CROMATOGRAFÍA DE GEL FILTRACIÓN

Columna de vidrio

Lana de vidrio Gel Sephadex G-25

1 2 3

1.- K3Fe(CN)4

2.- Hemoglobina

3.- Blue Dextrano

MATERIALES

PROCEDIMIENTO:

1) Coloque lana de vidrio en el fondo de la columna y apisonela con una varilla de vidrio.

1

2) Vierta la suspensión de gel , agitando esporádicamente con la varilla para resuspender el gel. Verifique que el tapón de la columna está cerrado.

2

3) Deje sedimentar el sólido (gel) y luego abra el tapón para descartar el líquido en exceso (el menisco del líquido debe quedar a la altura del gel).

líquido

lana de vidrio

Gel

(12 cm de altura)

3

4) Aplique gota a gota la muestra con la columna tapada. Acerque la punta de la pipeta al gel para que no se deforme el frente del gel con el agregado de muestra.

Muestra:

Mezcla de Proteína (roja)

+ Sal (amarilla)

4

Punta de la pipeta

5) Siga agregando buffer con la columna destapada, para que el frente siga avanzando. Observe la separación de los componentes de la mezcla. Recoja fracciones de 2ml a la salida de la columna.

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