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TEST DE COOMBSTEST DE COOMBS
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GENERALIDADES
De los sistemas serolgicos para demostrar la presencia de antgenos
o anticuerpos de grupos sanguneos, la Prueba de Coombs o
antiglobulina humana es considerada como la ms eficiente y de
mayor valor en el Banco de Sangre.
Principio de la prueba:Detectar inmunoglobulinas de la clase IgG y/o fracciones del
complemento ( C3d ) unidos a los G.R.
Obtencin:
El reactivo de antiglobulina se prepara inyectando a conejos
gamma globulina humana purificada para obtener suero
antiglobulina, y otras son inyectadas con componentes purificados
del complemento ( C3 ) para producir anticuerpos especficos contra
ellos .
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FUNDAMENTOS DE LA PRUEBA DE COOMBS
Los anticuerpos y complemento humano son globulinas y
adems son diferentes a otras especies; por lo tanto, se
comportan como antgenos cuando se inyectan a otras
animales.
Si un animal es inyectado con globulinas humanaspurificadas o con suero total, este animal elaborar
anticuerpos contra ellas, estos anticuerpos tendrn
especificidad antiglobulina humana.
El suero antiglobulina humana ( Suero de Coombs )
reaccionar especficamente contra las globulinas humanas.
Si los G.R. estn sensibilizados por las inmunoglobulinas, el
suero de Coombs se combinar con ellas.
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MECANISMO DE ACCION DEL REACTIVO
ANTIGLOBULINA HUMANA
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GENERALIDADES
La sensibilizacin de los G.R. se puede producir de dos formas:
a) In vivo, es decir, cuando la reaccin del antgeno con su
correspondiente anticuerpo se efecta en el organismo,
cuando ambos estn circulando como sucede, por ejemplo, en
caso anemias hemolticas autoinmunes, enfermedad
hemoltica del recin nacido, etc.
b) In vitro, la sensibilizacin de los G.R. por el anticuerpo se
realiza en un tubo de ensayo en el laboratorio. Si en el suero
existen anticuerpos contra los antgenos presentes , seproducir la reaccin antgeno-anticuerpo y los G.R.
quedaran sensibilizados.
Para demostrar la sensibilidad de los G.R. sea in vivo o in vitro
existen dos modalidades en la prueba de antiglobulina
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PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA
Detecta la sensibilizacin de G.R. in vivo. Tiene valor dx. en:
* Enfermedad hemoltica del recin nacido* Anemia hemoltica autoinmune
* Anemia hemoltica y
sensibilizacin inducida por drogas *
Investigacin de reacciones transfusionales.Procedimientono
Interpretacin:
a) Si la prueba de Coombs muestra aglutinacin, se interpretapositiva, significa que hubo sensibilizacin de los G.R. in
vivo, se seala en cruces, vg. 4 +
b) Si no hubo aglutinacin, la prueba es negativa y significa
que no existe autosensibilizacin eritroctica. La prueba
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COOMBS DIRECTO
PROCEDIMIENTO
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PREPARACIN PARA LA PRUEBA
a. Lavar los eritrocitos del paciente cuando menos 3
veces en solucin salina con una concentracin al 4 %
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Adicin del SueroAnti-Humanoa. Colocar en un tubo de ensayo una a dos gotas del suero deCoombs
b. Agregar una gota de eritrocitos lavados al tubo de ensayo
c. Mezclar bien con una suave agitacin. Centrifugar 20 seg. a
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3 REACCIN
a. Resuspender los eritrocitos para ver aglutinacin
macroscpicab. Una reaccin ne ativa confirmarla or medio de
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4 INTERPRETACIN
a. TUBO SUPERIOR: Aglutinacin eritrocitos cubiertos con
anticuerpo
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PRUEBA DE COOMBS INDIRECTAPermite detectar G.R. sensibilizados in vitro. El suero en estudio es
incubado con los G.R. por el tiempo adecuado, luego se lavan para
eliminar anticuerpos y otras inmunoglobulinas que no se hanfijado en el eritrocito.
Se investiga anticuerpos irregulares en el suero
La deteccin de anticuerpos presentes en el suero se realiza con:
a) G.R. especialmente seleccionados: clulas detectaras, en las cuales
se encuentran presentes los antgenos de grupos sanguneos
correspondientes a los anticuerpos de mayor frecuencia e
importancia clnica.
b) G.R. de gentica conocida ( panel ). Se usa despus de haber
demostrado anticuerpos irregulares mediante las clulas
detectoras.
c) Con G.R. desconocidos como en la Prueba de compatibilidad.
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1 PREPARACIN PARA LA PRUEBA
a. Lavar G.R. del donante en solucin salina normal con unaconcentracin al 4 %
b. Coloque dos gotas del suero del receptor en cada uno de los
EN IBILIZ CIN DE
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2SENSIBILIZACIN DE
LOS ERITROCITOS
a. Agregue una gota de eritrocitos lavados a cada uno de los
tubos de ensayob. Mezcle con suave a itacin e incube durante 15 a 60
LAVADO DE LOS ERITROCITOS ANTES DE
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3LAVADO DE LOS ERITROCITOS ANTES DE
LA PRUEBA DE COOMBS
a) Lave los eritrocitos tres veces con una solucin salina
normal, decantando tanta solucin como sea posibledespus del ltimo lavado
ADICIN DEL SUERO
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4ADICIN DEL SUERO
ANTI-HUMANO
a) Agregue una o dos gotas del suero de Coombs.
b) Mezclar bien y centrifugar y resuspender los eritrocitos.Observar si hay aglutinacin.
c) Una reaccin negativa puede ser confirmada por
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TUBO SUPERIOR: Aglutinacin Prueba cruzada mayor
incompatible
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PRUEBA DE COOMBS INDIRECTAInterpretacin
a) Si hay aglutinacin: prueba de Coombs indirecta positiva,
presencia de anticuerpos irregulares en el suero.
b) Si no hay aglutinacin : Coombs indirecto negativa. Es vlido el
resultado si la prueba control de Coombs es positiva, y si esta
ltima es negativa, la prueba es invlida. Debe repetirse el
procedimiento.
Indicaciones
* Como screening en: embarazo, donantes de sangre,
*Pacientes que est recibiendotransfusiones o ya las ha recibido
* Identificar cualquier
anticuerpo encontrado en el screening
* Pruebas decompatibilidad *
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RESULTADO DE TECNICAS DE AGLUTINACION Y DE
ELISA EN PACIENTE CON PRUEBA DE COOMBS
NEGATIVA
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