantes tipo Delaware
Virus de Alta Virulencia
SinClasificación
Serotipo 2
Virus detectados
No. Muestras
Muy virulentos 15
Variantes 12
Vacunales 2
Negativas 3
Proyecto Universidad de Georgia – FENAVI: Relación de Muestras analizadas
Muy virulentas
Variantes
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Molecular characterization of infectious bursal disease virus in diagnostic cases in Latin America in 2010
TMC Barbosa, E Turpin, R Verdi, M TamayoPublished on: 10/20/2011
646317646417CorDQ916187TDQ916186T646317CorDQ916188T294307Std152724Ces132611561Cun132612021Cons132612017Std
UK661849VB
52702512132612115Boy
Edgar2LukertCC
DQ916181TGLS
VarA1084E
VarE8903
11153JX429995T
DQ916185TDQ916183T
502018HuiDQ916184T
132611797Cons132611798Cun
D78JX429996TDQ916182T
132612112Cun132612194
Ohio96
97
97
99
92
75
90
6975
94
99
454629
68
35
37
56
76
3527
17
13
9795
6580
67
52
0 02
Cepas muy virulentas
Cepas estándar
Cepas Tipo Delaware
Otros subtipos
Cepas de Gumboro presentes enlos Estados Unidos
AR112AR113
11153MS218MS219
9865PMS202
MS203VA269AR84
CA26AR265GA36GA205
NC171AL186
GA19813435
AR280849
625GA213
853GA129
DE104DE190
VA270NC111
AR272MN263
89/03 Vacc
NC1871084E Vacc
Delaware E
GA234619
850SC166
Group6U‐28
16290GA148
GA151NC224
MO195MO196
MO44WI236
WI240Delaware A
9109NC151588616151
LukertAR266GA211
Ohio
Phylogenetic Analysis U.S. IBD field viruses
Delaware Type
Standard Strains
P09936
P091356P3S6
P091356P1S2
P101235
P101233
P094058Kd
P091355P2D6
P087183
P087184
P086780
P086814
11153
P091706Gb
P091706JS
P10103
9865
P092481P2PV
P094057Kd
P094056Kd
P094059Kd
P094328Kd
P09502
P091707Sm
89/03 Vaccine Strain
850
U28
P091707McG
1084E Vaccine Strain
P091707Pk
P1014763
P1014764
P1014765A
P101476V6
Delaware E
GLS
Delaware A
9109
UK661
Bursine 2 Vaccine
Lukert
Ohio
99
0.05
Standard(Classic)Strains
DelawareType
Viruses
Phylogenetic Analysis Mississippi IBD field viruses(2008 ‐ 2010)
GM KY
JR KY
SF KY
DH KY
PA KY
SD KY
EJH KY
DK KY
PF TN
JL GA
KO TN
SF GA
GA GA
HF GA
EW GA
CL TN
TL TN
CR GA
GR GA
CC TN
GC TN
RH2 TN
CR TN
RH TN
BW KY
CM KY
TC KY
RS TN
Delaware E (X54858)
Vaccine 89/03 (AF498629)
Vaccine 1084E (AF498628)
LH GA
TF GA
GW FL
HG KY
SH FL
TW KY
CR KY
JB KY
GLS (AAA52086)
Delaware A (M64285)
UK661, Very virulent IBDV (X92760)
Edgar (AY095229)
Lukert (AY095230)
Ohio Serotype 2 (AY095231)
91
99
99
99
55
99
97
87
11
72
6946
62
75
22
81
5369
90
35
32
53
13
42
35
34
45
39
67
34
28
46
31
58
59
19
28
0.05
B
A
C
Variantes Delaware E
Cepas Estandard
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Metodologías de Diagnóstico
Análisis Histopatológico
• Evolución de lesiones biencaracterizada
• Provee información acercade cuando ocurrió la infección
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Títulos ELISA mediante estuche IBD‐XR y coeficientesde variación
8700
6536 6745
1289913680
14685
11696 11853 11849 11700
12795
10987
11670
0
2000
4000
6000
8000
10000
12000
14000
16000
1d (994 flks)
5‐9w (163 flks)
10‐14 w (204 flks)
15‐19w (312 flks)
20‐24w (229 flks)
25‐29w (339 flks)
30‐34w (234 flks)
35‐39w (158 flks)
40‐44w (233 flks)
45‐49w (177 flks)
50‐54w (323 flks)
55‐59w (189 flks)
60+w (151 flks)
CV 39 52 46 28 24 18 26 26 27 25 22 27 26
ELISA GMT Titers
397
Sept 2012‐Sept 2014
Titulos ELISA en pollo de engorde mediante estucheIBD‐XR y coeficientes de variación por edad
6431
4952
3213
810 807
4906
6093
7023
9274 9406
0
1000
2000
3000
4000
5000
6000
7000
8000
9000
10000
1d (634 flks)
2‐6d (4 flks)
7‐13d (29 flks)
14‐20d (20 flks)
21‐27d (26
flks)
28‐34d (50
flks)
35‐41d (142 flks)
42‐48d (151 flks)
49‐55d (37
flks)
56+d
(103 flks)
CV 42 53 55 62 84 59 52 46 31 33
ELISA G
MT Titers
397
Sept 2012‐Sept 2014
Tarjetas FTA
• Impronta sobre matrix de la tarjeta
• Agentes microbianos son inactivados porquímico y ácidos nucleicos se estabilizan
• Se pueden enviar a temperature ambiente sin clasificación como Patogeno Vivo por la IATA
• Se require de un permiso por el Depto. De Agricultura para su ingreso o envío a los EstadosUnidos
Vacunación…
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Vacunas vivas atenuadas
• Son atenuadas por pasaje seriado en cultivo de tejidos, huevosembrionados
• Inducen respuesta immune similar a la inducida pot el virus de campo
• Vacunas con virus estándar o tipo Delaware
• Suaves, intermedias y “caliente“
• Pueden inducir Reacción Postvacunal severa en la bolsa con inmunodepresión
Algunas Cepas Vacunales
Vacuna Tipo Cepa
Bursine Mild Lukert
Bursine 2 Intermediate Lukert
Bursine plus Intermediate “plus” Lukert
Bursa‐ Vac Hot classic Moulthrop
Bursa‐ Vac 3 Mild intermediate Eidson ST‐28
Bursa‐ Vac 4 Delaware var E Mild 1084E
Univax‐BD Mild intermediate St‐12
PBG‐98 Mild Classic Baxendale
Algunas Cepas Vacunales
Vacuna Tipo Cepa
Univax Plus Intermediate Classic St‐12 + C‐4
Bursa Blen M Mild Classic 2512
IBD Blen Intermediate Plus 2512
89 / 03 Inter. Delaware E 89 / 03 Var E
Clonevac D‐78 Mild intermediate Clone D‐78
Primevac IBD‐3 Inter. Plus + Del Var Std + GLS
S‐706 Inter. Classic S‐706
SVS‐510 Inter Del. Var. S‐706 + 1084A Gene VP2
VP2VP5
VP4 VP3
Plásmido con gene
VP2
Plásmidos con genes de HVT Virus de Gumboro
HVT RecombinanteLinea celular
permisible
Como desarrollar una vacuna recombinante
HVT como vector• No sufre interferencia con anticuerpos maternos
• Protección completa contra Gumboro puede tardar de 3 to 4 semanas
• rHVT no se disemina por vía horizontal
• Puede combinarse con SB1 o Rispens (CVI988) en zonas de alto desafío
• Procdimientos de reconstitución y dilución son críticos
• Existe dos tipos de vacunas rHVT• Cepa Faragher• Delaware E
La experiencia colombiana
• Dr. Luis Alberto Botero H.
• Compañía localizada en una area con pollo de engorda, aves de postura y reproductoras
• Presencia de cepas muy virulentas y variantes tipo Delaware
• Otras enfermedades: Newcastle, bronquitis infecciosa, pneumovirus, ILT, fowl pox, mycoplasma, Pasteurella, Bordetella, infectious coriza
• Presencia de títulos elevados por ELISA, sin evidencia clínica de Gumboro y of elevated ELISA titers, no clinical evidence of IBDV, performance acceptable
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Experiencia colombiana
Programa de vacunación
• Incubadora:• Marek‐Gumboro – Vacuna viva
• Vacuna inactivada ENC S.C.
• ENC B1B1‐IBV h120 spray
• En campo:• 12 días IBDV 2512 spray
• 14 días ENC VG/GA spray
• 18 días IBDV Moultrop spray
Nuevo programa de vacunación
• Incubadora:• Recombinante Marek‐Gumboro
• Vacuna inacivada ENC S.C.
• ENC B1B1‐IBV h120 spray
• En campo:• 14 days ENC VG/GA spray
Experiencia colombiana
Peso corporal
2.25
2.3
2.35
2.4
2.45
2.5
Dif: 134 g
Before rHVT With rHVT
Ganancia diaria de peso
53
54
55
56
57
58
59
Dif: 4 g
Before rHVT With rHVT
kg gr
Antes rHVT: 43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT: 128,320,000 pollos, 6,416 parvadas
Experiencia colombiana
Conversión alimenticia
1.74
1.76
1.78
1.8
1.82
1.84
1.86
1.88
1.9
Dif: 0.091 points
Before rHVT With rHVT
Mortalidad
0
1
2
3
4
5
6
7
Dif: 1.47
Before rHVT With rHVT
%
Antes rHVT: 43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT: 128,320,000 pollos, 6,416 parvadas
Experiencia colombiana
Eficiencia
115
120
125
130
135
140
Dif: 14 points
Before rHVT With rHVT
Edad al mercado
41.4
41.6
41.8
42
42.2
42.4
42.6
42.8
43
Dif: 1 day
Before rHVT With rHVT
Antes rHVT: 43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT: 128,320,000 pollos, 6,416 parvadas
Experiencia colombiana
Decomisos
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.5
0.6
Dif: 0.16%
Before rHVT With rHVT
Costo por uso antibióticos
0
0.002
0.004
0.006
0.008
0.01
0.012
0.014
0.016
Dif: 4 g
Before rHVT With rHVT
% USD
Antes rHVT: 43,008,418 pollos, 2,867 parvadasCon rHVT: 128,320,000 pollos, 6,416 parvadas College of Veterinary Medicine
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